Cathepsin B is abundantly expressed peptidase of the papain family in the lysosomes, and closely related to the cell degradation system such as apoptosis, necrosis and autophagy. Abnormal degradation of organelles often occurs due to release of cathepsin B into the cytoplasm. Many studies have been reported that relationship between cathepsin B and intracellular mechanisms in various cell types, but porcine embryos has not yet been reported. Therefore, this study evaluated the effect of cathepsin B inhibitor (E-64) on preimplantation developmental competence and quality of porcine embryos focusing on apoptosis and oxidative stress. The expression of cathepsin B mRNA in porcine embryos was gradually decreased in inverse proportion to E-64 concentration by using real-time RT-PCR. When putative zygotes were cultured with E-64 for 24 h, the rates of early cleavage and blastocyst development were decreased by increasing E-64 concentration. However, the rate of blastocyst development in $5{\mu}M$ treated group was similar to the control. On the other hand, both the index of apoptotic and reactive oxygen species (ROS) of blastocysts were significantly decreased in the $5{\mu}M$ E-64 treated group compared with control. We also examined the mRNA expression levels of apoptosis related genes in the blastocysts derived from $5{\mu}M$ E-64 treated and non-treated groups. Expression of the pro-apoptotic Bax gene was shown to be decreased in the E-64 treated blastocyst group, whereas expression of the anti-apoptotic Bcl-xL gene was increased. Taken together, these results suggest that proper inhibition of cathepsin B at early development stage embryos improves the quality of blastocysts, which may be related to not only the apoptosis reduction but also the oxidative stress reduction in porcine embryos.
우리 나라에서 가장 감염자가 많은 기생충인 간흡충의 현 감염에 특이한 항원 분획을 찾고자 면역이적법을 이용하여 감염자의 혈청을 검색하였다. 실험적으로 토끼에서 얻은 간흡충 성충의 조항원에 시스테인계 단백질분해효소 억제제인 I-64를 첨가하였을 때 큰 분자량의 분획을 가장 잘 보존하여 200-14 kDa의 범위에 20개 이상의 분획을 관찰하였다. 이 조항원을 이용하여 경북 상주군 주민의 혈청을 면역이적법으로 검사하였다 대변검사, 피내반응검사, 효소면역법검사(ELISA)를 이 용하여 검사한 73명 중 충란양성자 49명의 혈청 내에 특이 IgG와 IgE 항체가 생성되었고, IgM과 IgA 항체는 특이하게 반응하지 않았다. 여러 항원 분획 중에서 43, 34, 28-25 kDa 항원이 현 감 염에 특이한 분획이고. 항체와 반응한 94, 80, 72, 68, 64, 62, 52, 47, and 40 kDa 분획은 특이하지 않은 분획임을 확인하였다. 추후에 각 항원과 이에 대한 혈청반응에 대하여 특성을 더 연구 할 필요가 있으며, 특히 치료후 추적검사를 통하여 혈청내 항체의 소실을 구명하여야 할 것이다.
와이브로는 OFDMA/TDD 기술을 기반으로하는 고속 이동 인터넷 표준이고, IEEE802.16e 무선 MAN 표준 통합 버전의 하나이다. 본 논문에서는 64QAM SOFM 전처리기를 이용한 와이브로 시스템의 성능 개선을 제안하였다. 제안한 방법은 Broadband 64 QAM 와이브로 시스템 수신단에 전처리 SOFM 신경망 자력등화를 사용한다. 전처리 SOFM 신경망은 송신 데이터 형태인 64QAM을 형상화 하고 자력등화는 ICI를 제거한다. 제안한 방법의 유용성을 확인하기 위하여 MSE와 BER에 대하여 시뮬레이션 하였으며, 시뮬레이션 결과 제안한 64QAM SOFM 전처리기를 이용한 와이브로 시스템은 기존의 와이브로 시스템보다 성능이 개선되었음을 확인하였다.
가토에게 간흡충을 감염시키고 3개월 후 거살한 다음 간흡충의 충체, 간흡충의 분비배설액 그리고 간토의 담즙을 조항원으로 제조한 후 이에 대한 항원단백질의 구성물질을 분석하였다. 그리고 cysteine계 면역억제제인 E-64와 serine계 면역억제제인 PMSF를 첨가하였을 때 단백질 구성물질의 발현 양상을 관찰하였다. 실험적으로 가토에서 얻은 간흡충 성충의 조항원은 200-9 kDa의 범위에서 26개의 분획 을 관찰하였으며, 간흡충 성충 조항원에 cysteine계 단백질분해효소 억제제인 E-64를 첨거하였을 때 잘 보존하여 200-9 kDa의 범위에서 29개의 분획을 관찰하였다. 간흡충 성충의 분비배설액 조항원은 200-9 kDa범위에서 27개의 분획이 관찰되었으며, cysteine계 단백질분해효소 억제제인 E-64를 첨거하였을 때 잘 보존하여 200-9 kDa의 범위에서 29개의 분획이 관찰되었다. 그리고 간흡충을 감염시킨 가토의 담즙 조항원은 200-9 kDa의 범위에서 19개의 분획이 관찰되었으며, serine 계 단백질분해효소인 PMSF를 첨거하였을 때 200-10 kDa의 범위에서 22개의 분획이 관찰되었으나, cysteine계 단백질분해효소인 E-64에서도 비슷한 양상을 보였다. 대조군인 건강 가토의 담즙 조항원은 200-10 kDa의 범위에서 22개의 분획이 관찰되었으며, serine계 단백질분해효소 억제제인 PMSF를 첨가하였을 때 잘 보존하여 200-12 kDa의 범위에서 23개의 분획이 관찰되었다. 앞으로 각 항원에 대한 면역학적 특징 및 단세포군 항체에 대한 구체적인 규명이 계속되어야겠다.
Resistance gene mphK was cloned from Escherichia coli 209K strain which is highly resistant to erythromycin (EM). By using the cloned plasmid pGE64, E. coli NM522 was transformed. The comparison of macrolide-phosphotransferase K [MPH(K)] activity between E. coli 209K and E. coli NM522(pGE64) showed that the total enzyme activity of MN522(pGE64) was fifty-fole higher than that of 209K. To identify characteristics of MPH(K) more precisely. MPH(K) was isolated and purified from the NM522 (pGE64). The final purification f MPH(K) through several stages of purification process was 89 fole and the overall recovery was 11%. This enzyme was monomer with the molecular weight of 34 kDa and its isoelectric point (pI) was 5.0. The optimal pH and temperature for activity were 8.0 and $40^{\circ}C$, respectively.
Background: Syncope is a common problem in children and adolescents. However, a large proportion of syncope cases have no underlying cause. Purpose: This study aimed to identify the factors affecting the severity of syncope using tissue Doppler imaging (TDI). Methods: This retrospective study included 61 children and adolescents with syncope who underwent echocardiography. The head-up-tilt test (HUT) was performed when there was a more severe syncopal event. We compared the echocardiographic findings between the execute HUT and nonexecute HUT, negative HUT result and positive HUT result, and normal electrocardiogram (ECG) and abnormal ECG groups. Data were analyzed using an unpaired t test post hoc analysis. Results: In the execute and nonexecute HUT groups, the odds ratios were 0.55 for medial E/E' (P=0.040) and 0.64 for lateral E/E' (P=0.049). Comparison of the results of the decreased, normal, and increased groups for lateral E/E' revealed a significant difference in the execution HUT and nonexecute HUT groups (overall, P=0.004; decreased vs. increased, P=0.003; normal vs. increased, P=0.050). Conclusion: Medial E/E' and lateral E/E' were decreased in patients with severe syncopal events. These findings suggest that the presence of left ventricular diastolic deterioration may cause hypoperfusion even in the absence of organic causes and, consequently, increase syncope severity and frequency. The TDI measured by echocardiography can be used as an index to predict syncope recurrence and/or severity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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