소나무속의 3수종, 소나무, 리기다소나무 및 잣나무의 부위별 추출물을 병원진균인 Colletotrichum gloeosporioides를 대상으로 항균활성을 조사하였다. 위 균주에 대하여 가장 우수한 항균활성은 잣나무 수피 및 근피 EtOAc 분획분에서 나타났는데 5.0 mg/l 농도에서 각각 98.8%와 100%로 조사되었다. 한편 두 분획분의 위 균주에 대한 $ED_{50}$(median effective dose)는 각각 469 ${\mu}g/ml$및 588 ${\mu}g/ml$로 조사되어 수피 추출물이 보다 낮은 값을 나타내었다. 잣나무 수피 EtOAc 분획분의 다른 병원진균 Alternaria brassicicola 및 Fusarium oxysporum에 대한 $ED_{50}$는 각각 533 ${\mu}g/ml$ 및 2,277 ${\mu}g/ml$로 나타나 이 분획분의 항균활성은 F. oxysporum보다 C. gloeosporiodes나 A. brassicicola이 더 우수한 것으로 조사되었다. 한편 잎 추출물의 경우를 보면, 소나무 잎 EtOAc 분획분은 C. gloeosporiodes에 대하여 5.0 mg/l 농도에서 39.6%의 활성을 보였으나 다른 두 수종의 잎 추출물에서는 추출 용액에 상관없이 거의 활성이 나타나지 않았다. 현재 주요 항균활성 화합물들은 분리, 동정 중에 있다.
The outer bark of Prunus sargentii was collected, air-dried and extracted with 70% aqueous acetone. Then it was successively partitioned with n-hexane, dichloromethane ($CH_2Cl_2$), ethyl acetate (EtOAc) and $H_2O$. From the EtOAc soluble fraction, four compounds were isolated by the repeated Sephadex LH-20 column chromatography. The isolated compounds were determined as (+)-catechin (1), (-)-epicatechin (2), taxifolin (3), and neosakuranin (4) by the spectroscopic analysis including $^1H$, $^{13}C$-NMR, and 2D-NMR spectrometers. The antioxidative activities on the isolated compounds and the separated fractions were evaluated by DPPH radical scavenging assay. The crude, EtOAc, and $H_2O$ soluble fractions indicated good antioxidative potential compared to the $CH_2Cl_2$ and n-hexane soluble fractions.
Japanese anise (Illicium anisatum L.) leaves were collected and ground after drying, then immersed with 50 % aqueous acetone for 3 days. After filtration, the extracts were fractionated with n-hexane, chloroform ($CHCl_3$), ethylacetate (EtOAc) and $H_2O$, and then freeze dried after concentration. A portion of EtOAc (3.12 g) and $H_2O$ (6.08 g) soluble fractions were chromatographed on a Sephadex LH-20 column with various aqueous MeOH solution to isolate the compounds. Compound 1 ((+)-catechin) was isolated from EtOAc soluble fraction. Compounds 2 (quercetin), 3 (quercitrin) and 4 (2''-O-rhamnosylvitexin) were isolated from $H_2O$ soluble fraction. For the first time, quercitrin (3) and 2''-O-rhamnosylvitexin (4) of the isolated compounds were obtained from the extracts of japanese anise leaves.
본 연구는 어성초(Houttuynia cordata Thunb)의 메탄올 추출에 의한 유기 용매별 분획물에서 항산화 효과를 근거로 산화적 스트레스에 의한 HaCaT 세포보호 효과를 확인하였다. 용매별 분획물의 항산화 활성은 시료의 농도가 증가할수록 DPPH에 대한 전자공여능도 증가하였으며, $ED_{50}$은 ethyl acetate (EtOAc) 분획물에서 $175{\mu}g/ml$로 가장 높게 나타났다. $H_2O_2$에 의해 유도된 HaCaT 세포의 세포사멸($IC_{50}$)에 대하여 Hc-EtOAc 분획물은 농도 의존적으로 유의적인 세포 생존율과, $100{\mu}g/ml$ 농도에서 74%의 세포보호 효과를 나타내었다. 한편 $100{\mu}g/ml$의 Hc-EtOAc 분획물을 6 및 24시간 동안 HaCaT 세포에 처리하여 유전자 발현 양상을 분석하였다. 2 배 이상 발현이 증가된 유전자들은 신호전달, 세포분열, 항산화 활성, 상피세포 증식 등에 작용하는 것으로 나타났다. 특히 항산화 활성에 관여할 것으로 추정되는 유전자는 전염증성 사이토카인인 IL1B, TNF, 그리고 IL6 등 이었으며, 이들 유전자의 상위 조절자로써 TLR4가 확인되었다. IL1B, TNF, 그리고 IL6 유전자의 활성을 검증하기 위하여 qRT-PCR을 수행한 결과, $100{\mu}g/ml$ 이상의 Hc-EtOAc 분획물 처리군에서 2 배 이상 발현이 증가한 것으로 나타났다. 상위 조절자 TLR4 단백질의 활성 역시 Hc-EtOAc 분획물에 의해 증가되었다. 이상의 결과, Hc-EtOAc 분획물에 의한 항산화 활성은 TLR4로부터 IL1B, TNF, IL6과 같은 사이토카인을 경유하는 것으로 예측된다.
Choi, Soo Yeon;Kim, Ji Hyun;Quilantang, Norman G.;Lee, Sanghyun;Cho, Eun Ju
Natural Product Sciences
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제24권3호
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pp.148-154
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2018
Chronic oxidative stress due to the accumulation of reactive oxygen species (ROS) in neuronal cells ultimately leads to neurodegenerative diseases. The use of natural therapies for the prevention of ROS-induced cell damage and for the treatment of neurodegenerative disorders has shown promising results. In this study, we evaluated the neuroprotective effects of the ethyl acetate (EtOAc) fraction of A. okamotoanum against the hydrogen peroxide ($H_2O_2$)-induced oxidative stress in C6 glial cells. Results show that cell viability was decreased in cells incubated with $H_2O_2$, whereas the addition of EtOAc fraction treatments in such cells significantly increased viability. The EtOAc fraction showed the highest inhibitory activity against ROS production and it also decreased the expressions of inflammatory proteins including cyclooxygenase-2, inducible nitric oxide synthase and interleukin-$1{\beta}$. Furthermore, the EtOAc fraction inhibited apoptosis by regulating the protein expressions cleaved caspase -9, -3, poly ADP ribose polymerase, Bax and Bcl-2. Therefore, these results show that the EtOAc fraction of A. Okamotoanum exhibits neuroprotective effects against $H_2O_2$ induced oxidative damage by regulating the inflammatory reaction and apoptotic pathway.
Obesity is a physical condition that results from excessive storage of fat in the body. The present study examined the anti-obesity effects of the selected natural medicine, Galla rhois extract (GRE) and solvent fractions on 3T3-L1 preadipocytes and in vivo studies. Here, we show that EtOAc fraction of Galla rhois inhibits the differentiation of the 3T3-L1 preadipocytes induced by differentiated medium in a dose-dependent manner. To investigate the effect of the GRE-EtOAc fraction on obesity in high fat diet-fed C57BL/6 mice, which included a normal diet (ND), high-fat diet (HFD) and HFD+GRE concentration-dependent, were fed to the mice for 6 weeks. The GRE-EtOAc fraction was inhibited the highest adipocyte differentiation in vitro, the GRE supplement significantly decreased body weight and visceral fat mass compared to the HFD group. The total cholesterol and triglyceride levels in the plasma were significantly decreased by GRE supplementation compared with those of the HFD group. Also, we aimed to determine the differentiation inhibition and the modulation of differentiation genes brought about by the Galla rhois in adipocyte. A cDNA microarray-based method was introduced for the high contents screening (HCS) of gene expressions. This technology has revolutionized gene expression studies by providing the means to measure mRNA levels in thousands of genes simultaneously in simple and complex biological samples. 13 genes were founded to be affected in their expression levels by more than 5-fold up-regulation after 4 days treatment with the EtOAc fraction from Galla rhois. Otherwise, 21 genes were founded to be affected in their expression levels by more than 5-fold down-regulation treated with the EtOAc fraction. Therefore, Galla rhois extract may be considered for use in a therapeutic agent to control obesity.
본 연구에서 와송 에틸아세테이트 분획물을 항균활성 및 화장품 소재로 활용하기 위해 연구를 진행하였다. 와송 에틸아세테이트 분획물의 항균활성을 측정한 결과 Paper disc method에서 S. aureus, S. epidermidis, P. aeruginosa 균의 생육을 저해하였으며, 특히 S. aureus에 대한 생육저해환은 0.5 g/mL농도에서 18.35 ± 1.5 mm로 대조군인 methyl paraben(16.83 ± 1.0 mm)보다 우수한 항균활성을 나타내었다. MIC 측정을 통한 최소저해농도를 평가에서는 Candida. A를 제외한 나머지 S. aureus, S. epidermidis, E. coli P. aeruginosa 균주에서 17.5 mg/mL의 최소저해농도를 보였으며 화장품 에멀션 제형에 적용하여 Challenge test를 통해 방부 효능을 평가한 결과, S. aureus에 대하여 와송 에틸아세테이트 분획물을 0.3% 첨가한 에멀션에서 7일 후 100.0%균의 생장을 사멸시켜 화장품에 적용 시 우수한 방부효능을 나타내었다.
왕지네 에탄올 추출물 및 순차적 분획물 중 디클로로메탄과 에틸아세테이트 분획물에서 HL-60 세포 성장이 강하게 억제되었다. 또한, 디클로로메탄과 에틸아세테이트 분획물을 처리하였을 때 apoptosis의 특징인 DNA 절편화, 핵의 응축과 apoptotic body가 관찰되었다. 이는 왕지네 분획물의 암세포성장 억제가 apoptosis에 의해 억제되는 것을 알 수 있었다. 디클로로메탄과 에틸아세테이트 분획물의 apoptosis 유도는 anti-apoptosis 단백질인 Bcl-xL의 억제를 통하여 apoptosis 유도가 시작되고 세포사멸에 직접적으로 영향을 미치는 casapse-3과 PARP의 활성을 일으켜 apoptosis를 유도하였다. 본 연구는 왕지네의 항암효과를 과학적 근거를 제시하고 기능성식품이나 항암제로 개발할 있는 가능성을 제시하였다. 향후 왕지네를 이용한 제품의 개발을 위해서는 유효성분의 동정 및 그 성분의 작용 기전에 대한 추가 연구가 필요할 것으로 보인다.
본 연구는 차로써 이용이 증대되고 있는 구절초 꽃의 항산화 능력과 이와 관련된 유효한 성분을 탐색하고자 수행되었다. 구절초 꽃을 MeOH로 추출한 수율은 16%였고, MeOH 추출물을 다시 용매별로 분획한 결과 잔류 water > n-hexane > EtOAc > n-BuOH > $CHCl_3$ 분획물 순으로 추출수율을 보였다. 총 polyphenol 함량은 EtOAc분획물이 $195mg{\cdot}g^{-1}$으로 가장 높았고 그 다음으로 MeOH 추출물, $CHCl_3$, 잔류 water, n-BuOH, n-hexane 분획물 순으로 높게 나왔다. Flavonoid 함량 역시 EtOAc 분획물이 $143mg{\cdot}g^{-1}$으로 가장 높게 나타났으며 그 다음으로는 n-BuOH, n-hexane, 메탄올, 잔류 water, $CHCl_3$ 분획물 순으로 높았다. 구절초의 전자공여능과 총 항산화력 측정에서는 추출물의 농도가 높아질수록 활성이 증가하였으며 EtOAc 분획물이 $100{\mu}g{\cdot}mL^{-1}$에서 81.56%, 68.12%의 가장 높은 전자공여능 및 총 항산화력을 나타내었다. 구절초 MeOH 추출물과 EtOAc분획물을 HPLC로 분석한 결과 flavonoid 유효성분으로 quercetin과 luteolin이 확인되었으며 EtOAc 분획물 경우 각각의 함량이 $20.02mg{\cdot}g^{-1}$, $1.65mg{\cdot}g^{-1}$이었다. 이상의 결과를 종합해볼 때, 구절초 꽃의 항산화력은 MeOH 추출물의 EtOAc 분획에 포함된 quercetin에 주로 기인하는 것으로 판단되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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