Background & Objectives: Burn injury mortality and septic complication are frequent and well-known in burned pediatric patients. The overuse of antibiotics is the base for development of wound infection by resistant microorganisms as well as opportunist agents. Methods: We have carried out a study of the bacterial profile and antimicrobial resistance clinically important bacteria isolated from burn wound infections in children patients. The most common isolate from burn wound cultures was Pseudomonas aeruginosa (26.8%), followed by Staphylococcus aureus (25.4%), Acinetobacter baumannii (12.7%), coagulase negative staphylococcus (12.0%), Enterococcus faecium (7.7%), Escherichia coli (4.9%), Enterococcus faecalis (3.7%), Burkholderia cepacia (3.0%), Enterobacter cloacae (2.3%) and Klebsiella pneumonia (2.3%). Colistin was very significantly effective drug in gram negative organism, such as Pseudomonas aeruginosa and Acinetobacter baumannii. Results & Conclusion: The resistance rates were 65% and 98% to piperacillin, 63% and 97% to ceftazidime, 28% and 50% to levofloxacin. The most effective antibiotic in gram positive organism, such as Staphylococcus aureus, coagulase negative staphylococcus were moxifloxacin. The resistance rates were 83% and 64% to ciprofloxacin, 80% and 17% to clindamycin.
Kim, Yu-mi;Kwak, Mi-hyang;Kim, Hee-sook;Lee, Jin-ho
Microbiology and Biotechnology Letters
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v.47
no.2
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pp.242-249
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2019
Biosynthesis of indole-3-acetate (IAA) from L-tryptophan via indole-3-pyruvate pathway requires three enzymes including aminotransferase, indole-3-pyruvate decarboxylase, and indole-3-acetate dehydrogenase. To establish a bio-based production of IAA, the aspC, ipdC, and iad1 from Escherichia coli, Enterobacter cloacae, and Ustilago maydis, respectively, were expressed under control of the tac, ilvC, and sod promoters in C. glutamicum. Cells harboring ipdC produced tryptophol, indicating that the ipdC product is functional in this host. Analyses of SDS-PAGE and enzyme activity revealed that genes encoding AspC and Iad1 were efficiently expressed from the sod promoter, and their enzyme activities were 5.8 and 168.5 nmol/min/mg-protein, respectively. The final resulting strain expressing aspC, ipdC, and iad1 produced 2.3 g/l and 7.3 g/l of IAA from 10 g/l L-tryptophan, respectively, in flask cultures and a 5-L bioreactor.
Recently, the explosive increase of carbapenemase-producing Enterobacterales (CPE) in the worldwide poses a serious threat. The purpose of this study is to investigate epidemiology, detection, and treatment of CPE. Three main carbapenemase are reported worldwide, which were KPC, NDM, and OXA-48-like. KPC type are mostly found in USA, China, Europe, and Latin America. NDM type are mostly found in South Asia. OXA-48-like are often seen in the Mediterranean and Northern Africa. In Korea, CPE have increased explosively since 2015. In 2021, 18,099 CPE were isolated, which were Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, and Enterobacter cloacae in order. The CPE genotype was distributed with KPC, NDM, OXA type in order. Phenotypic detection methods include carbapenemase production tests (CPT) and differential tests of CPE. CPTs include modified Hodge test, modified carbapenem inactivation method (mCIM), Carba NP test, among which mCIM is the most widely used due to easy accessibility and accuracy. A lot of genotypic methods are being done for quick results, and commercialized kits using multiplex real-time PCR and microarray are widely used. Colistin and tigecycline are used as the first line of CPE treatment and are used in combination with second line drugs such as meropenem and fosfomycin.
Enterobacter sakazakii was initially referred to as yellow-pigmented Enterobacter cloacae and reclassified in 1980. E. sakazakii infection cause life-threatening meningitis, septicemia, and necrotizing enterocolitis in infants. Powdered infant formula (PIF) and baby foods may be the important vehicle of E. sakazakii infection. It has been reported that E. sakazakii was isolated from PIF and sunsik ingredients produced in Korea. Some infants have been fed sunsik as a weaning diet. Therefore, it is necessary that this organism should be inactivated on preparing PIF and sunsik at homes and in hospitals. The cocktail of three Korean E. sakazakii strains (human, sunsik and soil isolates) were used to investigate the inactivation of this organism with hot water at 50, 60, 65, 70 and $80^{\circ}C$ and microwave heating for 60, 75, 90, 105 and 120 sec. Reconstituted PIF and sunsikwere inoculated with cocktailed vegetative cells of E. sakazakii at 6 log CFU/mL. Thermal inactivation of vegetative cells of E. sakazakii were achieved by reconstituted PIF and sunsik with hot water at $60^{\circ}C$ or greater and with microwave heating at 2,450 MHz for 75 sec or longer. Considering that biofilm formation of E. sakazakii was adapted to survive the dry environment that is PIF and sunsik and thermal resistance increased, it is suggested that inactivation of E. sakazakii was used by hot water at $70^{\circ}C$ or greater and microwave heating for 90 sec or longer. Reconstituted PIF and sunsik were inoculated with cocktailed vegetative cells of E. sakazakii at 2 to 3 log CFU/mL to investigate the growth curve of this organism and stored at 5, 10, 15, 20, 25, 30 and $35^{\circ}C$. Viable counts slightly changed at 5, $10^{\circ}C$ during 48 h but grew at $15^{\circ}C$ or greater. Considering that E. sakazakii is able to grow in infant formula milk at refrigerator temperature, reconstituted PIF and sunsik that are not immediately consumed should be discarded or stored at refrigeration temperatures within 24 h.
Kim, Min-Ji;Jung, Yu-Jin;Hong, Yoo-Rha;Bae, Il-Kwon
Neonatal Medicine
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v.18
no.2
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pp.272-279
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2011
Purpose: The incidence of nosocomial infection caused by Gram-negative bacilli (GNB) has increased in neonatal intensive care units (NICU). This study identified the progression of sepsis caused by GNB colonization and analyzed the risk factors associated with using periodic stool culture surveillance. Methods: We included 86 newborns admitted to the NICU, Kosin University Gospel Hospital from October 2007 to May 2008. Three stool specimens were collected right after birth and two more were collected at 2 week intervals. The risk factors related to GNB colonization were established from each medical record and related references. Results: The incidence of colonization by GNB was 22 (25.6%) per 86 neonates but none had culture-proven sepsis. The three most commonly isolated GNB were Pseudomonas aeruginosa, Enterobacter cloacae, and Citrobacter freundii. Approximately 89% (32/36) of isolated GNB were susceptible to amikacin. The probability of GNB colonization increased in infants who were fed a small volume during enteral feeding. In contrast, delayed enteral feeding resulted in a decreased probability for GNB colonization. Conclusion: Colonized GNB in the intestine was confirmed by enteric surveillance culture of newborns admitted to the NICU. However, we found no evidence of culture-proven GNB sepsis. As lower feeding volume on the colonization day is a risk factor for GNB colonization, the chance for GNB colonization should be considered when feeding intolerance is present.
Yoon, Eun-Jeong;Hong, Jun Sung;Yang, Ji Woo;Lee, Kwang Jun;Lee, Hyukmin;Jeong, Seok Hoon
Annals of Laboratory Medicine
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v.38
no.6
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pp.555-562
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2018
Background: The emerging mobile colistin resistance gene, mcr-1, is an ongoing worldwide concern and an evaluation of clinical isolates harboring this gene is required in Korea. We investigated mcr-1-possessing Enterobacteriaceae among Enterobacteriaceae strains isolated in Korea, and compared the genetic details of the plasmids with those in Escherichia coli isolates from livestock. Methods: Among 9,396 Enterobacteriaceae clinical isolates collected between 2010 and 2015, 1,347 (14.3%) strains were resistant to colistin and those were screened for mcr-1 by PCR. Colistin minimum inhibitory concentrations (MICs) were determined by microdilution, and conjugal transfer of the mcr-1-harboring plasmids was assessed by direct mating. Whole genomes of three mcr-1-positive Enterobacteriaceae clinical isolates and 11 livestock-origin mcr-1-positive E. coli isolates were sequenced. Results: Two E. coli and one Enterobacter aerogenes clinical isolates carried carried IncI2 plasmids harboring mcr-1, which conferred colistin resistance (E. coli MIC, 4 mg/L; E. aerogenes MIC, 32 mg/L). The strains possessed the complete conjugal machinery except for E. aerogenes harboring a truncated prepilin peptidase. The E. coli plasmid transferred more efficiently to E. coli than to Klebsiella pneumoniae or Enterobacter cloacae recipients. Among the three bacterial hosts, the colistin MIC was the highest for E. coli owing to the higher mcr-1-plasmid copy number and mcr-1 expression levels. Ten mcr-1-positive chicken-origin E. coli strains also possessed mcr-1-harboring IncI2 plasmids closely related to that in the clinical E. aerogenes isolate, and the remaining one porcine-origin E. coli possessed an mcr-1-harboring IncX4 plasmid. Conclusions: mcr-1-harboring IncI2 plasmids were identified in clinical Enterobacteriaceae isolates. These plasmids were closely associated with those in chicken-origin E. coli strains in Korea, supporting the concept of mcr-1 dissemination between humans and livestock.
In a previous paper, the ogdH gene that encodes 2-oxoglutarat dehydrogenase was isolated from Salmonella typhimurium. The catalytic N-terminal region in the enzyme was found to be very specific for the Salmonella species. Therefore, the aim of the present study was to detect S. typhimurium in food sources using primers designed for OGDH-l and OGDH-2 which were based on the salmonella-specific region of the ogdH gene. A simple polymerase chain reaction (PCR) detection method was developed to detect low numbers of S. typhimurium in a chicken meat microbial consortium. Using the ogdH-specific primers under stringent amplification conditions and for gene probe analysis, fewer than 100 colony-forming units (CFUs) were detectable when pure cultures were employed. When the PCR assay was run on S. typhimurium-contaminated meat contents, only the positive meat samples containing as few as 200 CFUs reacted to the assay. The method employed for sample processing is simple and it was determined to provide a sensitive means of detecting trace amounts of S. typhimurium-specific sequences in the presence of mixed meat microbial populations. When compared with six representative intestinal gram-negative bacterial strains in foods, including Vibrio parahaemolyticus, V. vulnificus, Enterobacter cloacae, E. coli O157:H7, Pseudomonas aeruginosa, and Proteus sp., S. typhimurium had a unique and distinct PCR product (796 bp). In conclusion, the two OGDH primers were found to be rapid and sensitive detectors of Salmonella spp for the PCR method.
Major pathogenic Gram-negative organisms such as P. aeruginosa, Serratia species, E. coli, Enterobacter species which are isolated from the specimens in large medical centers are greatly resistant to the commonly used antibiotics. Gram-negative bacilli, which had been isolated in Yeungnam University Hospital during the period from December 1992 to April 1993 and turned out to be resistant to the primary antibiotics susceptibility test for chloramphenicol, ampicillin, cephalothin, gentamicin, tetracyclin, amikin and tobramycin, were subjected to the secondary antibiotics susceptibility test for aztreonam, ceftazidime, ciprofioxacine, cefotaxime, cefamandole, piperacillin, ticarcillin and sulfamethoxazole trimethopime. Out of 315 tested organisms, 167 organisms(53%) were resistant to all secondary antibiotics in vitro. Antimicrobial activity of ceftazidime(37.1%), aztreonam(11.%), ciprofioxacine(7.9%) against Gram negative bacilli were slightly more active than other antibiotics tested, while cefamandole was not active to all the Gram-negative bacilli tested. According to the specimens, E. coli was the most frequently resistant organisms to the primary antibiotics from urine, A. baumanii, from respiratory system and wounds, and P. aeruginosa from various specimens. In summary, Gram negative bacilli resistant to the primarily applied antibiotics also were resistant to the secondary antibiotics. Rearrangement of the antibiotics disks for the antibiotic susceptibility test should be considered.
Avian beta-defensin 9 (AvBD9) is a small cationic peptide consisting of 41 amino acids that plays a crucial rule in innate immunity and acquired immunity in chickens. Owing to its wide antibacterial spectrum, lack of a residue, and failure to induce bacterial drug resistance, AvBD9 is expected to become a substitute for conventional antibiotics in the livestock and poultry industries. Using the preferred codon of Pichia pastoris, the mature AvBD9 peptide was designed and synthesized, based on the sequence from GenBank. The P. pastoris constitutive expression vector pGHKα was used to construct a pGHKα-AvBD9 recombinant plasmid. Restriction enzyme digestion was performed using SacI and BglII to remove the ampicillin resistance gene, and the plasmid was electrotransformed into P. pastoris GS115. High-expression strains with G418 resistance were screened, and the culture supernatant was analyzed by Tricine-SDS-PAGE and western blot assay to identify target bands of about 6 kDa. A concentrate of the supernatant containing AvBD9 was used for determination of antimicrobial activity. The supernatant concentrate was effective against Escherichia coli, Salmonella paratyphi, Salmonella pullorum, Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus faecalis, and Enterobacter cloacae. The fermentation product of P. pastoris carrying the recombinant AvBD9 plasmid was adjusted to 1.0 × 108 CFU/ml and added to the drinking water of white feather broilers at different concentrations. The daily average weight gain and immune organ indices in broilers older than 7 days were significantly improved by the AvBD9 treatment.
In the present study, the isolation of selenium (Se)-enriched bacteria from rumen fluid and hot spring water was carried out. Rumen fluid samples were taken from cannulated goats fed a basal diet and the water samples were collected from Selayang hot spring, Selangor-Malaysia. A total number of 140 Se-tolerant isolates were obtained aerobically using an Se-enriched medium and spread plate technique. All the isolates were initially screened for the ability to transform the Se-containing medium to a red-orange culture using a spectrophotometer. Twenty isolates of dark red-orange medium were selected for a screening of the highest Se-containing protein accumulating strains using the dialysis technique and icp.ms to measure the Se content. Four isolates, identified as Enterobacter cloacae (ADS1, ADS7, and ADS11), and Klebsiella pneumoniae (ADS2) from rumen fluid origin, as well as, one isolate from hot spring water (Stenotrophomonas maltophilia (ADS18)), were associated with the highest biomass organic Se-containing protein when grown in a medium enriched with $10{\mu}g/ml$ sodium selenite. In addition, around $50{\mu}g/100{\mu}g$ of the absorbed inorganic Se was accumulated as an organic form. Organic Se-containing protein in all the selected strains showed antioxidant properties in the range of 0.306 to 0.353 Trolox equivalent antioxidant capacity (TEAC) mg/ml. Therefore, these strains may offer a potential source of organic Se due to their Se-tolerant nature and higher biomass organic to inorganic Se ratio.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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