A variety of microbial strains isolated from soil were tested for their ability to produce D-tagatose from D-galactose. An organism that can convert D-galactose into D-tagatose was selected and was identified as Enterobacter agglomerans. The cells grown on the induction medium containing 20 g/l arabinose were found to the best conversion potential among different carbohydrates and the conversion yield was about 15% when 20 gll galactose was used. The isolated crystals were obtained from the culture broth after the purification process such as treatment of ion resins, crystallization, and drying. The recovery yield was 70% after the purification. The crystals were identified as D-tagatose by the infrared spectroscopy, HPLC, specific optical rotation, and melting point.
YANG, JI-WON;HYUN-JAE SHIN;SANG-PIL YEOM;BYUNG-DAE YUN;MIN-HONG KIM
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.4
no.4
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pp.343-348
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1994
Enterobacter sp. producing -$\beta$-galactosidase with high transgalactosylation activity was isolated from dairy wastewater. The isolate had common biochemical features to E. aerogenes and E. cloacae. Enzyme production increased as the cell mass increased with optimum enzyme activity of 0.21 Unit/mg-protein (o-nitro-phenyl-$\beta$ -D-galactoside (ONPG) as substrate) until 8 hr of culture. Whole cells permeabilized by toluene were used to produce galacto-oligosaccharide. Optimum toluene concentration, temperature and pH for -$\beta$-galactosidase activity of permeabilized whole cells were 10% (v/v), $50^{\circ}C$ and 6.0, respectively. A maximum of 38% (w/w) of galacto-oligosaccharide was obtained with lactose concentration of 20% (w/w) at $40^\{\circ}C$ and pH 6.0.
The effects of agitation and aeration for exopolysaccharide(EPS) production through batch cultivation of an Enterobacter sp. isolated from the composter were investigated. During the EPS fermentation under conditions of constant agitation speed from 200 to 900 rpm and constant aeration rate of 0.5-2.5 vvm, the low yields of EPS(4.8-5.2g/L) was observed as the viscosity increase of culture broth. With the stepwise increases in agitation speed and aeration rate, the EPS production and the viscosity of EPS were increased 1.3~1.4 times and 2.3~3.6 times higher than those of the fixed conditions, respectively. Therefore, these stepwise increases were considered as the key operating parameters for enhancing EPS production. The max. EPS(6.8g/L) and viscosity(14,000cp) were obtained when the agitation speed was increased from 300 to 900 rpm for 54hrs at 1.5 vvm.
Enterobacter sp. B54 inhibited growth of the fungus Phytophthora capsici on potato dextrose agar (PDA). Three mutants with antifungal activities (denoted M54-47, M54-113, and M54-329) which were lost or increased, through Pl::Tn5 lac mutagenesis, were used to isolate genes responsible for fungal inhibition on PDA. Two clones were selected from the partially EcoR1-digested genomic library of the wild-type strain by probing with genomic flanking sequences of each mutant. We have isolated a 20-kb EcoR1 genomic DNA fragment from this strain that contains genes involved in hyphal growth inhibition of P. capsici on PDA. Subcloning and expression analysis of the above DNA fragment identified a 8-kb region which was necessary for antifungal activities. A 8-kb HindⅢDNA fragment covers three genomic loci inserted by Tn5 lac in each mutant. This suggested that all genes which are related to antifungal activities might be clustered in simple forms of at least 5-8 kb sizes.
Presence of Enterobacter sakazakii, occasional pathogen of powdered infant formula causing rare, but life-threatening diseases such as neonatal meningitis, bacteremia, necrotizing enterocolitis, and necrotizing meningoencephalitis after ingestion was examined in 45 powdered infant formula products manufactured in Korea using chromogenic Druggan-Forsythe-Iversen (DFI) medium, and isolates were identified with API 20E. Ent. sakazakii was isolated from three products. Ent. sakazakii isolates were genotyped by RAPD-PCR using two random primers, and their banding patterns were compared.
Although the number of incidences of illness caused by ingestion of the bacterial pathogen Enterobacter sakazakii (Cronobacter spp.) has dramatically declined, there remains a need for a robust isolation method to recover this microbe from powdered infant formula (PIF). The current method described in the FDA's Bacteriological Analytical Manual requires multiple steps, and 3-4+ days for complete analysis of PIF isolated E. sakazakii (Cronobacter spp.). We describe a bacteriological method including a one-step enrichment followed by plating on chromogenic agar for presumptive identification of E. sakazakii (Cronobacter spp.). Suspected colonies are confirmed by either biochemical analyses, or a Real-Time PCR-based assay. Using this method, E. sakazakii (Cronobacter spp.) in PIF can be isolated and identified within one day (24 hours).
A bacterial strain capable of metabolizing myo-inositol (MI) and converting to other substances was isolated from soil of orchard. The isolate, named YB-46, was grown on minimal medium supplemented with MI as the sole carbon source and was presumed to belonging to genus Enterobacter according to the 16S rDNA sequence. Escherichia coli transformant converting MI into unknown metabolites was selected from a metagenomic library prepared with fosmid pCC1FOS vector. Plasmid was isolated from the transformant, and the inserted gene was partially sequenced. From the nucleotide sequence, an iolG gene was identified to encode myo-inositol dehydrogenase (IolG) consisting of 336 amino residues. The IolG showed amino acid sequence similarity of about 50% with IolG of Enterobacter aerogenes and Bacillus subtilis. The His-tagged IolG (HtIolG) fused with hexahistidine at C-terminus was produced and purified from cell extract of recombinant E. coli. The purified HtIolG showed maximal activity at $45^{\circ}C$ and pH 10.5 with the highest activity for MI and D-glucose, and more than 90% of maximal activity for D-chiro-inositol, D-mannitol and D-xylose. $K_m$ and $V_{max}$ values of the HtIolG for MI were 1.83 mM and $0.724{\mu}mol/min/mg$ under the optimal reaction condition, respectively. The activity of HtIolG was increased 1.7 folds by $Zn^{2+}$, but was significantly inhibited by $Co^{2+}$ and SDS.
PARK Mi Jung;LEE Hee Jung;LEE Tae Seek;KIM Ji Hoe;LEE Tae Ho
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.33
no.6
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pp.550-553
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2000
Optimum temperature for paralytic shellfish poison (PSP) detoxofication of Enterobacter sp. CW-6 isolated from sea water and changes of contents and ingredients composition of PSP during bacterial detoxification process were investigated. Enterobacter sp. CW-6 detoxicated $61.5{\~}67.7{\%}\;and\;87.4{\~}96.8{\%}$ of initial PSP toxicity ($25.0{\~}28.5\;nmole/g$) after $5{\~}12$ days at 30 and $35^{\circ}C$, identified as optimal growth temperature, respectively. The detoxification rate of Enterobacter sp. CW-6 for crude PSP with initial concentration of 38.2 nmole/g after 8 and 12 days at $30^{\circ}C$ in the Marine broth was 88.4 and $92.7{\%}$, respectively. During bacterial detoxification process using crude toxin solution, temporary increasement of STX group was detected and identified that was derived from GTX2, 3 group. The detoxification rate of Enterobaoter sp. CW-6 on purified GTX1 and 4 with initial concentration 47 nmole/g and 37 nmole/g were more than $90{\%}$ after 12 days in the marine broth at $30^{\circ}C$. Enterobacter sp. CW-6 also showed a detoxification activity on purified GTX2 and 3, and the detoxification rate for the initial concentration 25.6 nmole/g after 12 days was $66.4{\%}$.
Total 176 alginate-degrading bacterial strains were isolated from marine moluscus, marine echonodermata, seaweed, and soils. Among the isolates, five strains (No. 28, 51, 79, 135, and 145) had higher level of alginate-degrading activity. The isolate No. 28, 51, 79, and 135 were identified as the genus Enterobacter and the strain No. 145 as the genus Vibrio. We used these strains to examine the optimal conditions for the production of alginate-degrading activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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