PARK , YEON-JIN;KIM, IN-CHEOL;BAEK, HYUNG-HEE;BANG, OK-KYUN;CHANG, HAE-CHOON
Journal of Microbiology and Biotechnology
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v.14
no.6
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pp.1275-1279
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2004
Citron peel oil was extracted from citron (Citrus funas) fruit by steam distillation, and was used as starting material for microbial conversion to synthesize attractive flavor compounds by using Enterobacter agglomerans 6L. E. agglomerans was isolated from citron peel and was able to metabolize the citron peel oil and grew well ($A_{600}:\;3.0$) on the citron peel oil as the sole carbon source. Multiple terpene metabolites were produced by E. agglomerans 6L on M9 salt media with citron oil vapor. The identified bioconversion products from the citron peel oil included trans-2-decenal, octanol, $\delta$valerolactone, $\gamma$-valerolactone, cryptone, hydroxycitronellol, cuminol, and $\gamma$-dodecalactone.
In order to cloning of the nif genes of Enterobacter agglomerans NFB-264, the digested total DNA of the strain was ligated to pBR 322 and transformed into E. coli. Through the negative selection and colony hybridization, the transformants were obtained. The recombinant plasmids, pNEL 10 and pNES 20 were extracted from these transformants. It was known from Southern hybridization that pNEL 10 contained the 12 Mdal foreign DNA fragment hybridized with nif Q-X probe and pNES 20 included the 5 Mdal foreign DNA fragment hybridized with nif NE and nif YK probe.
Entercbacter agglomerans 6L was isolated from citron (Citrus junos) peel by using an enrichment culture containing (+)-limonene. It was able to metabolize limonene and grew well ($A_{600}$:4.5) on limonene as a sole carbon source. E. agglomernas 6L was highly resistant to limonene toxicity, and grew to 1.0 optical density ($A_{600}$) even at 5% (v/v) of limonene in Luria-Bertani media. ${\gamma}-Valerolactone$ and cryptone were detected as the major metabolic products of limonene by E. agglomerans 6L.
A phosphate solubilizing bacterium (PSB) possessing a high ability to solubilize hydroxyapatite (HA) was isolated from the rhizosphere of wheat. The PSB markedly developed clear zones after inoculating for 36 hours at $30^{\circ}C$. This bacterium was identified as Enterobacter agglomerans through API 20E system and Biolog$^{TM}$ analysis. The values of similarity and distance coefficient from authentication trial of the strain were 0.656 and 4.79 respectively. High performance liquid chromatography (HPLC) of the products of this strain indicated that this strain excretes maily oxalic acid with som other organic acids. During the incubation period of E. agglomerans, the pH values showed an inverse correlation ($r^2=0.933^{**}$) with solubilization of inorganic phosphate. Acid phosphatase activity of the strain was 10-15 times greater than alkaline phosphatase activity. Alkaline phosphatase activity had almost constant near zero activity across time. The population of E. agglomerans greatly increased during the first day of inoculation ; however, it drastically decreased thereafter.
To evaluate the treatability of activated sludge induced by benzene with microorganisms, isolation and characterization of benzene-degrading microorganisms were carried out. Six bacterial isolates from the activated sludge were identified ; Pseudomonas fluorescens, Enterobacter agglomerans, Enterobacter cloacae, Klebsiella oxytoca, Citrobacter freundii and Klebsiella pneumoniae. P. fluorescens degraded 55% of benzene contained in the medium as a sole carbon source, E. cloacae 24%, E. agglomerans 41%, and K. oxytoca 32%. Optimal temperature, pH and benzene concentration for growth of P. fluorescens appeared to be 31$^{\circ}C$, pH 7.0, and 300mg benzene per liter. When the P. fluorescens was dominant in the activated sludge induced by benzene, the indicator protozoa was Aspidisca sp. When concentration of benzene was about 387mg per liter, the growths of Aspidisca sp. and Litonotus sp. were high. Protozoa, Litonotus sp. and Vorticella sp. did not grow over 1600mg of benzene per liter.
Microbial of enzymatical methods are suitable for production of rare monosaccharides. Using oxidation and reduction ability of Microorganisms, various rare ketoses and polyols can be produced, for example D-tagatose from galagtitol by Enterobacter agglomerans strain 221e. L-tagatose from galactitol by Klebsiella pheumonias strain 40b, L-psicose from allitol by Gluconobacter frateurii IFO 3254, D-talitol from d-tagatose by Aureobasidium pullulans strain 113B, allitol from D-psicose by Enterobacter agglomerans strain 221e and so on. We can produce various rare aldoses and ketoses using aldose isomerases, for example L-galactose from L-tagatose by D-arabnose isomerase, and L-ribose from L-ribulose by L-isomerase, and so on. D-Tagatose 3-epimerase of Pseudomonas sp. ST-24 is very useful for preparationof various rare ketoses, for example D-psicose from D-fructose, D-sorbose from D-tagatose, L-fructose, from L-psicose and so on. Using polyol dehydrogenases, aldose isomerases and D-tagatose 3-epimerase, we can design the suitable for production of a certain rare monosaccharide from a suitable substrate.
Isolation and identification of mesophilic and psychrotrophic bacteria distributed in Korean refrigerated beef were attempted. Total isolated colonies were 192, and identified as 5 genera and 10 species. Among them, mesophilic bacteria were Enterobacter aerogenes, E. agglomerans, Serratia liquefaciens, Proteus mirabilis, and "psychrotrophic" bacteria were Pseudomons fluorescens, P. putida, P. pickettii, P. mendocina, P. stutzeri, Alcaligenes faecalis. Dominant species was Serratia liquefaciens as mesophiles, and Pseudomonas putida as psychrotroph.chrotroph.
Mallory, Larry M.;Yuk, Chang-Soo;Liang, Li-Nuo;Alexander, Martin
Korean Journal of Soil Science and Fertilizer
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v.16
no.4
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pp.358-367
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1983
Antibiotic-resistant strains of Salmonella typhimurium and Klebsiella pneumoniae died readily after their addition to raw sewage, but they grew in sterilized sewage. The decline was not a result of antibiotic stresses, and because the bacteria were able to survive in large numbers for at least 15 days in solutions containing no organic nutrients, it was not a result of competition. Toxin production, bacteriophages, and Bdellovibrio did not cause the disappearance of the two bacterial species. A decline was also evident if the sewage was first passed through a $3-{\mu}m$ filter or treated with cycloheximide or cycloheximide plus nystatin, but protozoa developed under these conditions. Little or no decline occurred if the sewage was filtered and treated with the eucaryotic inhibitors before adding S. typhimurium or K. pneumoniae, and protozoa were not detected. S. typhimurium increased in abundance if cycloheximide, streptomycin, and erythromycin or large amounts of glucose were added to sewage. Tetrahymena thermophilus did not significantly reduce the population of S. typhimurium in buffer when the density of the bacterium was about $10^4/ml$. However, when more than $10^8$ Enterobacter agglomerans cells per ml were added to the buffer, T. thermophilus reduced the abundance of E. agglomerans and S. typhimurium to $10^6$ and 10/ml, respectively. The density of S. typhimurium was further decreased by a second increment of E. agglomerans cells. The disappearance of S. typhimurium and K. pneumoniae from sewage thus is the result of predation by protozoa. It is proposed that predators will eliminate a prey species from a natural environment when an alternate prey is present at concentrations above the threshold number for active feeing by the predator and when the rate of growth of the prey is less than the rate of predation.
Objectives : This study was carried out to moniter microbial flora on freeze-dried herbal powder and identify isolated bacteria. Methods : We measured the total number of bacteria and fungi in 29 herbal powder which had made according to the guideline of KFDA. For the identification, we observed microscopic properties and carried out polymerase chain reaction(PCR). The purified DNA was analyzed by DNA sequencer. Results : Among the 29 herbal powders, the fungi were detected only one sample as unacceptable range of total aerobic bacteria. Isolated bacteria were identified as Bacillus cereus, B. subtilis, B. megaterium, B. licheniformis, Erwinia tasmaniensis, E. amylovora, and Pantoea agglomerans by 16S rDNA analysis. E. tasmaniensis was observed 20 herbal samples. Conclusions : According to above results, further studies for the effective sterilization of low herbal materials should be needed.
D-Tagatose production from D-galactose was investigated using 35 type strains of American Culture Type Collection (ATCC) and Korean Collection for Type Cultures (KCTC) which have potential to produce D-tagatose. Enterobacter agglomerans ATCC 27987 was selected as a D-tagatose producing strain due to its short fermentation time and high production of D-tagatose. Optimization of the culture conditions for D-tagatose production by E. agglomerans ATCC 27987 was performed. Among various carbon sources, D-galactose was the most effective carbon source for D-tagatose production. As the D-galactose concentration was increased, cell growth and D-tagatose production increased. Effect of nitrogen sources on D-tagatose production was studied. Of inorganic nitrogen sources, ammonium sulfate was effective one for D-tagatose production and yeast extract was the most suitable organic nitrogen nutrient. The concentrations of inorganic compounds such as KH$_2$PO$_4$, K$_2$HPO$_4$, and MgSO$_4$$.$7H$_2$O were also optimized for D-tagatose production. The optimal medium was determined to contain D-galactose of 20 g/l, yeast extract of 5.0 g/l, (NH$_4$)$_2$SO$_4$ of 2.0 g/l, KH$_2$PO$_4$ of 5.0 g/l, K$_2$HPO of 5.0 g/l, and MgSO$_4$$.$7H$_2$O of 5 mg/l. The optimal environmental conditions in a 250-$m\ell$ flask were found to be pH of 6.0, temperature of 30$^{\circ}C$, and agitation speed of 150 rpm. D-tagatose of 0.41 g/l could be obtained in 24 h from 20 g/l D-galactose at the optimal culture condition without induction and cell concentration.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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