A large amount of information is currently available for somatic embryogenesis of plants. However, one common problem related to somatic embryos is that the conversion rate can be low for some species. Apical meristems are responsible for post-embryonic growth of the embryo. The low percentage observed is most likely a result of poor apical meristem development or defects in the meristem organization during somatic embryogenesis. In flowering plants, apical meristems are well developed by the late heart stage of zygotic embryo development. In conifers, such as white spruce, apical meristems are formed at the pre-cotyledon stage. Thus, apical meristem development occurs very early, prior to the maturation stage of embryo development. Once formed, meristems are stably determined. In the somatic embryo, as exemplified by white spruce, since embryo development is not synchronous, tissue differentiation including apical meristem formation occurs throughout the“maturation”stage. Different apical meristem organizations can be found among different individuals within a population. In contrast to their zygotic counterparts, the apical meristems appear not to be stably determined as their organization, as the shoot apical meristem especially, can be easily modified or disrupted. Precocious germination seldom results in functional plantlets. All these observations suggest that the conditions for somatic embryo maturation have not been optimized or are not suitable for meristem formation and development. The following strategies could improve meristem development and hence conversion: 1. Simulate in ouuio conditions to promote meristem development prior to the“maturation”treatment.2. Prevent deterioration of apical meristem organization during somatic embryo maturation.3. Promote further meristem development during embryo germination.
Nitric oxide (NO) is a simple combined molecule of oxygen and nitrogen, and has a wide variety of action on the physiological and pathophysiological function of the body. It is a key transducer of the vasodilator message from the endothelium to vascular cells. However, its different roles have been elucidated by numerous researches, which was undertaken in the 80's and 90's. Three types of NO synthase were involved in synthesizing NO and they are identified in different tissues and cells including macrophage, endothelial cells and even tumor cells. In the late 90's, we undertook a number of researches for elucidating the effect of NO on embryo development, since developmentally arrested bovine embryos contained large amount of NO metabolites in their cytoplasm. Subsequently, we found that the addition of a spontaneous NO donor to culture medium markedly inhibited embryo development and that its inhibitory role was independent of embryonic genome activation. Research was focused to find a way to prevent the inhibitory action of NO on embryo development and demonstrated that the addition of hemoglobin, a NO scavenger, to embryo culture medium greatly stimulated in vitro-development of bovine and mouse embryos. Based on these research outcomes, we developed a NO action-free culture system for embryos and other tissues. The efficacy of such system has subsequently been confirmed by achieving the high rates of preimplantation development and blastocyst formation in the NO action-free culture of mouse and bovine embryo. In this article, we briefly introduced the nature of NO and our research outcomes on the role of NO in embryo development.
Partheno Embryo's research is known to play a very important role in identifying the development of embryonic cells or analyzing the genetic mechanisms of embryonic development, but the information on apoptosis formed during the early stage of development on Partheno Embryo is very little. Therefore, this study analyzed whether the embryonic cell death of unit embryos can be inhibited by adding Scriptaid, one of HDACi, which plays a role in demethylation of histone proteins as a method of regulating the cell cycle in the early embryo development of Partheno Embryo. As a result, the differentiation rate was higher in the group that added Scriptaid and FBS, but the cellular development was higher in the group that added pregnant serum to Scriptaid. As a result of analyzing the expression of the gene through IF and PCR, the group with the addition of gestational serum increased the expression of BCL2 and PCNA, which affects the anti-Casp3 action in cell survival. In addition, it is interpreted that treatment of Scriptaid for 16 hours, rather than 24 h treatment lowers the expression of Casp-3, a representative factor of apoptosis, and also increases embryonic development, thus affecting early embryo development. Therefore, it is concluded that the 16-hour treatment of Scriptaid and the use of gestational serum will inhibit cell death in the early embryonic development and increase the development rate of the embryo.
Ghimire, Balkrishna;Jeong, Mi Jin;Choi, Go Eun;Lee, Hayan;Lee, Kyung Mee;Lee, Cheul Ho;Suh, Gang Uk
Korean Journal of Plant Resources
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v.28
no.3
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pp.350-356
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2015
Abeliophyllum distichum is a monotypic taxon of Oleaceae and endemic to Korea. A comprehensive study on embryogeny and fruit and seed coat ontogeny in Abeliophyllum was carried out via microtome and light microscopy. The fertilization occurs during mid– to late April and embryo matures by early July. The embryo development follows the general fashion from globular embryo – transition embryo – heart shaped embryo – torpedo embryo – walking-stick embryo to mature embryo. The pericarp clearly differentiates into three histological zones: exocarp, mesocarp, and endocarp. The young seed comprises 10-12 cells thick seed coat and the mature seed coat comprises an exotesta, 6-8 mesotesta and an endotesta. Any crystals, phenolic-like compounds, idioblasts, and the sclereids are not found in pericarp as well as seed coat. An overall development confirms Solanade type of embryogenesis in Abeliophyllum. The endocarp becomes more prominent in mature fruit and all the layers of endocarp are highly lignified. On the basis of mechanical layer the seed coat is of exotestal type.
Hong, Yeon Hee;Lee, Jang Mi;Kim, Seul Ki;Youm, Hye Won;Jee, Byung Chul
Clinical and Experimental Reproductive Medicine
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v.47
no.2
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pp.140-146
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2020
Objective: To investigate whether the degree of post-warming embryo or blastocyst development is associated with clinical pregnancy in vitrified embryo or blastocyst transfer cycles. Methods: Ninety-six vitrified cleavage-stage embryos and 58 vitrified blastocyst transfer cycles were selected. All transfer cycles were performed from February 2011 to March 2019, and all vitrified embryos or blastocysts were warmed from 4 PM to 6 PM and then transferred the next morning from 9 AM to 10 AM. The scores of the cleavage-stage embryos and blastocysts were assessed at warming and at transfer using the modified Steer method and the Gardner method, respectively. The mean embryo or blastocyst score, score of the single top-quality embryo or blastocyst, and the difference in the score between warming and transfer were compared between nonpregnant and pregnant women. Results: In the cleavage-stage embryo transfer cycles, both the top-quality embryo score at transfer and the difference in the score between warming and transfer were significantly associated with clinical pregnancy. A top-quality embryo score at transfer of ≥ 60.0 (area under the curve [AUC], 0.673; 95% confidence interval [CI], 0.531-0.815) and a difference in the score between warming and transfer of ≥ 23.0 (AUC, 0.675; 95% CI, 0.514-0.835) were significant predictors of clinical pregnancy. In blastocyst transfer cycles, the top-quality blastocyst score at transfer was the only significant factor associated with clinical pregnancy. A top-quality blastocyst score at transfer of ≥ 38.3 was a significant predictor of clinical pregnancy (AUC, 0.666; 95% CI, 0.525-0.807). Conclusion: The top-quality embryo score at transfer and the degree of post-warming embryo development were associated with clinical pregnancy in vitrified cleavage-stage embryo transfer cycles. In vitrified blastocyst transfer cycles, the top-quality blastocyst score at transfer was the only significant factor affecting clinical pregnancy.
The purpose of this study was to analyze whether FSH and LH hormone treatment directly or indirectly affect embryo development in embryonic development. To determine this, we compared the development of embryonic cells through the expression pattern of MMPs. As a result, 33.8% of blastocysts were formed in FSH added group, 20.8% in LH added group and 10% in FSH + LH added group. In addition, the activity of MMP-9 was highly detected in the FSH-added group, and the expression of Casp-3 was much lower than that of the other groups. These results suggest that the addition of FSH seems to increase the activity of MMP-9 in embryonic cells, and that LH, on the contrary, may activate MMP-2 activity. In addition, the expression level of MMP-2 in the FSH-added group was high in the Trophoblast cell group and in the LH-added group, the hormone ideal secretion might affect the development of the embryonic cell.
Studies were made to evaluate the specific and combined effects of different fatty acids on the in vitro development of 8-cell rat embryo in culture media with and without carbohydrate substrate. Palmitic, oleic, linoleic and arachidonic acids were added singly and in combination to media which contained fatty acid-free BSA. Cell numbers in blastocysts cultured in the media were counted and compared with cell numbers in blastocysts at the corresponding stage collected from the uterus. Oleic, linoleic and arachidonic acids promoted the rat embryo development from 8-cell to the blastocysts. especially in the absence of carbohydrate substrates. Among these three, oleic acid was the most effective but embryo development was not accelerated by the addition of palmitic acid in either the presence or the absence of carbohydrate substrates. Addition of the mixture of four fatty acids was more effective for rat embryo development than single treatment with any of fatty acids tested. Cell numbers per blastocyst in the presence and absence of carbohydrate substrate were similar, and did not differ from those for blastocysts obtained from the uterus.
Rice is a staple food for more than 50% of the world's population. Embryo comprises only 2 to 3% of the weight distribution of the entire pericarp but has higher concentration of vitamins, proteins, and essential fatty acids than the other parts of grains. Moreover, ${\alpha}$-tocoperol, ${\gamma}$-oryzanol, phytic acid and ${\gamma}$-aminobutric acid that have nutraceutical value are abundant. Increasing the volume of embryo assures the fortification of nutritional value of rice grain. We developed new black waxy giant embryo rice, Milyang 263 by crossing Josaengheugchal, a black waxy rice variety, and $ge^t$, a giant embryo mutant generated by tissue culture. The nutrient contents and physical properties of Milyang 263 were compared with several giant embryo mutants and normal embryo rice varieties. Changes in the nutrient properties after germination were also observed. Results indicated that this new black waxy giant embryo rice, Milyang 263, offers a promising source for improving nutritional quality of rice especially anthocyanin, essential minerals, and GABA.
Biotechnologies for cloning animals and in vitro embryo production have the potential to produce biomedical models for various researches. Especially, pigs are a suitable model for xenotransplantation, transgenic production and various areas of reproductive research due to its physiological similarities to human. However, utilization of in vitro-produced embryos for transfer remains limited. Despite improvement over past few decades, obstacles associated with the production of good quality embryos in vitro still exist which limit the efficiency of cloning. One of major problems includes improper in vitro maturation (IVM) and culture (IVC). Oxidative stress caused from in vitro culture conditions contributes to inadequate IVM and IVC which leads to poor developmental competence of oocytes, failure of fertilization and embryo development. To reduce the oxidative stress, various antioxidants have been used to IVM and IVC system. However, limited information is available on the effects of resveratrol on livestock reproductions. Resveratrol is a polyphenolic natural product and well known as an antioxidant in foods and beverages (e.g. in grapes and red wine). Resveratrol is known to be cardioprotective, anticarcinogenic, anti-inflammatory, antioxidant and antiapoptotic. This paper will review the effects of resveratrol on in vitro maturation of oocytes and embryo development.
Technologies on preimplantation porcine embryos have been developed quickly and significantly. Successful development of systems for culture of porcine zygotes to the blastocyst stage has made it possible to utilize follicular oocytes for in vitro production of embryos and thus stimulated research on various embryo technologies. Recent technological development of embryo cryopreservation, separation of X- and Y-bearing spermatozoa and non-surgical embryo transfer has also made it easy to utilize in vivo- and in vitro-produced embryos for artificial manipulation to produce clones and transgenic pigs. Further progress in overcoming various problems associated with each embryo technology will result in acceptable efficiency to utilize porcine embryos with a high or increased quality. Combining these technologies will accelerate further expansion of the swine industry not only for meat production but also for the production of therapeutic recombinant proteins and xonografts.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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