Kim, Young Jin;Park, Tae Il;Kim, Hyun Soon;Suh, Sug Kee;Kim, Hag Sin;Yun, Song Joong
Journal of Plant Biotechnology
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v.6
no.2
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pp.91-96
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2004
The use of liquid-medium-based procedure relative to the solid media led to a 4.5-fold increase in the number of cotyledon-stage embryos. The most efficient system for multiplication and regeneration of somatic embryos was CP6 procedure with the media MSD40/MSD20/MSM6AC/FNL0S3S3GM. However, the rate of regeneration was lower. About 71% of the embryos with dicotyledon were continued to develop the roots after desiccation treatment and 92% of the germinated embryos produced shoots in 10 days. Of the four morphologically different types of embryos, dicotyledonous ones showed a high frequency of conversion, while only a few with fused and horn type cotyledon developed shoots. Mature somatic embryos were desiccated in empty petri dishes for 12-72 h. Embryo survival rate was the highest after 12 h of desiccation, but maximal germination was observed at 24 h. After desiccation, they were placed on MS medium without growth regulators for germination. Germinating embryos were transferred to small pots with vermiculite for plant regeneration. The etiolating the plants during the growth was resolved to add 1% activated charcoal on hormone-free MS medium.
Marrs, Rob H.;McAllister, H.A.;Cho, K.;Rose, Rob J.;O'Reilly, J.;Furnes, M.;Lee, Hyohyemi
Proceedings of the National Institute of Ecology of the Republic of Korea
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v.1
no.1
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pp.22-30
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2020
Many areas of vegetation in the British uplands have reduced species diversity as a result of sheep overgrazing. It has been suggested that abandonment or re-wilding strategies might be used to reverse this. A likely first step would be the removal or reduction of grazing livestock from upland areas, with a presumption that this would lead to a recovery in species richness. However, we do not know if this would work, or the timescales involved. One of the important areas where more knowledge is needed is information on the size and composition of soil seedbanks as regeneration from zseed is a likely pathway of recovery. Here, we compared seedbanks in both grazed and ungrazed plots in five experiments at Moor House NNR in the northern Pennines; these sheep grazing exclusion experiments were started 52 and 63/64 years ago. Soil samples (n=10) were collected from both grazed and ungrazed plots in each experiment, and seed emergence counted in glasshouse trials. We detected only seeds of common species and very few dicotyledonous species. This suggests that the soil seedbank is unlikely to be a reliable source of the less common species for ecological restoration in these upland communities, suggesting an extinction debt. Therefore, seed addition and the creation of suitable safe-sites for germination may be needed in conjunction with grazing controls to allow the establishment of plants that will increase the species richness of the vegetation. However, this interventionist restoration approach remains to be tested.
Agrobacterium tumefaciens induces cancerous growths called crown galls at wound sites on dicotyledonous plants. A large plasmid called Ti plasmid is responsible for virulence. Upon tumor induction, part of the plasmid, termed T-DNA, becomes integrated into plant genome and its genetic sequences are expressed. These properties allow Ti plasmids to be used as gene vectors in plants. Several in vitro methods for the transfer of Ti plasmid into plant cell have been developed. One of them is the treatment of bacterial spheroplasts and plant protoplasts mixture with polyethylene glycol that is generally used as fusogen in cell-to-cell fusion. Several workers investigated the interaction of bacterial spheroplasts with plant protoplasts in the presence of polyethylene glycol and suggested that the interaction is not fusion but endocytosis. In this report we observed the interaction of Agrobacterium tumefaciens spheroplasts with Nicotiana tabacum protoplasts by electron microscope. Agrobacterium tumefaciens spheroplasts and Nicotiana tabacum protoplasts were prepared and mixed in the presence of polyethylene glycol and high pH-high $Ca^{2+}$ buffer. Then the interaction of the spheroplasts with the protoplasts was examined by transmission electron microscope. After the treatment of polyethylene glycol the spheroplasts adhered to the surface of the protoplasts and then they were engulfed by the protoplasts. After the high pH-high $Ca^{2+}$ buffer treatment the engulfed spheroplasts lost their cell integrity. No fusion process was observed. Thus all these observations suggest that the introduction process of Agrobacterium tumefaciens spheroplasts into Nicotiana tabacum protoplasts with the aid of polyethylene glycol is endocytosis.
Kim, Jung-Hye;Koo, Yong-Bum;Lee, Ki-Yung;Chung, Jae-Kyu
Journal of Yeungnam Medical Science
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v.1
no.1
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pp.41-48
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1984
The soil bacterium Agrobacterium tumefaciens is a plant pathogen that cause3 crown gall tumors by infecting the wounded dicotyledonous plants and subsequent integration of bacterial DNA into plant nuclear DNA. Virulent A. tumefaciens strains harbor a large Ti (tumor-inducing) plasmid that carries genes essential for tumorigenesis. In the present study, 13 strains (Malus pumila Mill; $A_{1-3}$, Populus monilifera; $W_{1-6}$, Populus tomentiglandlosa; $P_{1-3}$ and Rosa species; $R_1$) of Agrobacterium isolated in korean crown gall tumors and plasmids were observed in 6 strains ($W_2$, $W_3$, $W_6$, $P_1$, $P_3$ and $A_2$). The test for crown gall tumor formation was resulted only in ATCC15955 and $KW_2$ strains inoculated into the stem of sun flower and the development was observed for 4 and 6 weeks after inoculation. Above two Ti plasmids (pTi) were purified by cesium chloride-ethidium bromide density gradient centrifugation and digested with restriction enzyme and fragments of pTiATCC 15955 and $pTiKW_2$ observed by EcoR I ; 25&27, Hind III; 23&21, BamH I ; each 20 and Hpa I ; 12&27, and sizes of pTiATCC15955 and and $pTiKW_2$ calculated as 200 and 87 kbases. Octopine was isolated from tumor tissue ($W_{1-6}$ and $P_{1-3}$) and these strains confirmed as octopine type.
The Precesses for leaf development in dicotyledonous plants are surprisingly complex, while the mechanism of controlling and coordinating them is poorly understood. To characterize the fundamental features of the leaf development of Arabidopsis, we first attempted to isolate mutants that alter leaf morphology. Here, leaf morphological mutant of Arabidopsis, lanceolatal (lan1) which has small and narrow leaves have isolated and characterized. To clarify the function of LAN1 in organ development, we characterized lan1-7 mutant using an anatomical and genetic approach. The lan1-7 mutant had reduced size of foliage leaves and reduced dimensions of stems. A reduction both in cell size and in cell number was evident at the cellular level in the lan1 mutant, revealing that LAN1 gene appears to affect cell division at an earlier stage and cell elongation throughout the development of leaf primordia. from the analysis of heterogeneous plant with lan1 mutation and 35S-AG transgenic plant, AG gene is revealed to regulate leaf morphology under the control of 35S promoter. Thus, MADS-box gene was revealed to have some relationship to that of LAN1 gene at certain stage in leaf development processes.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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