A dog (5.6 kg, 4-year-old, castrated male, Miniature pinscher) with diffuse symmetric alopecia on the chest and excessive scales was referred to Veterinary Medical Teaching Hospital of Chungnam National University, Korea. On physical examination, diffuse alopecia on ventral aspect of the neck and caudomedial thighs, and severe scales were presented. Dermatologic tests of lesions revealed bacterial infections. Histopathologically, atrophy of hair bulb was observed in the severely alopecic lesion of caudomedial thighs. ACTH stimulation test was performed to differentiate the endocrine disorder related to generalized alopecia. The pre-ACTH serum testosterone and progesterone concentrations were above normal ranges and the post-ACTH serum testosterone concentration was high. The pre- and post-ACTH serum estradiol and cortisol concentrations were within normal ranges. Canine pattern alopecia was diagnosed based on history, physical examination, hormonal assay and dermatohistopathologic examination. After 3 months of melatonin administration, multifocal alopecia on the trunk was improved and general hair regrowth was identified.
1. The weights of ovary and uternus in the all treated groups were lighter than those in control group showing significantly differences from 4 weeks after treatment. The significant was not recognized between PTU and Thx. groups, and Thyro. and control groups. 2. In the histological changes of ovary, follicles were disa, pp.ared and alignment of membrana granulosa disnitergration in cell change were serious in Thx. and PTU groups and slight in Thyro. group. 3. In the histological changes of uterus, endometrial epithelium and lamina propria were atrophied from 3 weeks after treatment in Thx. group, from 4 weeks in PTU groups and from 5 weeks in Thyro. group. Muscular layers were atrophied with time elapse in the all treated groups. 4. The changes of the concentrations of serum progesterone at all observation times in Thx. and PTU groups were significantly decreased in comparison with those in control group. While those in Thyro. group were significantly increased in comparison with those in control group. 5. The concentration of serum estradiol-17$\beta$ at all observation times in all experimental groups were below 27.2pg/ml. Therefore, we did not detect any changes of the concentrations.
Effects of bisphenol-A (BPA) on vitellogenin (VTG) synthesis and estrogen-estrogen receptor $(E_2- ER)$ binding activity were examined in primary hepatocyte cultures of rainbow trout, Oncorhynchus mykiss. Hepatocytes were precultured for 2 days and then $estradiol-17\beta\;(E_2,\;2\times10^{-6}M)\;BPA\;(10^{-5}-10^{-8}M)$ and/or 4-hydroxy-tamoxifen $(4-OHT,\;10^{-6} M)$ were simultaneously added to the incubation medium. Hepatocytes were cultured for 5 more days and then spent medium was analyzed by SDS-PAGE for VTG production. The addition of BPA to the incubation medium had no effect on the viability of hepatocytes in the culture. On the other hand, BPA increased VTG production in a concentration-dependent way and a significant increment occurred at BPA concentrations greater than $10^{-6}$M. Although VTG was increased by the addition of $E_2\;(2\times10^{-6}\;M)\;or\;BPA\;(10^{-5}M)$, its were reduced by a simultaneous 4-OHT $(10^{-6}\;M)$ addition. BPA inhibited $E_2-human$ ER binding activity by $72\%$ at $10^{-5}$ M of BPA. These results suggested that BPA induced VTG synthesis by BPA-ER binding activity in the hepatocyte of rainbow trout.
This investigation was intended to find out the estrogenic effect of chlortetracycline (CTC) on vitellogenin induction in adult male Japanese medaka (Oryzias latipes). Vitellogenin (Vtg) produced in male fish has been used to as one of a biomarker of endocrine disrupters. The positive control was $17{\beta}-estradiol$ (E2) that induced Vtg in male fish. As a result, male and female fish were exposed to 0.1, 1, 10 and 100 ppm of CTC. Western blot results showed approximately 205 kDa, that is similar to myosin at high molecular weight range Sigma maker. Vtg band was showed fainted to 10 and 100ppm for chlortetracycline. Vtg concentration of CTC was qunatified by total protein quantification and ELISA. Exposure of the male fish to CTC of 0.1, 1, 10 and 100 ppm produced Vtg concentrations of 0.24, 0.12, 7.61 and 40.02%o, respectively, that value was elevated than control male fish (0.14%o). CTC exerted as a Vtg inducer in male fish from 10 ppm, but it was a reducer in female fish from 0.1 ppm level. The results say that vitellogenin induction patterns alter in male medaka treated with CTC, and that CTC may caused endocrine disruption in fish.
To establish whether or not androgens is responsible for the induction of vitellogenin(Vg) synthesis and secretion, primary hepatocytes prepared from immature eels were used. The results are follows: 1. Eel hepatocytes were prepared using a collagenase perfusion technique. The isolated cells attached efficiently to fibronectin-coated dishes and subsequently formed monolayers in serum-free medium. These cultures maintained in medium for 10 days with minimal cell loss. 2. Estradiol-17$\beta$(E2) alone was insufficient to induce Vg synthesis. The combination of E2 with methyltestosterone(MT) markedly stimulated Vg synthesis. High vg production occurred in MT concentration from 10-6~10-5M in the presence of E2 (10-6M). Testosterone and androsterone were also effective, but progesterone was not effective in inducing Vg synthesis. Neither MT alone nor testosterone and androsterone alone had any effect on Vg synthesis. 3. E2-primed hepatocytes showed Vg synthesis in both media with and without hormones 1 day after culture. In the cultures with the vehicle, MT, or progesterone, the rate of synthesis seemed to decrease with time. But the combination of E2 and MT showed an intense increase in Vg synthesis. Hepatocytes isolated from E2-primed eels also required androgens for continuating of Vg synthesis. 4. These results demonstrate that androgens act together with E2 in synthesis and secretion of eel Vg.
1년령의 중성화 암컷, 2.35 kg의 아메리칸 숏헤어 고양이가 난소 자궁 절제술을 실시한 후 3개월 시점으로부터 2개월간 지속된 발정 증상을 주증으로 내원하였다. 방사선 및 초음파 검사상, 양쪽 신장 후방에 위치한 낭성 구조물을 확인하였고, 이는 혈액검사상 나타난 고에스트로겐혈증을 고려하여 난소 조직으로 의심되었다. 복강경을 이용한 복강 탐색을 실시하였고, 양측 신장 후방의 낭성 병변을 초음파 수술도를 이용하여 절제하였다. 환자는 특이사항 없이 회복하여 술 후 2년간 증상의 재발 없이 지내고 있다. 증례를 통하여, 선택적 난소 절제술뿐만 아니라 잔존 난소의 경우에도 복강경을 유용하게 적용할 수 있음을 확인하였다.
Mammary orgamoids(ductal and endbud fragments) were cultured in a complete hormone medium(CHM) with 10%FBS, estradiol, progesterone, hydrocortisone, insulin, and prolactin, Several types of colonies were observed: stellate(14$$\pm$5.5%), duct(41$\pm$5.6%), web(35$\pm$3.6%), squamous(6$\pm$2.1%), and lobuloduct(4$\pm$1.2%), Squamous colony was typical squamous metaplasia(SM) with several layers of squamous epithlia and keratin pearls. At the immunocytochemical study, casein proteins were predominantly localized near the apical surfaces of the cells or in the lumina of ductal or lobuloductal colonies. To inhibit the formation of SM, we treated organoids with all-trans retinoic acid(RA) from 10$^{-6}$ to 10$^{-17}$ M in CHM. Formation of SN was completely inhibited at 10$^{-9}$M RA in CHM. The frequency of lobuloductal colony formation was increased with the augmentation of RA concentration.
In order to study the mechanism of follicular atresia, the follicles of the porcine ovary were isolated according to the presence or absence of the corpus luteum and their size, and then classified to the normal? or atretic?follicle on the morphological observation such as the transparency, the vascularization of follicle, the nuclear phase of oocyte, and the homogeneity of the granulosa cell layer. The viability of granulosa cells was examined. The concentrations of progesterone ($P_4$), testosterone (T), and estradiol-17 beta ($E_2$) in each follicular fluid were estimated by the radioimmunoassay. The viability of granulosa cells in the atretic follicle was much lower than that of the normal one. The concentration of each steroid hormone increased as the follicular size was increased, was not different in quantity between the normal- and the atretic follicle of which diameter was below 3mm, and were much higher in the atretic follicle than those in the normal one of which diameter was above 7mm. The ratio of the concentration of E2 to T in the large atretic follicle valued higher than that in the normal one, but smaller in the small and medium atretic follicle than that in the normal one. The present study suggests that the mechanism of atresia of the large follicle may be different from that of the small and the medium follicle and that the amount of steroid hormones regarded as the one of the criteria for the atretic follicles.
The effects of soy-isoflavones, which are phytoestrogens derived from plants with a flavonoid structure, on cyclooxygenase -2 (COX-2) expression, PGE2 production, and mapkinases expression, were investigated in experimentally-induced atherogenic rats by feeding a high fat-high cholesterol diet. Female Sprague-Dawley rats were bilaterally ovariectomized; sham-operated animals were used as controls. Three weeks later, the animals were randomized to the following treatments for an eight-week experimental period: 17$\beta$-estradiol (200$\mu$ g/kg diet), low concentration of isoflavones (0.8g/kg diet), and high concentration of isoflavones (4.0g/kg diet). In the group supplemented with a high dose of isoflavones, COX-2 expression was down-regulated. This down-regulation was accompanied by a reduced expression of pERK1/2. In the second experiment using 48-week old female Sprague-Dawly rats, the effects of isoflavones and estrogen were compared in the basal estrogen-supplementation at the level of 600$\mu$ g/kg diet. Isoflavones induced the marked down-regulation of COX-2 protein and the decrease in $PGE_2$ production in estrogen supplemented states and this was followed by the down-regulation of p38 among mapkinases. The two different mapkinases are involved in the down-regulation of COX-2 depending on estrogen-deficient and estrogen supplemented states. This kind of COX-2 down-regulation by isoflavones was not observed in the different tissue, mammary glands. Further investigations on the relationship between COX-2 and biological activities such as vasodilation by isoflavonesin the absence or the presence of estrogen ave required in vivo system of female rats.
It is well known that diesel exhaust particulate matter contains mutagenic PAHs, such as benzo[${\alpha}$]pyrene, benz[${\alpha}$]anthracene, chrysene, etc. Therefore it is suspected that these chemicals act on estrogen receptor and reveal endocrine-disrupting effects. Recent attention has focused on causative chemicals of endocrine-disrupting effects. We examined the estrogenic activity of respirable diesel exhaust particulate matter derived from diesel powered vehicle. PM2.5 diesel exhaust of vehicle was collected using a high volume sampler equipped with a cascade impactor. Diesel exhaust samples were fractionated according to EPA methods. The presence of estrogenic and antiestrogenic chemicals in PM 2.5 diesel exhaust was determined using E-screen assay. To quantitatively assess the estrogenic and antiestrogenic activities in diesel exhaust particulate matter, estradiol equivalent concentration (bio-EEQ) was calculated by comparing the concentration response curve of the sample with those of the estrogen calibration curve. Weak estrogenic activities and strong antiestrogenic activities were detected in the crude extract and moderately polar fractions. Higher antiestrogenic potency was observed with higher EROD activities in aliphatic and aromatic compounds fraction. In conclusion, estrogenic/antiestrogenic-like activities were present in diesel exhaust particulate matter. However, the health consequences of this observation was unknown, the presence of these activities may contribute to and exacerbate adverse health effect evoked by diesel exhaust particulate matter.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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