감마선 조사된 건조수산품 8종을 electron spin resonance(ESR) 측정법에 의한 조사 처리 여부 가능성을 알아보았다. 연체류 3종(꼴뚜기, 오징어, 한치) 및 건조어류 5종(가자미, 갈치, 꽁치, 디포리, 쥐포)의 비 조사 시료와 감마선 조사(1, 5, 10 kGy) 시료를 어육과 골수를 제거한 후 뼈를 건조한 다음 시료로 사용하였다. 그 결과 모든 건조수산품은 조사선량이 증가함에 따라 유의적으로 ESR signal intensity가 증가하였으나 조사 유래 특이 라디칼인 hydroxyapatite는 뼈가 포함된 꽁치, 가자미, 갈치 시료에서 비 조사 및 조사 시료와의 뚜렷한 차이를 나타내어 조사 여부 확인이 가능하였다. 또한 HA ratio를 비교해볼 때 갈치가 가자미 및 꽁치에 비해 hydroxyapatite 라디칼의 생성률이 가장 높은 것으로 확인되었으며 조사선량이 증가할수록 증가하였다. 그러나 꽁치는 5, 10 kGy, 가자미와 갈치는 모든 조사 처리구에서 확인이 가능한 반면, 연체동물인 꼴뚜기, 오징어, 한치의 경우 조사 유래 특이 라디칼이 확인되지 않았다. 따라서 본 연구에서는 8종의 건조수산품 중 연체류를 제외한 뼈를 포함한 건조어류 가공품에 대하여 ESR 적용 가능성을 확인하였다.
Park, Sangeon;Shim, Jeong Hyun;Kim, Kiwoong;Jeong, Keunhong;Song, Nam Woong
한국자기공명학회논문지
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제24권2호
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pp.53-58
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2020
Free radicals including reactive oxygen species (ROS) are important chemicals in the research area of biology, pharmaceutical, medical, and environmental science as well as human health risk assessment as they are highly involved in diverse metabolism and toxicity mechanisms through chemical reactions with various components of living bodies. Electron spin resonance (ESR) spectroscopy is a powerful tool for detecting and quantifying those radicals in biological environments. In this work we observed the ESR signal of 2,2,6,6-Tetra-methyl piperidine 1-oxyl (TEMPO) in aqueous solution at various concentrations to estimate the uncertainty factors arising from the experimental conditions and signal treatment methods. As the sample position highly influences the signal intensity, dual ESR tube geometry (consists of a detachable sample tube and a position fixed external tube) was adopted. This type of measurement geometry allowed to get the relative uncertainty of signal intensity lower than 1% when triple measurements are averaged. Linear dependence of signal intensity on the TEMPO concentration, which is required for the quantification of unknown sample, could be obtained over a concentration range of ~103 by optimizing the signal treatment method depending on the concentration range.
Recently, free radicals such as active oxygen species, nitric oxide, etc are believed to be one of the key substances in physiological and pathological, toxicological phenomena, and oxidative damages, and all organism have defencing system against such as free radicals. Formation and extinction of free radicals may be regulated through bio-redox system, in which various enzymes and compounds should be involved in very complicated manner. Thus, direct and non-invasive measurement of in vivo free radical reactions with living animals must be essential to understand the role of free radicals in pathophysiological phenomena. Electron spin resonance spectroscopy (ESR) is very selective and sensitive technique to detect free radicals, but a conventional ESR spectrometer has large detect in application to living animals, since high frequent microwave is absorbed with water, resulting in generation of high fever in living body. In order to estimate in vivo free radical reactions in living whole animals, we develop in vivo ESR-CT technique using nitroxide radicals as spin probes. Nitroxide radicals and their reduced forms, hydroxylamines, are known to interact with various redox systems. We found that! ! the signal decay due to reduction of nitroxyl radicals is influenced by aging, inspired oxygen concentration, ischemia-referfusion injury, radiation, etc. In the present paper, I will introduce in vivo ESR technique and my laboratory recent results concerning non-invasive evaluation of free radical reactions in living mice.
The intracellular free radicals produced at different stages of cell cycle of Saccharomyces cerevisiae ATCC 24858 were investigated by means of electron spin resonance(ESR) spectroscopy. The synchronized cells by repeated starvation and refeeding revealed different ESR spectral pattern compared to that of asynchronized cells. Each spectrum centered at g=2.005, which indicates free radicals. The relative spin concentration was maximat at the end of DNA increase. The variation of the relative spin concentration at each distinct stage of the cell cycle was evaluated in relation to ascorbate concentration, L-galactonolactone oxidase activity, and ascorbate oxidase activity. The highest activities of L-galactonolactone oxidase and ascorbate oxidase were detected just before and at the maximum of relative spin concentration, respectively. And ascorbate concentration fluctuated through each stage of cell cycle with the changes of relative spin concentration, L-galactonolactone oxidase activity, and ascorbate oxidase activity. Thus it is suggested that intracellular free radicals should be related to cell cycle, interacted with ascorbate, and may play an important role in the cell cycle of Saccharomyces cerevisiae.
본 실험은 electron spin/paramagnetic resonance(ESR/EPR)를 이용하여 기존의 DPPH free radical 소거 활성을 측정하였고, 이를 해조류 유래 천연자원으로부터 새로운 항산화물질을 탐색하는데 적용해 보았다. 연구 결과, 녹조류 추출물에서는 참홑파래, 납작파래 및 청각의 고온 메탄올 추출물에서만 약간의 라디칼 소거활성을 나타내었고, 이 외의 추출물에서는 소거활성이 거의 보이지 않았다. 갈조류는 총 71개의 추출물 중 37개의 추출물에서 80% 이상의 소거율을 보여 아주 우수한 항산화 물질을 가진 family로 여겨지며, 특히 모자반류 (Sargassum spp.)는 수용성과 메탄올, 고온과 상온의 모든 추출물에서 높은 라디칼 소거 활성을 보여 앞으로의 신소재 물질 후보로 선별되었다. 홍조류에서는 수용성보다는 메탄올 추출물에서 대체적으로 높은 소거활성이 검색되어, 나중에는 유기용매 분획물을 제조하여 라디칼 소거능을 측정 할 수 있을 것이다. 이처럼 해조류는 라키칼 소거 능력을 가지는 성분을 여러 형태로 다량으로 함유 하고 있는 것으로 사료 되며 앞으로의 연구에 기대가치를 더해 줄 것으로 사료된다.
섬유소 식품의 조사처리 여부 확인에서 전자스핀공명분석법의 개선을 위한 기초자료를 마련하고자, 감마선 조사된 브로콜리와 배추의 전처리 건조방법(FD, OD, ALD, 및 WAD)에 따른 cellulose radical을 분석 비교하였다. 브로콜리 시료에서는 single central signal($g_0$=2.0007)이 나타났으며, 배추 시료에서는 single central signal 외에 $Mn^{2+}$ ion에 의한 sextet signal이 추가로 발견되었다. 조사처리한 채소류에서는 singlet signal을 중심으로 좌우 두 개의 side peak가 나타났으며, 각 side peak의 거리는 5.8-6.1 mT로 조사처리 유래의 cellulose radical임을 확인할 수 있었다. 채소류의 부위별로 ESR spectra를 비교한 결과, 배추는 뿌리와 줄기, 브로콜리는 잎, 줄기 모두 조사처리 여부를 판별하는데 있어 적합하였다. 건조 방법별로는 FD와 OD 처리 시 ESR 강도는 더 높았으나, $Mn^{2+}$ ion과 함께 나타나 명확한 signal을 얻기 어려웠다. 반면, ALD와 WAD 방법의 경우 $Mn^{2+}$ ion이 제거되고, signal ratio도 적합하게 나타나 조사 처리된 채소류의 ESR 판별시, ALD와 WAD 방법이 가장 적합할 것으로 판단되었다.
We studied to determine quantitatively the radical species generated from humic acid (HA) solutions by irradiation(>400 mn). The formation of radical species from HA solutions was investigated with ESR spectroscopy. We gave ESR spectrum with g-value 2.0048 and line width 0.559mT, coincided with those of the semiquinone radical. 0.1 mg/L HA solution generated the radicals of $1.2{\times}10^{-6}M$, increased with increasing HA concentration. Also, pH and ionic strength effect of the amount of the semiquinone radical generate from HA solution. In this study, we have found that the singlet oxygen affects the semiquinone radicals generation in HA solution.
Alnine pellets were installed in a nuclear power plant for one or two operation cycles and measured by electron spin resonance (ESR) spectrometers for dosimetry. Dose and "x/y ratio", i.e., satellite peak over main center peak ratio, were measured for the returned alanine dosimeters from the nuclear power plant and compared to the values of reference alanine dosimeters exposed only to gamma rays. The variation of the x/y ratio change depended on the population of radicals from each radiation component with different LET. The gamma dose in a mixed radiation field was estimated by an additive gamma ray irradiation experiment and the measured dose rate at specified locations in the containment building.
The development of methods for the identification of irradiated foods helps enforce national and international regulations on labelling to ensure the consumer's free choice to buy irradiated or unirradiated foods. and the availabilityof such methods may assist the promotion of international trade in irradiated food products and help prevent abuse of the technology. A number of approaches to determine the physical , chemical, microbiological and biological changes that occur in foods treated with ionizing radiation have been studied. However no single method is universally applicable. Among physical measurements, the leading methods of indentification are electron spin resonance (ESR) spectroscopy and thermoluminescence(TL). ESR is an established non-destructive method for the analysis of free radicals from their traps and TL is the emission of light from irradiated mineral extracts by heating. Viscosity of carbohydrate polymers by causing chain breaks by irradiation, measuring the impedance of potatoes and detection of gases produced radiolytically are promising techniques for identification purposes. Irradiated water-containing foods show significant supercooling when monitored with a differential scanning calorimeter (DSC), which can be applied to identifying irradiated ones.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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