• 한국초지조사료학회지
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• 제26권2호
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• pp.69-76
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• 2006

켄터키 블루그래스의 최적 조직 배양조건을 확립하기 위하여 성숙종자로부터 배발생 캘러스 유도 및 식물체 재분화에 미치는 배지 첨가물질의 영향을 조사하였다. 배발생 캘러스 유도시 첨가되는 auxin으로는 3 mg/L 2,4-D 처리구에서 58.3%로 캘러스 유도율이 가장 높았으며, 3 mg/L 2,4-D와 0.1 mg/L의 BA를 첨가하여 배양했을 때 형성된 캘러스는 형태적으로도 우수하였고 조직적으로 치밀하며 유백색을 띤 배발생 캘러스가 가장 많이 형성되었으며 54%의 재분화율을 나타내었다. 성숙종자를 배양함에 있어 탄소원으로는 캘러스 유도배지 30 g/L sucrose, 재분화배지에 30 g/L maltose를 첨가해 주었을 때 효율이 증가되었다. 성숙종자를 배양함에 있어 첨가물질로 캘러스 유도배지와 재분화 배지에 1 g/L의 casein hydrolysate와 500 mg/L의 L-proline을 동시에 첨가해주었을 때 캘러스 유도율과 재분화율이 각각 60.8%와 58.3%로 증가되었다. 본 연구를 통하여 확립된 효율적인 배발생 캘러스의 유도 및 식물체 재분화 체계의 확립은 Agrobacterium을 이용한 켄터키 블루그래스의 형질전환에 효율적으로 이용될 수 있을 것으로 사료된다.

• 한국작물학회지
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• 제50권5호
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• pp.356-360
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• 2005

Mature embryos were aseptically excised with a scalpel and sliced in fragments measuring 0.5 mm in diameter (sliced mature embryo fragment; 4 ${\~}$ 5 fragments/one embryo). Sliced mature embryo fragments of six wheat cultivars were cultured to develop an efficient method of callus induction and plant regeneration. Callus derived from sliced mature embryo fragments showed a good capacity to embryogenesis and regeneration. Furthermore sliced mature embryo fragments decreased contamination from fungi and bacteria. The high efficiency of callus induction were obtained Keumkangmil and Bob­white. For plant regeneration, selected embryogenic calli were transferred to two types regeneration media. An average number of green spots per callus was 4 to 5 in regeneration media after about one week. Percentage of plant regeneration showed high in regeneration medium containing 0.1 mg/l 2,4-D and 5 mg/l zeatin. Especially, Keumkangmil ($27.5\%$) and Bobwhite ($33.3\%$) showed high regeneration efficiency. This regeneration system from sliced mature embryo fragments may provide an effective and convenient explant for plant transformation studies.

• 식물조직배양학회지
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• 제25권1호
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• pp.1-5
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• 1998

당귀(Angelica gigas Nakai)의 잎절편유래 체세포배의 비정상자엽구조에 관한 2,4-D와 BA의 영향에 대하여 또한 체세포배의 자엽수와 발아와의 관계에 대하여 기술하였다. 배발생능 캘러스는 0.5 및 1 mg/L 2,4-D와 1mg/L 2,4-D+0.1mg/L BA, 1mg/L 2,4-D+0.5mg/L BA가 첨가된 MS 기본배지에 치상한 외식편에 형성된 캘러스로부터 선발하였다. 1mg/L 2,4-D첨가 MS고형 기본배지에서 8 주간 배양후 2,4-D가 제거된 배지에서 3주간 배양하여 체세포배 발생과 비정상적인 체세포배의 자엽발생을 관찰하였다. 이상자엽의 빈도는 정상인 2개의 자엽을 갖는 체세포배는 42.5%인데 반하여 1개의 자엽에서 22.8%, 3개의 자엽을 갖는 체세포배에서는 16.8%, 4개의 자엽에서는 7.8%, 5개의 자엽배에서는 1.8%와 주발형 자엽배는 8.2%이었다. 또한 ABA를 처리하면 2개의 자엽을 갖는 체세포배는 65.3%로 향상되었다. ABA 는 정상적인 체세포배의 높은 생산에 중요하였다. 2개의 정상적인 자엽을 갖는 체세포배의 발아율은 77.8%이었으나 비정상적인 자엽을 갖는 체세포배의 발아율은 대단히 낮아서 1개, 3개, 4개, 5개 및 주발형의 자엽배을 갖는 체세포배에서는 62.5%, 43.3%, 60%, 50%및 0%이었다.

• 한국초지조사료학회지
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• 제29권4호
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• pp.291-298
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• 2009

억새의 최적 조직배양조건을 확립하기 위하여 성숙종자로부터 배발생 캘러스 유도 및 캘러스로부터 식물체 재분화에 미치는 식물생장 조절물질의 영향을 조사하였다. 배발생 캘러스 유도시 첨가되는 auxin으로는 2,4-D가 가장 효율적이었으며, 3 mg/L 2,4-D가 첨가된 배지에서 배발생 캘러스가 가장 높은 빈도로 유도되었다. 식물체 재분화는 배발생 캘러스를 1 mg/L 2,4-D와 2 mg/L BA가 첨가된 재분화 배지에서 배양했을 때 가장 높은 재분화효율을 보여주었다. 본 연구를 통하여 확립된 효율적인 배발생 캘러스의 유도 및 식물체 재분화 체계는 억새의 신품종 개발을 위한 분자육종 기술 확립에 유용하게 이용 될 수 있을 것이다.

• 한국초지조사료학회지
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• 제25권3호
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• pp.191-198
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• 2005

오차드그래스의 최적 조직배양조건을 확립하기 위하여 3가지 품종의 성숙종자로부터 배발생 캘러스 유도 및 식물체 재분화에 미치는 배지첨가물질의 영향을 조사하였다. 성숙종자로 부터 배발생 캘러스 유도시 첨가되는 생장조절 물질로는 3mg/L 2,4-D 또는 dicamba와 0.1mg/L BA를 혼용첨가했을 때가 단용첨가구에 비해 높은 배발생 캘러스 유도효율을 나타내었다. 품종별 식물체 재분화 효율은 'Roughrider'가 가장 높게 나타났으며, 'Frode'가 중간정도, 'Frontier'가 가장 낮은 효율을 나타내었다. 식물체 재분화배지에 항산화물질로서 10mg/L의 $AgNO_3$와 40mg/L의 cysteine을 첨가해준 결과 식물체 재분화율이 증가되었다. 본 연구를 통하여 확립된 오차드그래스의 효율적인 조직배양체계는 유전자 형질전환을 통한 신품종 오차드그래스 개발에 유용하게 응용되어질 수 있을 것이다.

• 식물조직배양학회지
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• 제22권5호
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• pp.291-298
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• 1995

시호(Bupleurum falcatum L.)의 잎절편으로부터 체세포배형성을 통한 식물체 재생과 체세포배 발생의 이상을 일으키는 2,4-D의 영향에 대하여 또한 체세포배의 자엽수와 발아와의 관계에 대하여 기술하였다. 배발생능 캘러스는 1mg/L 2,4-D가 첨가된 MS 고형기본배지에서 배양된 캘러스로부터 선발하였다. 2,4-D 첨가 MS 기본배지에서 6주간 배양후 3주간 2,4-D가 제거된 배지에서 배양하여 체세포배 발생과 비정상적인 체세포배의 자엽발생을 관찰하였다. 이상자엽의 빈도는 정상인 2개 자엽에서 65% 인데 비하여 1개의 자엽에서 7%, 3개의 자엽을 갖는 체세포배에서는 25%, 4개 자엽에서는 5%, 5개 자엽에서 2% 및 나팔형 자엽배는 3% 이었다. 2개의 정상적인 자엽을 갖는 체세포배의 발아율이 80%인 것에 비하여 1, 3 4, 5개의 자엽을 갖는 체세포배에서는 25%, 58%, 38% 및 20%로 발아율이 낮았다. 그러나 나팔형의 비정상 체세포배는 전혀 발아되지 않았다. 다자엽배의 구조는 체세포배의 뿌리 또는 배축에서 원통상전형성층을 나타내었지만 자엽절에서는 자엽수와 동일한수의 전형성층속으로 분포되었다. 체세포배의 자엽수 변이는 전형성층의 수와 밀접한 관계가 있다.

• 식물조직배양학회지
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• 제24권3호
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• pp.129-135
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• 1997

한국 야생차나무의 잎절편과 배배양에서 생장조절물질의 첨가에 따른 형태형성 과정의 변이를 조사하였다. 그 결과 접합자배는 싸이토키닌을 5-20$\mu\textrm{M}$을 첨가한 MS 배지에서 직접적인 체세포 배와 부정아 및 액아 발생률이 높았으며 옥신의 함량이 높아질수록 형태형성율이 급격히 저하되었다. 1/2 MS 및 1/4 SH배지에 $10\mu\textrm{M}$ IBA가 첨가된 배지에서 모든 줄기가 발근 되었다. MS배지에 2,4-D를 첨가한 배지에서 미성숙 접합자 배를 배양한 결과 체세포배성 캘러스가 유발되었다. 성숙된 접합자 배를 발아시킨 후 어린잎을 채취하여 고농도의 옥신 (IBA와 NAA) 또는 싸이토키닌 (BAP)이 함유된 MS배지에 배양한 결과 체세포배 형성 캘러스가 발생되었으며 또한 직접적인 체세포배가 발생하였다. 그러나 뿌리와 줄기 형성에는 각각 요구하는 옥신의 농도와 종류가 각각 달랐다.

• 한국작물학회지
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• 제58권4호
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• pp.331-335
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• 2013

Buckwheat sprout is used as vegetable, and also flour for making noodles, and so on. Currently, information about tissue culture in buckwheat is limited and restricted to micro-propagation. We carried out somatic embryogenesis and plant regeneration using hypocotyl segments as explant of the cultivated buckwheat species, Fagopyrum esculentum which differs from existing studies in the growth regulator combinations used. Maximum callus regeneration was induced on MS medium containing 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) $2.0mg{\cdot}L^{-1}$, benzyladenine (BA) $1.0mg{\cdot}L^{-1}$ and 3% sucrose. Friable callus was transferred to solidified MS media containing BA ($1.0mg{\cdot}L^{-1}$) with various concentrations of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid for the induction of embryogenesis. The optimum concentrations of growth regulators (for regeneration of plantlet) were indole-3-acetic acid ($2.0mg{\cdot}L^{-1}$), Kinetin ($1.0mg{\cdot}L^{-1}$), BA ($1.0mg{\cdot}L^{-1}$). Only 2,4-D did not show any significant effect on callus induction or embryogenesis. Regeneration of embryonic callus varied from 5% to 20%. Whole plants were obtained at high frequencies when the embryogenic calli with somatic embryos and organized shoot primordia were transferred to MS media with 3% sucrose. The main objective of this research was to develop an efficient protocol for plant regeneration for common buckwheat, and to apply in future for genetic transformation.

• Journal of Crop Science and Biotechnology
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• 제11권2호
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• pp.119-126
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• 2008

Since somatic embryogenesis combined with ethylmethane sulfonate(EMS) treatments is the most efficient technique for mutagenesis, the embryogenic capacity of four soybean cultivars was evaluated at different EMS concentrations, treatment times, and preculture durations. Two to 4 mm long immature cotyledons were placed in induction medium after EMS treatment, and the numbers of somatic embryos formed per explant were counted four weeks after culture initiation. We observed genotypic differences in the efficiency of somatic embryogenesis from immature embryos among four cultivars treated with different concentrations of EMS for six hours. Cultivars, Sinpaldalkong 2 and Jack, displayed highly efficient somatic embryogenesis regardless of EMS concentration, whereas very low efficiency or no survival was observed in Jinju 1 and Iksannamulkong cultivars. Preculture duration did not influence the efficiency of somatic embryogenesis. Because Sinpaldalkong 2 exhibited the best somatic embryogenesis, much higher concentrations of EMS were used to test somatic embryo formation under different periods of time in this cultivar. Three and six hour treatments with both 1 and 2 mM EMS yielded higher embryo formation than longer periods of time. Increasing the time with embryos in 2 mM EMS caused a reduction in somatic embryogenesis in Sinpaldalkong 2, but many chlorophyll-deficient soybean variants were identified in the $M_1R_0$ and $M_2R_1$ generations. In addition to Jack, Sinpaldalkong 2 is a good genotype for plant regeneration from EMS-treated immature embryo cultures.

• Journal of Ginseng Research
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• 제23권2호
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• pp.74-80
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• 1999

인삼 접합자배의 자엽을 식물호르몬이 전혀 첨가되지 않은 MS기본배지에 배양한 결과 자엽의 기부에서 높은 빈도의 체세포배가 유기되었다. 체세포배의 형성 빈도는 접합자배 자엽의 성숙도에 따라서 차이가 있었는데 미숙배에서 성숙배로 진행됨에 따라 감소되는 경향을 보였다. 미숙자엽의 경우에는 표피세포의 윗 아래층들이 모두 성숙자엽의 세포보다 더 적거나 더 촘촘하였으며, 많은 세포들이 체세포배의 형성에 관여하였으나 뿌리의 형성이 어려운 다배상태로 유기되었다. 그러나 발아직적의 성숙자엽은 표피세포의 윗층만이 촘촘한 세포로 이루워 졌으며 뿌리의 형성이 가능한 체세포 단일배로 유기되었다. 이런 결과는 체세포배의 기원과 발육이 배발생시 사용한 자엽의 성숙도에 따라서 배발생에 관여한 세포들이 단일 혹은 다량상태인지에 따라서 결정된다는 것을 의미한다.