틸라피아에 실험적으로 Edwardsiella tarda를 경구감염 시켰다. 틸라피아의 장을 자극시키지 않았을 때는 E. tarda가 감염되지 않았으나 과산화수소로 장을 자극시킨후 E. tarda를 투여하였더니 감염되었다. 150~200g되는 틸라피아 한마리에 $10^6CFU/m{\ell}$, $10^7CFU/m{\ell}$, $10^8CFU/m{\ell}$를 투여한 4일 후부터 죽은 실험어의 간장, 신장, 비장에 농창이 형성되었다. 또한 장관 장해부에서 세균이 증식되어 전신감염으로 급히 발병되어 죽은 예가 많았다. 자연감염어에서 볼 수 있는 증상이 나타났다.
Kim, Min-Gi;Gunathilaka, Buddi E.;Lee, Sungho;Kim, Youjeong;Lee, Kyeong-Jun
Fisheries and Aquatic Sciences
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제25권4호
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pp.243-249
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2022
Bacillus SW1-1 is a probiotic isolated from shrimp intestines. We investigated the effects of Bacillus SW1-1 coated diets on the growth, feed utilization, innate immunity, hematological parameters and resistance to Edwardsiella tarda in olive flounder (Paralichthys olivaceus). A commercial diet was used as the control (AP0) and two other diets were prepared by coating 0.25% (AP25) or 0.50% (AP50) probiotic powder which contains 1.0 × 107 CFU/g Bacillus SW1-1. Four replicate groups of olive flounder (153 ± 2 g) were fed one of the diets for 12 weeks. Growth performance and feed utilization of the fish were not significantly affected by the dietary Bacillus SW1-1. After the challenge with E. tarda, AP50 group showed significantly higher survival than AP0 and AP25 groups. Innate immunity and anti-oxidant capacity of the fish were not significantly affected after the feeding trial. However, after the E. tarda challenge, the innate immune parameters (immunoglobulin, lysozyme and anti-protease) were significantly improved in fish fed AP25 and AP50 diets compared to those in fish fed AP0 diet. After the challenge test, significantly lower glucose level was observed in AP50 group compared to AP0 group. These results indicate that dietary supplementation of Bacillus SW1-1 could increase the disease resistance of olive flounder against E. tarda infection. The optimum coating levels of Bacillus SW1-1 needs to be further elucidated.
The present study investigated the effects of dietary Edwardsiella tarda (E. tarda) specific bacteriophage (phage) and Bacillus subtilis (B. subtilis) mixture on innate immune responses and antibacterial activity of Nile tilapia, Oreochromis niloticus. In a dietary experiment, tilapia were fed the control diet (C), a phage-only supplemented diet (P), a B. subtilis only supplemented diet (B), or a B. subtilis and phage mixed diet (B+P). A respiratory burst and significant increase in lysozyme activity (P<0.05) were noted in the B+P group, as compared to other groups after 4 days of feeding. The B group showed a significant (P<0.05) increase in respiratory burst and lysozyme activity versus the C and P groups, whereas no significant increases (P<0.05) were observed in the P and C groups. $ACH_{50}$ was significantly up-regulated in the B+P group versus other groups after 8 days of feeding (P<0.05). In vivo antibacterial activity was significantly enhanced in the B+P fed group, as compared to other groups (P<0.05) after 7 days of E. tarda challenge. A significant (P<0.05) increase in antibacterial activity was seen in the B group, as compared to C or P groups after 14 days of feeding. These results suggest that a B. subtilis and phage mixture could be utilized as an alternative to antibiotics in the control of fish diseases caused by E. tarda.
We compared the pathogenicity and antigenicity of two different Edwardsiella tarda (E. tarda) strains KFE and Edk-2 isolated in Korea and Japan respectively. In the pathogenicity analysis with challenge test against loach, E. tarda KFE isolate showed stronger pathogenicity compared to that of E. tarda Edk-2 isolate. The differences were also confirmed by the comparison of OMP (outer membrane protein) in SDSPAGE which showed three major bands, 41kDa, 37kDa and 30kDa, for E. tarda KFE isolates and two major bands, 41kDa and 30kDa, for E. tarda Edk-2 isolates. On the base of these results, we tried to determine the differences of antigenicities of these two isolates in loach which is one of the important species in freshwater aquaculture in Korea. Numbers of specific antibody secreting cells (SASC), appeared to be higher in loach immunized with FKC of E. tarda Edk-2 than loach immunized with FKC of E. tarda KFE. ELISPOT-assay for the comparison of antigenicity showed relatively high percentage of cross-reaction and implied the presence of some common epitopes in the antigens of these two E. tarda isolates.
본 연구는 에드워드 내성 정도를 기준으로 선발된 넙치 친어를 이용하여 $4{\times}4$ 펙토리얼 교배를 통해 얻어진 16가계 넙치의 에드워드 인위 감염 결과를 이용하여 교배 그룹, 교배 암컷, 교배 수컷의 효과를 분석하였다. 내성 친어간의 교배에 의해 생산된 교배구(RR)의 내성 지수, 생존율, 생존 일수는 각각 17.98, 13.77%, 18.36일로 나타났으나, 민감 친어간의 교배에 의해 생산된 교배구(SS)는 각각 12.46, 2.71%, 12.40일로 나타났다. 이상의 결과에서, 에드워드 질병내성 형질에 대한 가계간, 개체간 내성 정도의차이가 존재하는 것을 확인하였고, 인위 감염 결과를 이용하여 질병 저항성에 대한 선발이 가능할 것으로 판단된다.
Effects of dietary Scutellaria baicalensis extract (SBE) on growth, feed utilization and challenge test of olive flounder (Paralichthys olivaceus) were determined. Six hundred thirty fish averaging 5.0 g were distributed into 18, 180-L tanks. Six experimental diets were prepared in triplicate: SBE-0, SBE-0.5, SBE-1, SBE-2, SBE-3 and SBE-5 diets containing SBE at the concentrations of 0, 0.5, 1, 2, 3 and 5%, respectively. Fish were hand-fed to apparent satiation twice a day for 8 wks. At the end of 8-wk feeding trial, ten fish from each tank were infected by Edwardsiella tarda for challenge test. Survival and weight gain of fish were not affected by dietary concentrations of SBE. However, specific growth rate of fish fed the SBE-2 diet was higher than that of fish fed the SBE-0, SBE-1, SBE-3 and SBE-5 diets. Neither feed efficiency nor serum chemical composition of fish was affected by dietary concentrations of SBE. The cumulative mortality of fish fed the SBE-0 diet was 100% at 96 h after E. tarda infection, but 77 to 87% for fish fed the other diets. Dietary inclusion of 2% SBE appears to be recommendable to improve specific growth rate of fish and SBE had the potential to mitigate mortality of fish at E. tarda infection.
E. tarda의 독성 비교를 위하여 일반 TSB, iron-chelate인 2,2‘-dipyridyl 첨가 TSB 및 Fe 첨가 TSB의 세 가지 조건에서 E. tarda를 배양하였다. 독성시험의 결과는 iron-chelate 첨가 시험구의 E. tarda에서 가장 낮은 독성을 나타내었다. 그리고 각각의 OMPs와 IROMPs을 분리하여 SDS-PAGE로 항원성을 비교한 결과, iron-chelate 첨가 시험구의 E. tarda IROMPs에서 68, 73 kDa 크기의 분자들이 더 많이 발현된다는 것을 확인할 수 있었다. 두 가지 vaccine 투여구 중에서 2,2‘-dipyridyl 첨가 배지로 배양한 균체로 제작한 DP-FKC 항원 투여구가 응집 항체가가 더 높게 나타났다. 면역반응의 변화를 알기 위한 응집 항체가 조사에서는 FKC 항원과 DP-FKC 항원 투여구에서 모두 대조구보다 높은 값을 나타내었고, 3주 째에 최고치를 나타내었다. ELISPOT을 이용한 항체 생성 세포 수의 검출에서도 응집 항체가와 유사한 pattern을 나타내었는데, 두 가지 vaccine 투여구에서 2주 째에 가장 많은 항체 생성 세포 수를 나타내었다. 공격실험에서는 3주 째에 FKC 항원 투여구가 50%, DP-FKC 항원 투여구에서는 80%의 생존율을 나타내었다. 전체적으로 DP-FKC 항원 투여구의 생존율이 높게 나타났다. 이상의 결과로부터 넙치에 대한 E. tarda의 vaccine으로는 현재 연구되고 있는 FKC vaccine보다 철 결핍 조건에서 배양된 균체의 항원인 DP-FKC vaccine이 동일한 조건으로 사용하였을 때 더 나은 방어력을 가진다는 것을 알 수 있었다.
Edwardsiella tarda, the causative organism of Edwardsiellosis, was isolated from the water and the eel, Anguilla japonica of the recirculating eel culture ponds in 1988. E. tarda was always isolated from the water of eel culture ponds in the number of log 2.30~log 4.78 CFU/$m{\ell}$ without distinguishable seasonal characteristics. The counts of isolated E. tarda were changed with the health condition of the eel, i. e., a number of E. tarda were isolated from all checked organs, intestine contents, liver, spleen and kidney of the diseased eel, however, it was hardly isolated from spleen and kidney of the healthy eel. The isolates were classified according to o-agglutinating test into three serotypes (I, II, III). There were no distinct differences in the composition of the serotypes between intestine contents of eel and pond water samples(I, 52.4~53.3% ; II, 20.0~23.8% ; III, 4.8~6.7%). Serotype I was ascendant in the spleen(66.7%) and the kidney(73.7%) samples. By experimental challenge, most of serotype I proved highly virulent to eel in comparison with the other serotypes tested.
본 연구는 tilapia의 Edwardsiella tarda균체 항원(FKC)에 대한 항원성을 증가시키고, 백신의 투여 효과를 지속시키기 위해 백신을 3종류의 adjuvant 즉 FCA, FIA 및 PAS에 혼합하여 사용했을 때와 adjuvant만을 사용했을 때 그리고 E. tarda의 FKC를 투여 했을 때의 효과를 비교 조사하고자 하였다. Microtiter법에 의해 응집 항체가의 지속성을 측정하였고, 공격 시험에 대한 방어 효과는 E. tarda T1123균주의 농도별에 따른 상대 생존율(RPS)로서 판정하였다. 3종류의 adjuvant에 혼합시킨 백신 실험구는 FKC 단독 투여 실험구에 비하여 8주째 높은 응집 항체가를 지속시켰다. 가장 높은 응집 항체가는 2주째 FCA+FKC, PAS+FKC 및 FKC 실험구에서 나타났다. 상대 생존율이 60이상으로 나타난 실험구는 면역 처리 후 3주째 $2.5{\times}10^7\;CFU/ml$와 $2.5{\times}10^8\;CFU/ml$ 농도로서 공격 시험한 FCA+FKC, PAS+FKC 및 FKC 실험구와 8주째 $2.5{\times}10^7\;CFU/ml$ 농도로서 공격 시험한 FCA+FKC 및 PAS+FKC 실험구 이었다. Adjuvant만으로 면역 처리한 Tilapia의 E. tarda에 대한 저항성은 대조구보다 다소 높은 것으로 나타났다. Tilapia의 에드와드병에 대한 백신의 adjuvant로서 FCA와 PAS는 백신 효과를 장기간 지속시켜 방어력을 증강시킨 것으로 나타났다.
본 연구에서는 구기자의 투여가 나일틸라피아의 면역 반응에 미치는 영향을 알기 위하여, 나일틸라피아에 구기자 3% 첨가 사료를 14주일간 투여하면서 어병 세균인 Edwardsiella tarda 유래의 FKC와 ECP를 복강 주사 또는 침지법으로 FKC와 ECP를 단독 또는 혼합 처리하였을 때의 비특이적 및 특이적 면역 반응에 대하여 조사하였다. 비특이적 면역 반응의 지표로서 보체의 용혈능과 lysozyme의 활성을, 특이적 면역 반응의 지표로서 로젯 형성 세포 수의 변화와 응집 항체가를 조사하었으며, 어병 세균인 E. tanla로 생균 공격 실험하여 상대 생존률을 구하였다. 구기자 첨가 사료를 투여하였을 때, 조사한 모든 비특이적 면역 반응 지표들이 활성화되었으며, 백신 처리 후에도 무첨가 사료 투여구에 비하여 높은 면역 활성을 보였다. 백신 처리구의 응집 항체가는 FKC와 ECP의 혼합 처리구가 가장 높았고 FKC 주사구, FKC 침지구의 순으로 응집 항체가가 낫게 나타났으며, 로젯 형성 세포 수도 같은 경향을 보였다. E. tarda로 생균 공격 실험한 결과, 구기자 투여만으로도 방어력이 증가되었다. 그리고 백신 처리하였을 때에는 혼합 처리구가 가장 높은 방어력을 보였으므로, 본 실험에서 사용한 구기라는 기존의 adjuvant와 같이 면역 반응의 증강 효과가 있는 것으로 판단되며, FKC와 ECP로 혼합 백신 처리하는 방법은 효과가 기대되는 백신 방법으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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