Sample preparation is very important for crystal structure analysis of novel nanostructured materials in electron microscopy. Generally, a grid dispersion method has been used as transmission electron microscope (TEM) sampling method of nano-powder samples. However, it is difficult to obtain the cross-sectional information for the tabular-structured materials. In order to solve this problem, we have attempted a new sample preparation method using focused ion beam. Base on this approach, it was possible to successfully obtain the electron diffraction patterns and high-resolution TEM images of the cross-section of tabular structure. Finally, we were able to obtain three-dimensional crystallographic information of novel zeolite nano-crystal of the tabular morphology by applying the new sample preparation technique.
We present a method of graphene synthesis with high thickness uniformity using the thermal chemical vapor deposition (TCVD) technique; we demonstrate its application to a grid supporting membrane using transmission electron microscope (TEM) observation, particularly for nanomaterials that have smaller dimensions than the pitch of commercial grid mesh. Graphene was synthesized on electron-beam-evaporated Ni catalytic thin films. Methane and hydrogen gases were used as carbon feedstock and dilution gas, respectively. The effects of synthesis temperature and flow rate of feedstock on graphene structures have been investigated. The most effective condition for large area growth synthesis and high thickness uniformity was found to be $1000^{\circ}C$ and 5 sccm of methane. Among the various applications of the synthesized graphenes, their use as a supporting membrane of a TEM grid has been demonstrated; such a grid is useful for high resolution TEM imaging of nanoscale materials because it preserves the same focal plane over the whole grid mesh. After the graphene synthesis, we were able successfully to transfer the graphenes from the Ni substrates to the TEM grid without a polymeric mediator, so that we were able to preserve the clean surface of the as-synthesized graphene. Then, a drop of carbon nanotube (CNT) suspension was deposited onto the graphene-covered TEM grid. Finally, we performed high resolution TEM observation and obtained clear image of the carbon nanotubes, which were deposited on the graphene supporting membrane.
Immature nocytes and in VitrO matured Oocytes collected from the slaughtered Korean cattle were frozen slowly with 10% ethylene glycol+5% polyvinyl pyrolidine+0.05M trehalose (l0EPT), 10% ethylene glycol+5% ficoll+0.05M sucrose (1OEFS), or 10% ethylene glycol+5% ficoll+0.05M trehalose (l0EFT) by cell freezer (experiment 1). And also,They were ultra-rapidly frozen with 30% ethylene glycol+10% polyvinyl pyrolidine+0.5M trehalose (3OEPT) or 30% ethylene glycol+18% ficoll+0.5M sucrose (3OEFS) using electron microscope grid (experiment 2). In experiment 1, the cleavage rate was 23.0% when immature oocytes were frozen slowly using various cryoprotectants descrihed above, and 5.1% of cleaved oocytes developed to over morula stage after in Vitro fertilization (IVF). There were no significant differences among these groups. When matured oocytes were frozen slowly, the total cleavage rate was 19.7%, and over morula stage was 3.2%. lOEPT (4.8%) and EFS (4.4%) were slightly more effective than l0EFT (0.0%) for development in vitro. Only in l0EFT treated group, immature oocytes have higher developmental capacity than matured ones, when they were frozen slowly and IVF after thawing. In experiment 2, oocytes were ultra-rapidly frozen using the electron microscope grid with two kind of cryoprotectants described above. In immature oocyte group, the cleavage rate was 13.9% and 5.8% of cleaved oocytes developed to over morula stage after IVF, and in matured group, 25.7 and 7.6%, respectively. There were no significant differences between two kind of cryoprotectants, but in ultra-rapid freezing using electron microscope grid, the efficiency is slightly higher in matured oocyte group.
한국기초과학지원연구원(KBSI, Korea Basic Science Institute)에서는 국내 유일의 초고전압투과전자현미경(HVEM, High Voltage Electron Microscopy)을 비롯하여 3 대의 일반 전자현미경을 보유하고 있다. 전자현미경을 통하여 관찰된 이미지는 각 단계별로 tilting 되어 저장된 이미지로서 관찰자에게 보다 나은 관찰 환경의 구성을 위해 3D로의 reconstruction은 필수 과정이라고 할 수 있겠다. 이 과정 중 카메라 중심에서 벋어난 부분의 왜곡을 warping 기법을 통하여 최대한 감소시킨다. 이런 이미지 전처리 과정과 이를 바탕으로 3D로의 reconstruction과정은 고성능 컴퓨터의 수반을 기본으로 하는데 이 과정을 다수의 grid node PC들이 빠른 시간에 분담하여 처리하게 된다. Grid node PC들의 역할은 소유자가 서로 다른 다양한 컴퓨팅 자원의 효과적인 공유를 목적으로 하며, 시스템의 구축에 필요한 역할 스케줄링, 자원 관리, 보안, 성능 측정 및 상태 모니터링 등의 문제를 해결하기 위한 사용되고 있다. 일반 개인이 사용하기 힘들었던 고성능 PC의 역할을 Grid node PC들이 수행하고 이 기반위에 워핑 기법을 통한 이미지 전처리는 보다 실제 관찰 대상에 가까운 형태로의 재구성이 가능할 수 있는 바탕이 된다. 워핑 전처리를 통한 Grid node PC기반의 전자현미경 볼륨 랜더링 시스템의 구축은 관찰자에게 보다 편리하며 빠른 실험 환경을 제공하여 줄 수 있고, 이해하기 쉽고 실제 모습에 가까운 형태의 실험 결과물을 접할 수 있게 된다.
본 연구는 소 미성숙난자를 electron microscope (EM) grid와 동해제인 EFS30을 이용하여 초급속 동결하였을 때 정상적인 배 발달의 유도가능성 여부를 조사하고자 실시하였다. 동해제는 30% ethylene glycol, 18% ficoll, 0.5 M sucrose와 10% FBS 등이 PBS에 첨가되어 제작된 EFS30을 사용하였다. 난자 생존의 평가기준으로는 성숙, 수정 및 배발달을 조사하였다. 본 연구에서 얻어진 결과는 다음과 같다. 초급속동결-융해 후, 소 미성숙란의 생존율은 43.2%을 나타내었다. 동결-융해군의 체외 성숙 (84.1%)과 정상 자웅전핵 형성율 (57.5%)은 대조군의 결과 (92.5, 65.0%)와 비교하여 볼 때 유의한 차이는 없었다. 또한, 동결군의 체외수정 이후의 $\geq2$-세포기 형성 (65.0%)과 배반포형성율 (30.8%)도 대조군(73.7, 35.7%)의 결과와 유의한 차이를 나타내지 않았다. 따라서 소 미성숙난자는 EM grid와 EFS30 동결액을 이용한 초급속 동결방법에 의해 정상적인 배발달이 유도될 수 있다는 것을 알 수 있었다.
결정질 실리콘 태양전지의 전면 전극은 전극 면적으로 인한 손실(shading loss)를 줄이고 단락전류밀도(Jsc)를 높이기 위해 전극 너비를 줄이는 노력을 하고 있다. 하지만 전극 소성(firing) 시 전면 전극의 핑거(finger)와 버스바(busbar)의 너비 차이로 인해 전극 침투(fire-through) 정도가 달라질 수 있다. 본 연구에서는 전극 소성 공정 시 전면 전극의 너비에 따른 전극 침투 정도를 조사하기 위해 접촉 저항(specific contact resistance)과 재결정화(Ag recrystallite) 된 전면전극의 분포에 대해 비교하였다. 접촉 저항을 측정하기 위하여 transfer length method(TLM)를 이용하였다. 또한 전면 전극층을 제거한 후 실리콘 기판의 재결정 분포를 주사전자현미경(Scanning electron microscope : SEM)을 이용하여 관찰하였다.
HVEM DataGrid[1]는 연구자들이 초고압 전자현미경(HVEM-High Voltage Electron Microscope)을 이용한 실험 결과를 효율적으로 관리하고 공유하기 위한 공간이다. 여러 사람들이 동시에 이용하는 시스템으로 이종 저장소(heterogeneous storage)들을 포함할 수 있는 HVEM DataGrid 는 HVEM 실험결과를 이들의 메타정보와 같이 동기적으로 저장해야 한다. 이런 HVEM DataGrid 의 특성을 고려한 트랜잭션 관리는 트랜잭션의 ACID 성질을 만족하는 동시에 용량이 큰 e-Science 결과물을 효율적으로 다룰 수 있는 방안이 또한 필요하다. 따라서, 본 논문은 HVEM DataGrid 의 이종 저장소에 걸친 트랜잭션에 대한 효율적인 관리 방안을 제안한다.
In order to obtain a better understanding of the ageing process of the field composite insulators, it is necessary to explore a quantitative-valuation method for the aging state evaluation. And the linear relationship between volume resistivity and temperature is proposed. In this paper, the composite insulators with different lengths of operating lives from two manufacturers were tested. The relationship between trap characteristics and volume resistivity-temperature characteristics were analyzed based on Thermal Stimulated Current (TSC), volume resistivity-temperature test, Scanning Electron Microscope (SEM) and Fourier Transform Infrared Spectroscopy (FTIR). Furthermore, the application of trap characteristics in the quantitative evaluation of aging state of composite insulators was discussed. The results showed that there was a general negative correlation between the relative variation ratio of trap charges and the volume resistivity-temperature characteristics. Meanwhile, the physicochemical properties would change with the aging time, which would result in the increasing of electron traps. Combined with the TSC and volume resistivity test results, the trap characteristic thresholds which indicated the serious age of the composite insulators had been proposed.
최근에 한국기초과학지원연구원에 설치된 초고전압 투과전자현미경은 원자분해능(점분해능 $1.2{\AA}$ 이하)의 구현과 고경사각 tilting 기능(${\pm}60^{\circ}$)에 의해 시편의 원자배열 구조를 3차원적으로 이미징할 수 있는 고성능 투과전자현미경이다. 이에 더하여 FasTEM이라는 원격 운용 시스템이 갖춰져 있어서 장비의 직접운용에 따른 여러 제약을 극복할 수 있게 한다. 초고전압 투과전자현미경의 원격운용을 위해 FasTEM 원격 시스템은 본원 초고전압 투과전자현미경에 설치된 Server 시스템과 서울분소에 설치된 Client 콘솔 시스템을 155 Mbps급 초고속 선도망 KOREN에 연결하여 구성하였으며 서울분소에서 대전본원의 초고전압 투과전자현미경을 운영하여 Au의 [001] 고분해능 영상을 얻는데 성공하였다. 초고전압 투과전자 현미경의 조사계 및 결상계 시스템 파라메타들의 조정, 각각의 detector 시스템 조정과 이미징, goniometer와 aperture 구동을 위한 motor-driven system들의 동작 등 초고전압 투과전자현미경의 원격 조정은 원격 작업자가 현장에 있는 것과 마찬가지로 실시간 운용이 가능하였다. 초고전압 투과전자현미경과 IT 기반기술의 접목에 의해 실현된 원격운용 기능은 국가적 공동연구시설에 대한 e-Science Grid를 구축하는데 중요한 역할을 하리라 기대된다.
The objective of this study was to optimize the vitrification method of in vitro produced bovine embryos. Thus, in vitro produced embryos at 8 cell, morula and blastocyst stages were vitrified on electron microscope grids (EM grids) or in open pulled straws (OPS) with EG5.5 (5.5 M ethylene glycol, 1.0 M sucrose and 10% FBS in m-DPBS medium) freezing solution and their survival rates after thawing were compared. The embryos on EM grids or in OPS were briefly exposed to EG5.5 freezing solution and plunged directly into liquid nitrogen within 30 to 35 sec. Post-thawed embryos were serially diluted in 0.5, 0.25 and 0.125 M sucrose in m-DPBS, each for 1 min, and then cultured in CRI aa medium supplemented with 10% FBS. Embryonic survival rate was assessed as re-expanded and hatched rates of those embryos after warming. The rates of re-expansion embryos did not significantly different between EM grid (8 cell: 42.10%, morula: 66.66% and blastocyst: 77.08%) and OPS (8 cell: 47.36%, morula: 61.90% and blastocyst: 83.33%) methods. In addition, the hatched rates in EM grid (8 cell: 31.57%, morula: 57.14% and blastocyst: 72.91%) were similar to those in OPS (8 cell. 34.21%, morula: 50.00% and Blastocyst: 77.08%). Interestingly, even at the same blastocyst stage, the in vitro survival of day 7 embryos (EM grid: 79.48 and OPS: 87.18%) was higher than those of day 8 embryos (EM grid: 72.10 and OPS: 82.06%). The total cell number of blastocyst developed in vitro after vitrification was examined with Hoechst 33342 staining to compare the embryo quality among different treatment groups. The total cell number of blastocyst was not significantly different between vitrified groups (EM grid: 162.4$\pm$8.0 and OPS: 158.4$\pm$7.1) and unvitrified control (168.0$\pm$5.6). These results indicate that both vitrification containers can provide the high rate of embryo survival. Moreover, the OPS container may not need a cap to protect the container from floating after immersion in L$N_2$. Therefore, this study suggest that bovine embryos can be cryopreserved easily, effectively and successfully by vitrification method using EM grid or OPS with EG5.5 freezing solution. In the future, the Pregnancy rate would be investigated after transfer of our vitrified embryos into the appropriated recipients.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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