High Voltage Pulsed Current Stimulation(HVPCS) and Microcurrent Electrical Neuromuscular Stimulation(MENS) have been used to promote the healing of decubitus ulcer and surgical wounds. The benefits of HVPCS and MENS are thought to include an inhibitive effect on bacterial growth. The purpose of this study was to compare the inhibitive effect of two different electrical stimulation techniques growth in vitro. Using agarose-based media, the two bacterial species Staphylococcus aureus, Esherichia coli - which are commonly isolated from open wounds were incubated in an incubator for 24 hours following exposure to HVPCS(400 V, 120 pps, $70{\mu}s$) and MENS($100{\mu}A$, 0.3 Hz). We then measured the zone of inhibition around each electrode. Both HVPCS and MENS produced an inhibitive effect on bacterial growth in this vitro study. However MENS was more effective than HVPCS.
Peptide assimilation by Helicobacter pylori was investigated using L-phenylalanyl-3-thia-phenylalanine (PSP) as a detector peptide; the release of thiophenol upon enzymatic hydrolysis of PSP was spectrophotometrically detected with the aid of 5,5'-dithiobis[2-nitrobenzoic acid] (DTNB). By adding PSP to whole-cell suspension, thiophenol was produced progressively, resembling that found in Esherichia coli or Staphylococcus aureus. Interestingly, the rate of thiophenol production by H pylori in particular was markedly reduced when cells were pretreated with trypsin, indicating surface exhibition of peptidase. According to the competitive spectrophotometry using alanyl-peptides, H pylori did not appear to assimilate PSP through the peptide transport system. No discernible PSP assimilation could be ascertained in H pylori cells, unless provided with some additives necessary for peptidase activity, such as $Ni^{2+}\;or\;Mg^{2+}$ and an appropriate concentration of potassium or ammonium salts. These observations strongly suggest that, regardless of a presumptive peptide transport system, peptide assimilation of H. plori appears to be highly dependent upon milieu conditions, due to unique peptidase exhibition on the cell surface.
Drug delivery system(DDS) have been actively studied for the past twenty years. Dual action agents are unique chemical entities comprised of two different types of antibacterial compounds covalently linked together in a single molecule in such a way that both components are able to exert their bactericidal properties. In spite of the advent of the antibacterial agent the sulfa agents are the most widely used antibacterial agent today. In this study, new antibacterials derivative was synthesized using glutaraldehyde such as crosslinking agent for the purpose of dual-action as DDS study. Antibacterial activity of these new synthetic derivative between their structures and activities were examined by disc diffusion method. As a result, new synthetic derivative exhibited the broad antibacterial activities against Gram(+) and Gram(-) bacilli. Especially, the antibacterial effect of new synthetic derivative against Gram negative(Esherichia. coli) was much stronger than that against Gram positive.
This study has been carried out for the antimicrobial effects of organic silicon quaternary ammonium salt with which cotton, polyester, and wool were treated respectively, using Esherichia coli and Proteus bulgaris which are experimental bacteria for clothing materials. As a results, the best antimicrobial effects of organic silicon quaternary ammonium salt came out from cotton ; the next form wool ; and lower from polyester. With the changes of the temperature, the antimicrobial effect with soaking time, there was no changes with cotton after 10 minutes passed. It seemed to have reacted entirely in the early stage. The longer the soaking duration was, the higher the effect from polyester was. The effect from wool was increased until 20 minutes, but decreased after 30 minutes. The optimal processing condition of cotton was in the condition of liquor ratio 40:1, concentration 0.5%, soaking time 5 minutes, and temperature 3$0^{\circ}C$ ; wool was 1.5%, 20 minutes, and 6$0^{\circ}C$ ; polyester was 2.0%, 30 minutes, and 3$0^{\circ}C$ respectively. The changes of the effect by washing was as followings : The processing effect on cotton and wool appeared to be everlasting, since they had no changes by washing 10 times ; while, it was remarkablely decreased with polyester by washing only once, and was almost disappeared after washing 10 times, which means that polyester has no durability to washing.
Mycobacterium tuberculosis is capable of growing and survival within macrophage. The purpose of this study was to identify the genes regulated by infection of mycobacteria in human monocytic THP-1 cells. We used the differential display reverse transcriptase polymerase chain reaction (DD RT-PCR) and nothern blot analysis to confirm the differentially expressed genes from THP-1 cells infected with live Mycobacterium tuberculosis H37Rv, heat-killed Mycobacterium tuberculosis H37Rv and live Mycobacterium bovis BCG. Among many up or down-regulated clones, 27 clones were sequenced and compared with known genes on GenBank. Thirteen of over-expressed clones from THP-1 cells infected with live Mycobacterium tuberculosis H37Rv were identical to human prothymosin alpha, eight were novel clones and six clones showed homology with Human ferritin H chain, Esherichia coli bgl, Mouse RNA-dependent EIF-2 alpha kinase, E. coli htrL, Hyaluronan receptor and T cell receptor. Our result suggests that Mycobacterium tuberculosis might regulate prothymosin alpha gene transcription in monocytic THP-1 cell.
고삼 75% 에탄올 추출물과 클로로포름 분획물을 첨가하여 몇가지 식중독 미생물의 증식억제 양상과 분리된 유효 물질의 구조를 확인하였다. 이 분획물의 항균 효과를 시험한 결과 Listeria monocytogenes (ATCC 19111, 19112, 19113, 19114 및 15313)에 대한 최소 증식억제 농도가 각각 $50{\sim}500\;ppm$과 50 ppm 이하로 확인되었다. 항균 활성을 보인 클로로포름 분획물을 silica gel column chromatography로 연속 2회 정제하여 얻은 황색 분말의 항균 활성 소획분 S-10-6은 L. monocytogenes 5 균주, Bacillus subtilis 및 Staphylococcus aureus에 대해서는 10 ppm 농도에서 뚜렷한 증식억제 효과를 보였으며 특히 L. monocytogenes 5균주에 대해서는 $30{\sim}50\;ppm$ 수준에서 살균 효과가 인정되었으나 E. coli 경우 100 ppm 농도에서도 증식억제 효과가 없었다. 항균 활성을 보인 소획분(S-10-6)을 IR, $^1H-NMR$ 및 $^{13}C-NMR$로 구조를 동정한 결과 flavanone 화합물의 하나인 kushenol F로 확인되었다.
Leptin gene, an obesity gene, has been known to involve in the regulation of food intake and body weight. It is also thought to be related to the glucose metabolism, insulin secretion and type II diabetes mellitus. Recently, the production of recombinant leptin protein has been attempted for the application in the treatment of obesity and the correction of hereditary obesity and type II diabetes. In the present study, leptin cDNA was cloned from mouse fat cells by RT-PCR and prokaryotic expression of leptin was attempted in order ot prepare a leptin-specific antigen. Immunization of a rabbit with the leptin-specific antigen into a rabbit resulted in the generation of leptin-specific antiserum that could be useful in the detection of leption expressed in various tissues. The sequence of leptin cDNA prepared in the present study wa identical to the previously reported one. Transformation of E. coli(DH5a) cells with the leptin cDNA-inserted translation vector, pGEX-4T-3-leptin followed by treatment with IPTG (0.1mM) resulted in the expression of a large amount of GST-leptin fusion protein with a molecular weight of 44 KDa as an inclusion body. Denaturation of the insoluble fusion protein by 8M urea, 6M guanidium-HCI or 0.1% 2-mercaptoethanol followed by a slow oxidation could not solubilize the inclusion body. The cell extract was subjected to SDS-PAGE and GST-leptin protein electroeluted from the gel was then injected into a rabbit subcutaneously for the immunization. Anti-GST-leptin rabbit antiserum which had a cross reactivity to the GST-leptin protein was generated. Leptin protein expressed in mouse brain and fat tissues was detected by Western blot immunodetection system using the antiserum generated in the present study.
경기 남부지역의 편의점을 중심으로 판매중인 5종의 삼각김밥과 5종의 샌드위치를 대상으로 오염도를 분석한 결과 총호기성균은 삼각김밥에서 $3.50-5.54\;log_{10}CFU/g$, 샌드위치에서 $3.88-6.29\;log_{10}CFU/g$의 수준이었으며, 대장균은 삼각깁밥에서 $1.25-3.17\;log_{10}CFU/g$, 샌드위치에서 $1.53-5.08\;log_{10}CFU/g$의 수준을 보였다. E. coli는 샐러드원료의 한개의 시료를 제외한 모든 삼각김밥과 샌드위치에서 검출되지 않았다. S. aureus는 삼각김밥에서 64% 검출빈도에 $0.30-5.20\;log_{10}CFU/g$수준의 오염과 샌드위치에서는 76% 검출빈도에 $0.10-4.18\;log_{10}CFU/g$수준의 오염도를 보였다. B. cereus는 삼각김밥에서 20% 검출빈도에 $0.88-2.48\;log_{10}CFU/g$수준의 오염과 샌드위치에서는 38% 검출빈도에 $0.22-2.18\;log_{10}CFU/g$수준의 오염도를 보였다. 전반적으로 경기도 남부지역의 편의점에서 판매되고 있는 삼각김밥과 샌드위치의 위생상태는 좋지 않은 것으로 판단되며 본 연구에서 밝혀진 식중독균의 정량적 분석자료는 미생물위해평가(MRA)의 기초자료로 활용될 수 있을 것이다.
본 연구에서는 높은 분리능을 가지고 있을 뿐만 아니라 실험의 재현성과 경제성의 측면에서도 많은 장점을 갖고 있는 ERIC DNA sequence를 응용한 ERIC-PCR을 이용하여 Salmonella, E. coli, Shigella, Vibrio 등 4속의 주요 그람 음성 식중독유발 세균들의 분리 동정 방법을 확립하고자 하였다. ERIC-PCR 결과, E. coli의 경우 0.3kb, 0.42kb 및 1.2kb의 band가 모든 균주에서 공통적으로 확인되었고, Salmonella속으로부터는 0.22kb, 0.4kb 및 0.7kb의 band가 증폭되었다. Shigella속은 모든 표준균주와 분리균주로부터 0.33kb와 1.25kb의 band가 증폭되었으며, S. sonnei의 경우 위의 주요 2개 band 이외에도 대부분의 균주에서 0.44kb, 2.0kb 및 3.05kb의 band가 증폭되어 다른 종의 Shigella와 구별되는 fingerprinting pattern을 나타내었다. 그리고 V. parahaemolyticus의 경우 표준균주와 분리균주 모두 0.51kb와 1.5kb의 band가 증폭되어 V. cholerae, V. mimicus 등과 같은 다른 종의 Vibrio와 구별되는 fingerprinting pattern을 나타내었다. 이와 같이 4속의 모든 식중독 균주마다 ERIC-PCR후 생성되는 fingerprinting pattern에서 3-5개의 공통적인 band가 증폭되는 것이 확인되어 이를 이용한 속 수준의 분리 동정과 이러한 주요 band들 이외의 부수적인 band들을 고려하여 종 수준까지의 분리도 가능함을 확인하였다. 따라서 본 연구의 결과는 ERIC 반복적 DNA 염기서열을 이용한 ERIC-PCR이 식중독균의 분리 동정 방법으로 사용될 수 있음을 확인하였으며, 나아가 더 많은 속(genus)의 식중독세균을 대상으로 한 새로운 분리 동정 방법을 확립하는데도 응용이 될 수 있을 것이다.
목 적 : Shiga-like toxin (SLT)을 생산하는 Esherichia coli에 의한 감염은 설사, 출혈성 대장염(hemorrhagic colitis) 및 용혈성 요독 증후군(hemolytic uremic syndrome)을 특징으로 하며, 특히 5세 이하의 소아에게서 심각한 결과를 초래한다. SLT-I의 병인으로는 다양한 숙주 매개인자들이 알려져 있다. 본 연구에서는 E. coli 0157 : H7 (ATCC 43890)로부터 정제한 SLT-I이 포유동물 세포들에 대한 세포독성과 종양괴사인자(tumor necrosis factor-${\alpha}$; TNF-${\alpha}$)의 생산에 미치는 효과를 측정하였으며, SLT-I의 수용체인 glycolipid globotriaosylceramide (Gb3)의 발현과 SLT-I의 세포독성의 관계를 규명하고자 하였다. 방 법 : SLT-I과 SLT-I B를 순수분리 정제하고 SLT-I B-FLTC 접합체를 제조하여 vero 세포, 대식세포 및 수지상세포를 대상으로 세포독성능을 측정하고 세포독성능의 차이가 SLT-I의 수용체인 Gb3의 발현과 상관관계가 있는지를 Flow cyotmetry로 분석하였다. 또한 대식세포의 종양괴사인자 생산능은 ELISA법으로 시행하였다. 결 과 : SLT-I은 대식세포(Raw264.7)로부터 TNF-${\alpha}$의 생산을 증가시켰다. 연구 대상 세포 중 SLT-I에 감수성을 나타낸 Vero 세포와 수지상세포(dendritic cells)는 Gb3 발현이 각각 83%와 68%로 높았으며, 29%의 낮은 Gb3 발현을 보인 Raw264.7 세포는 감수성을 보이지 않았다. 따라서 위의 결과로부터 SLT-I에 감수성을 보이지 않은 Raw264.7 세포를 대상으로 Gb3 발현 정도와 SLT-I의 세포독성의 관계를 규명하고자 Gb3의 발현을 증가 시킨 후 SLT-I의 세포독성을 재차 평가하였다. 이 결과 TNF-${\alpha}$의 처리에 의하여 6 h에 Gb3의 발현이 정점(43.5%)에 이르렀으며 36 h에 정상 수준(25.0%)으로 환원되었다. 그러나, Gb3의 발현이 증가함에도 불구하고 SLT-I의 세포독성에는 변화가 관찰되지 않았다. 따라서, SLT-I에 의한 세포독성은 세포의 종류에 따라서 다르며 또한, Gb3의 발현정도에만 의존적이지는 않을 것으로 생각된다. 결 론 : 이와 같은 결과는 E. coli 0157의 감염증 병인 연구에 있어 SLT-I과 Gb3의 발현의 상관관계에 대한 보다 심도 있는 연구가 필요함을 시사한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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