• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제16권2호
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• pp.205-210
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• 1989

To investigate the effects of ovarian cysts on the controlled ovarian hyper-stimulation cycles, 16 patients with 16 paired cycles for IVF-ET were analyzed. These patients had taken both type of cycles, i.e., with cyst(cyst group) and without cyst(control group). Mean diameter of ovarian cysts in cyst group was 18.2mm. There were no significant differences in hormone levels in early follicular phase between two groups. No significant differences were found in total dosage of hMG(IU) administered during the ovarian stimulation $843.8{\pm}123.0$ vs $891.0{\pm}129.8$, serum estradiol level (pg/ml) on the day of hCG administration($1542.8{\pm}1100.6$ vs $1567.5{\pm}1193.0$), the number of aspirated follicles $10.0{\pm}3.4$ vs $11.2{\pm}4.3$ and oocytes $5.3{\pm}3.3$ vs $6.2{\pm}3.1$, the fertilization rate(51.2 % vs 57.2 %) and the cleavage rate(40.5 % vs 52.0 %). Serum estradiol terminal patterns during COH in one group tended to be repeated in the other group. In conclusion, this study suggests that small ovarian cysts do not adversely impact on the controlled ovarian hyperstimulation parameters in IVF - ET program and the presence of small ovarian cyst without concomitant high basal serum estradiol level is not an indication of the cancellation of the controlled ovarian hyperstimulation for IVF-ET.

• Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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• 제40권1호
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• pp.7-11
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• 2013

Objective: We evaluated the fertilization potential of immature oocytes obtained from controlled ovarian hyperstimulation cycles of patients undergoing ICSI. Methods: We retrospectively analyzed 463 ICSI cycles containing at least one immature oocyte at oocyte denudation. ICSI was performed on mature oocytes at oocyte denudation (metaphase-II [MII] oocytes) and the oocytes that extruded the first polar body between oocyte denudation and ICSI (MI-MII oocytes). Fertilization and early embryonic development were compared between MII and MI-MII oocytes. To investigate the pregnancy potential of MI-MII oocytes, the pregnancy outcome was analyzed in 24 ICSI cycles containing only immature oocytes at retrieval. Results: The fertilization rate of MI-MII oocytes (37.0%) was significantly lower than that of MII oocytes (72.3%). The rates of delayed embryos and damaged embryos did not significantly differ. Eighty-one immature oocytes were retrieved in 24 cycles that retrieved only immature oocytes and 61 (75.3%) of them were in the MI stage. ICSI was performed on 36 oocytes (59.0%) that extruded the first polar body before ICSI and nine MI-MII oocytes (25.0%) were fertilized. Embryo transfers were performed in five cycles. Pregnancy was observed in one cycle, but it ended in biochemical pregnancy. Conclusion: In ICSI cycles, oocytes that extruded the first polar body between denudation and ICSI can be used as a source of oocytes for sperm injection. However, their fertilization and pregnancy potential are lower than that of mature oocytes. Therefore, ovarian stimulation should be performed carefully for mature oocytes obtained at retrieval, especially in cycles with a small number of retrieved oocytes.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제20권5호
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• pp.711-717
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• 2007

In this study, two cell types from porcine females, namely fetal fibroblasts (pFFs) and adult ear fibroblasts (pAEFs) and two passages (3-4 and 7-8) were investigated by evaluating the development rate, blastocyst cell number and the incidence of apoptosis. No significant differences were observed in the cleavage rates of cloned and IVF embryos. The blastocyst rates between the embryos cloned with pFFs ($15.1{\pm}3.2$) and pAEFs ($10.4{\pm}2.6$) did not differ significantly but was significantly (p<0.05) lower in pAEFs than that in IVF ($22.5{\pm}4.5$) embryos. Total cell number in pFFs ($28.4{\pm}4.3$) and pAEFs cloned blastocysts ($24.2{\pm}5.1$) was significantly (p<0.05) lesser than IVF control ($35.4{\pm}3.2$). Apoptosis rates between cloned blastocysts differed significantly (p<0.05) and were significantly (p<0.05) higher than IVF embryos. The blastocyst rates between the cloned embryos cloned with different cell passages did not differ significantly but in embryos cloned with 7-8 cell passage was significantly (p<0.05) lower than the IVF control. Apoptosis signals were detected in IVF and cloned embryos as early as day 3 and the rates of apoptosis increased concurrently with the embryo development. In conclusion, high apoptosis during in vitro preimplantation development resulted in low development rate and total cell number of cloned embryos. Moreover, based on the apoptotic incidence in cloned blastocysts, fetal fibroblasts are more suitable for production of cloned embryos in porcine.

• Environmental Analysis Health and Toxicology
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• 제6권1_2호
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• pp.71-82
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• 1991

포유동물의 최기형성을 연구하는데 가장 많이 사용되는 동물인 설치류중 랫트의 배자를 이용하여, egg-cylinder기를 지나 head-fold가 이루어지는 초기체절기인 9.5일경부터 뇌, 눈, 귀, 심혈관계가 형성되는 시기인 11,5일까지 2일(48시간) 동안, 체외에서 배양하였다. 그 배양의 최적조건은 실험실마다 다르기 때문에 최적조건확립을 목적으로 이 실험을 행하였다. 온도는 37$^{\circ}C$$\pm$0.2$^{\circ}C$로 유지시키고 가스는 배양초기인 9.5일~10.5일 동안을 50%$O_2$, 5% $CO_2$, 90% $N_2$가스를 공급하여 10.5일부터 6시간 동안은 20% $O_2$, 5% $CO_2$, 75% $N_2$로 하며 나머지 18시간 동안은 40% $O_2$, 5% $CO_2$, 55% $N_2$가스를 배양계에 공급했을 때 가장 좋은 결과가 나왔다. 배양배지로서는 랫트 IC 혈청을 분리하여 열비동화시켜서 사용하였다. 이종혈청이나 합성배지를 첨가해서 배양할 경우는 랫트 혈청에 비해 성장이 좋지 않은 것으로 관찰되었다. 동물실험법의 대체법으로서 배자배양법의 기본조건을 확립하여 최기형성 평가 방법으로서의 가능성을 제시하였다.

• 환경영향평가
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• 제22권6호
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• pp.745-751
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• 2013

Environmental Specimen Banks (ESBs) have been established widely in the world since 1979 for monitoring long-term bio-accumulation of environmental pollutants. The ESBs perform the retrospective analysis of representative biological samples collected regularly and store them in cryogenic condition. In Korea, National Environmental Specimen Bank (NESB) was established in 2009. Since then, NESB had prepared the standard operating procedures (SOPs) for the seven kinds of specimens (Red Pine (Pinus densiflora), Common Carp (Cyprinus carpio), and etc.) for monitoring the effect of environmental pollution on the terrestrial ecosystem and river ecosystem. In 2012, NESB added Black-tailed Gull (Larus crassirostris)'s eggs to the list of the environmental specimen for monitoring marine environmental pollution. In this study, we sampled the eggs of the Black-tailed Gull on two islands (Baekryeongdo of the West Sea and Hongdo of the South Sea). Especially, we selected eggs which remained in the early stages of embryo development for certifying the consistent and stable monitoring for environmental pollutants in egg contents. However, it was not considered to classify an order of eggs per clutch in this study. It is known that the concentration variations of pollutants exist among eggs in one clutch. Therefore, it is needed to consider the positions of eggs in the laying sequences to meet the objective of bioaccumulation monitoring. We collected 30 eggs in each site but the amount may be insufficient to achieve storage target (over 2,000 g). Therefore, we need to consider an optimal sampling size.

• Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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• 제26권10호
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• pp.1399-1405
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• 2013

The present study focused on establishing the effects of interferon-gamma (IFN-${\gamma}$) on interleukin-18 (IL-18) expression patterns and pregnancy outcomes in pregnant rats. Pregnant rats at the post-implantation stage were randomized into control, low IFN-${\gamma}$ (L-IFN-${\gamma}$) and high IFN-${\gamma}$ groups (H-IFN-${\gamma}$) that received normal saline, 100 IU/g of IFN-${\gamma}$ and 500 IU/g of IFN-${\gamma}$ vaginal muscular injection, respectively. The effects of IFN-${\gamma}$ on IL-18 expression and pregnancy outcomes were assessed systematically using several methods, including immunohistochemistry streptavidin-perosidase (SP), image pattern analysis, enzyme-linked immune-sorbent assay (ELISA), whole blood count (WBC) count, microscopy and visual observation. IL-18 was detected in the uteri of all pregnant rats, and mainly distributed in the endometrium, decidual cells, vascular endothelium and myometrium. Immunohistochemistry and image pattern analyses revealed significantly lower IL-18 expression in the H-IFN-${\gamma}$ group compared to the L-IFN-${\gamma}$ and control groups (p<0.01), indicating that high doses of IFN-${\gamma}$ induce downregulation of IL-18 in the uterus of pregnant rats. ELISA results disclosed that IL-18 expression in peripheral blood of the H-IFN-${\gamma}$ group was lower than that of the L-IFN-${\gamma}$ group (p<0.05), and significantly reduced compared to the control group (p<0.01). Moreover, the number of peripheral leukocytes in the H-IFN-${\gamma}$ group was significantly higher than those in the control and L-IFN-${\gamma}$ groups (p<0.01). Morphology analysis showed no evident differences between the L-IFN-${\gamma}$ and control groups. However, for the H-IFN-${\gamma}$ group, uterine mucosa bleeding, necrosis and excoriation were observed using microscopy. Visual observation revealed marroon, swelling, crassitude and no embryo in the uterus, which are obvious indicators of abortion. These results indicate that IFN-${\gamma}$ plays a regulatory role in IL-18 expression in the uterus and peripheral blood of pregnant rats at the post-implantation stage. Moreover, high levels (500 IU/g) of IFN-${\gamma}$ influence normal pregnancy at the early stages in rats by downregulating IL-18 expression in the uterus and peripheral blood and increasing the number of peripheral leukocytes, consequently triggering termination of pregnancy.

• 한국가금학회지
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• 제13권2호
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• pp.167-172
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• 1986

본 연구는 단관백백레그혼순계 염색체의 형태적 특징과 크기를 명확히 구명하기 위하여 중심입지수, 등 완비 및 상대적 길이를 측정하여 이용하고 이들의 염색체 수를 밝혔다. 시험재료로서는 서울대학교 부속목장에서 사육중인 단관백색레그혼순계 암컷 20수와 수컷 5수를 공시하고 이들을 수정시켜 50개의 수정란에 대하여 염색체 분석을 하였다. 분석방법으로서는 중기상의 포착을 위하여 colchicine을 이용하고, hypotonic, fixation, air-drying 처리를 하여 나타난 초기 metaphase상으로서 핵형분석하였다. 시험 결과 분석된 각 염색체의 형태적 특징은 다음과 같다. 1. 1,2심 염색체 : meta 및 submetacentric으로서 이들 둘 간에는 크기에 따라 명확히 구분된다. 2. 3,4심 염색체 : 길이는 서로 비슷하나, 4심 염색체에서는 짧은 단완이 나타나고, 3심은 acrocentric 형태이다. 3. 5심 염색체 : 성염색체(Z)로서 metacentric 형태이다. W 염색체 역시 metacentric 이지만 7-8심 염색체 크기 정도이다. 4. 6심 염색체 : 3심과 같이 acro 형체이나 3심 염색체 크기의 반정도이다. 5. 7,8심 염색체 : 6심 크기의 반정도로서 길이는 서로 비슷하나 7심은 짧은 단완을 가지고, 8심은 acrocentric 염색체이다. 6. 9심 염색체 : 7심과 8심의 크기와 비슷하나 metacentric 양상이다. 7. 나머지 30쌍의 소형염색체 : 점의 형태로서 대부분 acrocentric 형태이다. 이 밖에도 염색체의 수에 있어서 관찰된 sample의 58%가 78개로 나타났고, 나머지는 72-77개로 나타남에 따라 이의 염색체 수는 최소 78개로 사료된다.

• 식물조직배양학회지
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• 제26권3호
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• pp.189-195
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• 1999

녹색꽃양배추의 약배양에 영향을 미치는 제 조건을 규명하고 다양한 유전적인 특성을 가진 품종들을 대상으로 다수의 계통을 유기하여 신품종 육성 소재로 이용하고자 실험한 결과는 다음과 같다. 배지시험 결과 B5배지에 NAA 0.1 mg/L + 2.4-D 0.1mg/L + 당 10% 처리구에서 배상체 발생율이 가장 높았으며 액체배지가 고체배지보다 5배 정도 배발생에 효과적이었다. 약접종 직후 35$^{\circ}C$ 고온처리 일수에 따른 시험에서는 1일처리가 가장 효과적이었으며 시일이 경과할수록 배상체 발생율이 현저히 저하되었다 품종간 배상체 유기율은 Green valient 2.8%에서 Haisi의 21%까지 차이가 심하였으나 이배체율은 62~74%로 품종간 큰 차이를 나타내지 않았다. Rokguray와 Haisi두 품종 약유래 계통의 포장특성 검정결과 초장, 엽수, 측지수, 화뢰의 지름은 다양한 변이를 보였으며 두 품종에서 유기된 계통들 중 조숙이며 초장이 크고 화뢰의 지름이 큰 계통과 중만생이며 엽수가 많고 화뢰의 지름이 작은 계통을 각각 5계통, 7계통을 선발하여 F$_1$육성 소재로 이용하였다.

• Reproductive and Developmental Biology
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• 제31권3호
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• pp.193-198
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• 2007

본 연구는 소의 초기 난할 단계인 2 또는 4세포기 수정란의 특정 분할구가 배반포 단계의 내부 세포괴(Inner Cell Mass)와 영양막 세포(Trophectoderm cells)로의 발달 운명이 미리 정해지는 지를 확인하기 위해 실시되었다. 먼저 생쥐의 체내수정란과 소의 체외 수정란에서 배반포의 영양막 세포에서만 특이적으로 발현하는 cdx2단백질의 발현 양상을 조사하였다. 또한, 소의 경우 2세포기와 4세포기가 내부 세포괴와 영양막 세포로 나눠지는 시점인지를 조사하기 위해 2 또는 4세포기의 특정 분할구에 Dextran의 주입 실험과 분할구 제거 실험을 통해 ICM과 TE 형성을 확인하였다. cdx2의 발현 경향은 생쥐와 소의 2세포기일 때 대칭과 비대칭적으로 발현되는 것을 확인하였다. 생쥐의 4, 8세포기 및 상실배기에서는 분할구 전체에서 발현되었으나, 소 수정란의 분할구에서는 전체 또는 부분적으로 발현되었다. 또한, 생쥐와 소의 배반포기에서는 영양막 세포에서만 발현이 되는 것을 확인하였다. 소 수정란의 2세포기와 4세포기 단계에서 특정 분할구에 주입된 De xtran은 배반포의 내부 세포괴와 영양막 세포의 양쪽에 분포된 것을 관찰할 수 있었다. 2세포기 단계에서 하나의 분할구가 제거된 수정란 역시 ICM 및 TE 세포를 지닌 정상 배반포로 발달함을 확인하였다. 따라서 본 연구 결과는 영양막 세포에서만 특이적으로 발현하는 cdx2의 발현이 2 또는 4세포기 단계 소 수정란에서는 특별한 차이를 보이지 않으며, 궁극적으로 난할 초기에는 ICM과 TE 세포로의 운명이 결정되지 않는다는 것을 보여준다.

• 한국발생생물학회지:발생과생식
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• 제3권1호
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• pp.39-44
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• 1999

성선자극호르몬으로 자극된 난소로부터 회수된 사람의 성숙난자의 전핵형성과 초기발생에 정자의 운동성과 성숙도가 미치는 영향을 조사하였다. 세포질내정자주입 (ICSI)은 HEPES-buffer mTCM-199 배양액에서 실시하였다. 체내에서 성숙된 난구세포부착난자를 ICS에 의하여 사정된 운동성 정자 또는 비운동성 정자로 수정하였을 때 운동성 정자로 수정된 난자가 비운동성 정자로 수정된 난자보다 전핵형성율이 높았다 (79.8% vs 51.7% ; p<0.002)). 그러나 체내에서 성숙된 난구세포부착난자를 ICS에 의해 정소 내 운동성 정자 또는 비운동성 정자로 수정하였을 때 운동성 정자와 비운동성 정자 사이의 전핵형성율은 차이가 없었다. 10.0 mM lactate, 0.5 mM pyruvate, 0.2 mM taurine, 1.0 mM glutamine, 2.22 mM MEM amino acids, vitamin 그리고 10% 사람 난포액이 포함된 수정 Tyrode 배지에서 전핵이 형성된 수정란의 초기 발생은 정자의 채취원과 운동성에 관계없이 9∼16세포기로 발생하였다.