We have investigated the characteristics of encephalomyocarditis(EMC) virus isolated in Korea. The CPE, buoyant density, polypeptide profile and the size of RNA of EMC virus were examined. The granulation, pyknosis and necrosis were observed from 30 to 48 hour's post inoculation of the virus into baby hamster kidney and lung cells. The buoyant density was 1.30 and $1.35g/m{\ell}$. Three different polypeptides, 26Kd, 32Kd, and 34Kd in size, were observed and the size of viral RNA was 7.7Kb.
For the pathologic study of experimental encephalomyocarditis(EMC) infection in piglets by the isolates EMC $K_3$ and $K_11$ isolated from Korea,12 piglets aged 35 days divided into three groups, each of which was infected with the t
In order to find less toxic antiviral agents from basidiomycetes, EA, the water soluble substance, was isolated from the carpophores of Elfvingia applanata (Pers.) Karst. Anti-encephalomyocarditis (EMC) virus activity of EA was examined in Vero cells by plaque reduction assay in vitro. And the combined antiviral effects of EA with interferon (IFN) alpha and gamma were examined on the multiplication of EMC virus. EA exhibited a concentration-dependent reduction in the plaque formation of EMC virus with 50% effective concentration ($EC_{50}$) of 2.12 mg/ml. The results of combination assay were evaluated by the combination index (CI) that was analysed by the multiple drug effect analysis. The combination of EA with IFN alpha showed potent synergism with CI values of 0.40~0.60 for 50%, 70% and 90% effective levels, but that with IFN gamma showed antagonism with CI values of 2.16~2.83.
To elucidate pathogenicity to hamster of encephalomyocarditis virus $K_3$ strain that was isolated in Korea from the swine with reproductive failures, adult male syrian hamsters were experimentally infected intraperitoneally with the virus at $10^{7.0}\;TCID_{50}/0.1ml$ and pathological and immunohistochemical studies were performed. The results obtained through the experiment were as follows. 1. Clinical signs such as depression, unkempt hair and bilateral parlysis of hind limbs were observed. 2. At necropsy, mild congestion was observed in the cerebrum, liver, kidney and lung, and atrophy was evident in testis. 3. In microscopic observation, degeneration and necrosis of the nervous cells and perivascular mononuclear cell infiltration were manifested in central nerve system, and various degrees of degeneration and necrosis of parenchymal cells were detected in pancreas, lacrimal gland, liver, kidney and testis. 4. In immunohistochemical observation, strong positive reactions were observed in degenerated parenchymal cell of testis, and weak positive reactions, in hepatocytes.
Encephalomyocarditis(EMC) virus was isolated from the mummified and stillborn pigs at a swine farm in Chonnam Province, experienced with EMC infection over the period Oct.~Dec. of 1989. In addition some cultural, serological properties of the isolates and experimental infections in the piglets were studied. The results obtained were as follows; 1. Two EMC virus strains with HA titers and CPE similar to EMC-ATCC were established in a baby hamster kidney (BHK)-21 cell line by inoculating homogenates of brain and heart of the 19 mummified or stillborn pigs and designated $K_3$ and $K_{11}$. 2. At the second BHK-21 cell line passage of the initial isolates CPE appeared after incubation for 16~18 hours, while at the fourth and fifth passage the highest titer of HA was recorded, titer of HA using rat and guinea pig erythrocytes. 3. One pig inoculated with the isolate $K_3$ showed dyspnea as clinical signs and died at the 10 days after inoculation at necropsy white necrotic foci were observed from the dead animal heart. 4. Although all the rest surviving pigs showed increases in antibody titer and body temperature of $40^{\circ}C$ above for the initial 2~4 days followed by the return to normal, there were no gross lesions when the animals were sacrificed at the 2 weeks after inoculation.
Encephalomyocarditis virus infection in pigs, characterized by severe reproductive failure in sows and sudden death in less than 7 day-old-piglets, a period of several months from October to December of 1989, in Korea was occurred. The most outstanding gross lesions at necropsy were found in the heart which were consisted of pale, yellow brown necrotic foci of varying size in myocardium. In some cases, pulmonary edema and liver congestion were observed. Histopathology of the heart revealed the interstitial myocarditis, endocarditis and epicarditis with lymphocytic, plasmacytic and macrophage cell infiltration and, in some cases, calcification of the necrotic myocardial muscle fibers. In some cases of brain, the perivascular cuffing and glial nodules were observed. In the liver and the lacrimal gland varying degrees of multifocal necrosis were seen. The virus was isolated from the heart and the brain in a stillborn piglet and a mummified fetus. This outbreak represents the first case of encephalomyocarditis virus infection of pigs in Korea.
The purpose of this study was to establish a rapid, reliable diagnostic method detecting Encephalomyocarditis virus(EMCV) RNA in formalin-fixed, paraffin-embedded tissues of EMCV naturally infected pigs by cDNA probe of EMC $K_3$, the EMCV strain isolated from Korea. Using a biotin-labelled nick translated probe for the cDNA marker. We made up for some defects of radiolabeled method. In sits hybridization(ISH) technique, differently from the other nucleic acid hybridization methods, is able to detect the virus genome specifically in the state of the intact shapes of cells and/or tissues. We succeeded in performing the experiment to detect the EMCV within 1~2 hours using the $MicroProbe^{TM}$ capaillary action system. In this study, we observed highly specific positive signals of red color by staining the paraffin-embedded tissue sections of naturally EMCV-infected pig organs or tissues, including brain, heart, kidney and lacrimal gland with the Fast Red TR salt/Naphtol phosphate chromogen. The results suggested that this ISH method is considered as a highly sensitive and reliable tool for molecular biologic diagnosis of the EMC viral disease.
Kim, In-Seop;Eo, Ho-Gueon;Chang, Chon-Geun;Lee, Soung-Min
Journal of Microbiology and Biotechnology
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제10권6호
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pp.858-864
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2000
The purpose of the present study was to examine the efficacy and mechanism of the fraction IV cold ethanol fractionation and pasteurization ($60^{\circ}C$ heat treatment for 10h) steps, involved in the manufacture of albumin from human plasma, in the removal and/or inactivation of blood-born viruses. A variety of experimental model viruses for human pathogenic viruses, including the Bovine viral diarrhoea virus (BVDV), Bovine herpes virus (BHV), Murine encephalomyocarditis virus (EMCV), and Porcine parvovirus (PPV), were selected for this study. Samples from the relevant stages of the production process were spiked with the viruses, and the amount of virus in each fraction was then quantified using a 50% tissue culture infectious dose ($TCID_{50}$). The mechanism of reduction for the enveloped viruses (BHV and BVDV) during fraction IV fractionation was inactivation rather than partitioning, however, it was partitioning in the case of the non-enveloped viruses (EMCV and PPV). The log reduction factors achieved during fraction IV fractionation were ${\geq}6.9$ BHV, $\geq5.2$ for BBDV, 4.9 for EMC, and 4.0 for PPV. Pasteurization was found to be a robust and effective step in inactivating the enveloped viruses as well as EMCV. The log reduction factors achieved during pasteurization were $\geq7.0$ for BHV, $\geq6.1$ for BVDV, $\geq6.3$ for EMCV, and 1.7 for PPV. These results indicate that the production process for albumin has sufficient virus-reducing capacity to achieve a high margin for virus safety.
Using a retrovirus, foreign genes can be introduced into mammalian cells. The purpose of this study is to produce a retrovirus that can make the infected cells express two genes; the human multidrug resistance gene (MDR1) and the HLA-B7 gene, which is one of the major human histocompatibility complex (MHC) class I genes. For the expression of these genes, the internal ribosome entry site (IRES) was used, which was derived from the encephalomyocarditis (EMC) virus. In order to produce retroviruses, a retroviral vector was transfected into a packaging cell line and the transfected cells were treated with vincristine, which is an anti-cancer drug and a substrate for the MDRI gene product. This study revealed that two genes were incorporated into chromosomes of selected cells and expressed in the same cells. The production of the retrovirus was confirmed by the reverse transcription (RT)-PCR of the viral RNA. The retrovirus that was produced infected mouse fibroblast cells as well as the human U937. This study showed that packaging cells produced the retroviruses, which can infect the target cells. Once the conditions for the high infectivity of retrovirus into human cells are optimized, thus virus will be used to infect hematopoietic stem cells to co-express MDRl and HLA-B7 genes, and develop the lymphocytes that can be used for the immnogene therapy.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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