The present study was undertaken to determine the effect of tensile force on DNA and protein biosynthesis in bone cells, and to identify the cell type(s) which primarily respond to external physical force among the heterogenous bone cell populations. As a prerequisite for this study, two bone cell populations which retain fibroblastic and osteoblastic feature were isolated from fetal rat calvaria with sequential enzyme digestion scheme. Tensile force was delivered to each bone cell population by two acrylic resin plates connected with a orthodontic expansion screw during culture period. Rate of DNA and protein synthesis in each bone cell population were assessed by the incorporated radioactivity of $[^3H]-thymidine$ into DNA and $[^3H]-proline$ into fraction of collagenase-digestible protein and noncollagenous protein, respectively. DNA synthesis of osteoblast-like calvarial cell populations was increased significantly by the application of tensile force for 24 hours. In contrast, no alteration in DNA synthesis of fibroblast-like populations could be observed in response to applied force. Tensile force induced the change in protein synthesis of bone cell populations with the same pattern. Total protein and collagen synthesis were increased whithin 24 hours in osteoblast-like populations, but not in fibroblast-like populations by tensile force application. These findings indicate that physical force can affect cellullar activity of the particular cell population, not all cell Populations residing in bone and osteoblasts respond more sensitively than fibroblasts. So osteoblasts can modulate the behavior of other bone cells including osteoclasts by producing several local regulating factors of bone metabolism. In this context, preferential responsiveness of osteoblasts to applied tensile force observed in this study suggests that osteoblasts may play an important role in regulation of physical force-induced remodelling process.
This study was carried out to examine the effects of phytate addition on the solubility and digestibility of the low-phytate soy protein isolate (LSPI) and high-phytate soy protein isolate (HSPI). In SDS-polyacrylamide gel electrophoresis of soy protein isolate, different patterns of proteins were observed in both HSPI and LSPI at various phytate and pH levels, suggesting that phytate may bind specifically to certain protein fractions at a particular pH. For example, proteins of M.W $1.8{\sim}3.5\;kDa$ resisted phytate binding at acidic pH. LSPI was fractionated into albumin, globulin, gliadin and glutelin, and phytate was shown to bind with difficultly to all three gliadin bands. Effects of phytate on the pepsin digestibility of soy proteins were apparent, especially in the short term digestion.
Purpose: Aggregatibacter actinomycetemcomitans is associated with localized aggressive periodontitis. It produces cytolethal distending toxin (CDT), which induces cell cycle arrest in the G2/M phase. The CDT holotoxin is composed of CdtA, CdtB, and CdtC. CdtB has structural homology to human DNase I and is an active component of the CDT complex acting as a DNase. In particular, the pattern homology seen in the CdtB subunit has been associated with specific DNase I residues involved in enzyme catalysis, DNA binding, and metal ion binding. So, to study the functions and regulation of recombinant CdtB, we made up a quantity of functional recombinant CdtB and tested it in relation to the metal ion effect. Materials and Methods: We constructed the pET28a-cdtB plasmid from A. actinomycetemcomitans Y4 by genomic DNA PCR and expressed it in the BL21 (DE3) Escherichia coli system. We obtained the functional recombinant CdtB by the refolding system using the dialysis method and then analyzed the DNase activity and investigated the metal ion effect from plasmid digestion. Results: The recombinant CdtB subunit was expressed as the inclusion bodies. We were able to obtain functional recombinant CdtB subunit using refolding system. We confirmed that our refolded recombinant CdtB had DNase activity and was influenced by the metal ions $Mg^{2+}$ and $Ca^{2+}$. Conclusion: We suggest that the factors influencing recombinant CdtB may contribute to CDT associated diseases, such as periodontitis, endocarditic, meningitis, and osteomyelitis.
Proceedings of the Botanical Society of Korea Conference
/
1985.08b
/
pp.51-57
/
1985
In order to evlauate feasibility of the gene tagging by the maize transposable element Ac in heterologous plant systems, we have investigated physical distances and directions of transposition of the element in Arabidopsis thaliana and tobacco cultured cell line BY-2. We prepared a T-DNA construct that carried a non-autonomous derivative of Ac with a site for cleavage by endonuclease I-Scel (designated dAc-I-RS element). Another cleavage site was also introduced into the T-DNA region outside dAc-I-RS. A number of transgenic Arabidopsis plants were generated, each of which had a single copy of the T-DNA at a different chromosomal location. To examine the pattern of transposition, three out of these transgenic plants were crossed with the Arabidopsis plant that carried the gene for Ac transposase and progeny in which dAc-I-RS had been transposed were isolated. After digestion of the genomic DNA of these progeny with I-SceI, sizes of segment of DNA were determined byd pulse-field gel electrophoresis. We also performed linkage analysis for the transposed elements and sites of mutations near the elements. Our results with three transgenic lines showed that 50% of all transposition events had occurred within 1, 700 kilo-base pairs (kb) on the same chromosome, with 35% within 200 kb, and that the elements transposed in both directions on the chromosome with roughly equal probability. The data thus indicate that the Ac-Ds system is most useful for tagging of genes that are present within 200 kb of the chromosomal site of Ac in Arabidopsis. In addition, determination of the precise localization of the transposed dAc-I-RS element should definitely assist in map-based cloning of genes around insertion sites. In the present paper, we report typical examples of such gene isolation studies.
Kim, Won-Tae;Bae, Sung-Woo;Kim, A-Young;Park, Kwan-Ho;Lee, Sang-Beom;Choi, Young-Cheol;Han, Sang-Mi;Park, Young-Han;Koh, Young-Ho
BMB Reports
/
v.44
no.6
/
pp.387-392
/
2011
To investigate the molecular scavenging capabilities of the larvae of Hermetia illucens, two serine proteases (SPs) were cloned and characterized. Multiple sequence alignments and phylogenetic tree analysis of the deduced amino acid sequences of Hi-SP1 and Hi-SP2 were suggested that Hi-SP1 may be a chymotrypsin- and Hi-SP2 may be a trypsin-like protease. Hi-SP1 and Hi-SP2 3-D homology models revealed that a catalytic triad, three disulfide bonds, and a substrate-binding pocket were highly conserved, as would be expected of a SP. E. coli expressed Hi-SP1 and Hi-SP2 showed chymotrypsin or trypsin activities, respectively. Hi-SP2 mRNAs were consistently expressed during larval development. In contrast, the expression of Hi-SP1 mRNA fluctuated between feeding and molting stages and disappeared at the pupal stages. These expression pattern differences suggest that Hi-SP1 may be a larval specific chymotrypsin-like protease involved with food digestion, while Hi-SP2 may be a trypsin-like protease with diverse functions at different stages.
It is suggested that Urechis unicinctus is a filler feeder as like many tide and watery invertebrates which filtrate food materials by ciliary movement. However, the structure of the filter is not yet known in U. unicinctus, nor the filtering mechanism is not well understood. This study reveals ciliated epithelial cells in the foregut and the features of the cilia are good accord with that of known filtrating apparatus of other tide animals. This may implies that the foregut is in function of filtration and the food materials are filtrated by the ciliary movement. With the observation of the filtrating apparatus in the foregut, the intestine of U. unicinctus can be functionally compartmented into 3 parts. These are already known midgut and hindgut in function of digestion and respiration respectively, and the foregut in function of filtrating apparatus for foods. The filtrating apparatus of U. unicinctus is composed of the pseudostratified columnar epithelial cells with numerous cilia. The cilia are well differentiated kinocilia with the typical microtubule pattern, kinetosome and cilia roots. There are two kinds of striated cilia roots, the main root and the accessory root. The main root is extended perpendicularly from the cell surface to basement membrane and the short accessory root is branched with an acute angle of about $80^{\circ}$ from the main root at level of basal plate of the kinetosome. The spacial approaches of the main root with the large fused form of mitochondria is one of the characteristic features which might be in structural consideration an intimate association between energy source and energy mass consuming cell organelles.
We screened lysates of the laboratory strains of pseudomonads utilizing hydrocarbon by agarose gel electrophoresis and cesium chloride-ethidium bromide equilibrium centrifugation, to find an intrinsic plasmid as a vector and to examine the relationship between the plasmid and hydrocarbon degradation. Only one strain from the examined strains, Pseudomonas putida KU190, contained a plasmid. We named the plasmid pKU41. The molecular size of pKU41 was determined as 41kb, using covalently closed circular forms of RP4 and pSY343 as standard size markers. The restriction sites of pKU41 for BamHI, BglII, EcoRI, HindIII, and SalI were 3, 1, 3, 6 and more than 13, respectively. With double or triple digestion, restriction map of pKU41 was constructed for BamHI, BglII and HindIII. For elucidation on the biological function of the plasmid, test was conducted on the ability of hydrocarbon utilization of the host strain but no apparent relationship was observed.
Kim, Tae-Hoon;Hwang, Mi-Sook;Song, Ju-Dong;Oh, Min-Hyuk;Moon, Yong-Hwan;Chung, Ik-Kyo;Rhew, Tae-Hyoung;Lee, Choon-Hwan
ALGAE
/
v.21
no.2
/
pp.261-266
/
2006
The innate soluble polysaccharides and phenolic compounds of marine macroalgae are serious contaminants which interfere with experimental procedures such as restriction enzyme digestion, polymerase chain reaction (PCR) and other enzymatic reactions using extracted DNA samples. The viscous polysaccharides are co-precipitated with DNA samples by isopropanol or ethanol precipitation in conventional experiment. To overcome the problem, a method for the isolation of high molecular weight DNA from Porphyra tenera is developed with the application of diatomaceous earth column. The isolated DNAs by this method were about 50-100 kb in size and could be digested well with restriction enzymes. The nuclease activity seemed to be minimal, and high reproducibility in the arbitrary primed PCR for RAPD analyses was a distinctive feature. These results suggest that this method is very efficient in isolating nucleic acid from macroalgae including Porphyra.
Park, Yun-Joo;Yun, Yeo-Pyo;Lee, Hyung-Joo;Jang, Hae-Dong
Korean Journal of Food Science and Technology
/
v.28
no.1
/
pp.99-104
/
1996
Carbohydrate-free caseinomacropeptide (CMP) was isolated from the sweet whey powder by a precipitation method using 12% trichloroacetic acid. The yield of carbohydrate-free CMP was 2.7 g from 100 g sweet whey powder. The electrophoretic pattern and the amino acid analysis of CMP showed that isolated CMP was quite pure, indicating the precipitation with 12% trichloroacetic acid was very effective for isolating carbohydrate-free CMP from the sweet whey powder. Trypsin, covalently immobilized on pore glass beads by carbodiimide (EDC) method, was 20mg per 1g glass beads. CMP was almost completely hydrolyzed by soluble trypsin in 24hr, but not by immobilized trypsin. The tryptic hydrolysates were fractionated on a Bio-Gel P 4 column $(1.5{\times}120\;cm)$and separated peptides were tested for their capacities to inhibit platelet aggregation using a aggregometer. The hydrolysate obtained from CMP after 24hr digestion by immobilized trypsin showed the highest activity.
A series of growing and digestion trials was conducted using Sprague- Dawley weanling male rats in order to determine the effects of two protein sources (casein and ISP (isolated soyprotein) ), three protein levels (10, 20 and 30%), and two feeding patterns (ad libitum and meal feeding) on the growth, protein and energy metabolism, and body composition of rats. The total energy level of experimental diets was kept constant in 3,600 kcal ME /kg diet. The results were as follows : 1) The amount of food intake and the weight gain of meal-fed group were lower than those of ad libitum group. Though the intake of meal-fed group on 20 and 30% casein diet was only 85% of ad libitum group, it was able to gain as much as ad libitum group. 2) There were no significant differences in the food efficiency ratio (FER) and the energy efficiency (weight gain per 100 kcal GE intake) between ad libitum and meal feeding group. The FER and the energy efficiency of 20 and 30% casein diets of meal-fed group were greater than those of ad libitum group. 3) Though the gross energy intake (GE ), the digestible energy (DE) and the metabolizable energy (ME) tended to be lower at meal-fed group, the DE/GE and the ME/GE ratios for meal-fed group were the same as those for ad libitum. 4) Though meal- fed group fed less amount of nitrogen than ad libitum group, there were no differences in nitrogen balance and the retention of rats among the treatments. Actually meal-fed group retained more nitrogen than ad libitum group at the levels of 20 and 30% dietary protein. 5) After growing and digestion trials, the body composition of rats was constant among all treatments. Significantly high negative correlation coefficient (r = -0.77) was found between the body fat content and the body moisture content. Consequently, this study suggests that meal- fed group on 20 and 30% casein diets has shown more effective utilization of the ingested food and energy than ad libitum group, and increasing tendency of weight gain and the body fat deposition. Those influences of meal feeding pattern in rats were more effective on the casein diet than on the ISP diet.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.