코로나바이러스감염증-19는 사람의 호흡기관에 다수로 분포하는 안지오텐신전환효소2, angiotensin converting enzyme 2 (ACE2)를 매개하여 감염을 일으키는 β-genus 바이러스이고 완치환자 및 백신 접종자의 항체생성에 대한 효율적인 사후관리가 필요한 질병을 유발하는 바이러스다. 이 논문에서는 임상 시료의 중화항체와 특이적으로 반응하는 재조합 단백질을 개발하고 이를 이용하여 COVID-19 바이러스에 대한 중화항체를 빠르고 편리하게 진단하는 신속 진단 키트를 개발하고 그것의 성능 평가를 통하여 제품화 가능성을 확인하는 것을 목표로 하였다. COVID-19 S1 RBD 재조합 단백질을 사용한 신속 진단 키트의 양성 퍼센트 일치(PPA) 및 음성 퍼센트 일치(NPA)가 미국 FDA EUA에서 승인한 ELISA 키트와 비교했을 때 각각 100% 및 98.3%인 점에서 신속 진단 키트에 적용할 수 있을 것으로 확인하였다. 향후 신속 진단 키트의 성능을 개선하고 정량 분석 장비를 통해 중화항체를 정량적으로 분석이 가능하면 제품화 통해 검체내의 중화항체 유무와 양을 확인함으로써 COVID-19 바이러스에 대한 면역성을 예측하고 추가 예방접종 여부를 판단하는 중요한 자료로 활용될 수 있을 것으로 생각한다.
In Korea, bovine tuberculosis (bTB) is a representative zoonotic disease that causes considerable economic loss. In determining the positive bTB, the ELISA method for examining the amount of interferon-gamma (IFN-γ) is included in Korea's diagnostic standard method. Recently, commercially available BIONOTE TB-Feron ELISA Plus (TB-Feron Plus) that detects IFN-γ has been introduced. However, since the scientific basis for the performance is limited, we evaluated performance by comparing it with the results of another IFN-γ ELISA assay kit (BOVIGAM®) certified by Office International des Epizooties. In our research, 42 positive blood samples preliminarily tested with a tuberculin skin test and/or BOVIGAM® and 54 negative blood samples collected from three bTB free farms were subjected to IFN-γ assay using the TB-Feron Plus and the BOVIGAM®, respectively. The result shows that the sensitivity, specificity and accuracy were 81.0% (34/42), 100% (54/54), 91.7% (88/96) in TB-Feron Plus kit and 78.6% (33/42), 100% (54/54), 90.6% (87/96) in BOVIGAM® kit, respectively. Moreover, the overall accordance percentage of the two kits was 99.0% (95/96) and there was almost perfect agreement between two assays (Kappa=0.977, P<0.0001). Furthermore, additional studies confirmed that elevated lymphocyte numbers in blood did not interfere with the results of the TB-Feron Plus kit. And, delayed time from sampling to culture decreased the optical density (OD) value. Therefore, we concluded that the TB-Feron Plus kit was not inferior to BOVIGAM® in performance. High lymphocyte numbers in blood did not impact on TB-Feron Plus results, while delayed time before culture interfered with OD value.
Stabilization of antibody, which is specific to Salmonella typhimurium antigens, present in dry states on membranes was accomplished, and its shelf-life, i.e., duration for maintaining minimum 90% of the initial activity, under optimal conditions was determined. To prepare two major components of an immuno-strip, the antibody was not only immobilized on nitrocellulose membrane surfaces but also placed within the pores of glass fiber membrane after conjugating it with old colloids as signal generator. Among potential stabilizers of the immuno-components, a disaccharide, trehalose, showed a significant protection effect of immunoglobulin structure from thermal energy. Optimal concentrations of trehalose for the respective component were significantly different (8-fold higher for the antibody-gold conjugate than for the immobilized antibody), which probably resulted from distinct densities and configurations of antibody present on the membranes. An additional requirement for the gold conjugate was freeze-drying of this substance such that the conjugate can be readily resolubilized upon contact with aqueous medium. By using the components prepared under optimal conditions, immuno-strips were constructed and exposed to thermal energy. Signals with less than 10% decrease in the intensity were maintained for approximately 21 days at 60$^{\circ}C$. Compared to previous reports, this result represented a 2-year shelf-life at room temperature. it was, however, two times longer if determined from thermal acceleration tests based on the theory of inactivation rate of protein. Such discrepancy between the two estimates could be mainly attributed to errors in accurately controlling temperatures and also to changes in the physical properties of membranes due to a high thermal energy.
Most progesterone enzyme immunoassays(EIA) are used liquid phase double-antibody separation. These methods consume considerable time and reagents because of the requirements for several washing and centrifugation steps involving the reactants. Because of there several problems, we were prompted to develop an effective EIA system by the use of higher titer of progesterone antiserum free of anti-bovine serum albumin antibodies (anti-BSA). The results obtained were as follows. 1. The antibody of progesterone antiserum was high as $1.5{\times}10^5$. 2. Percent activity bound of progesterone antiserum was about 77 at a dilution to $5{\times}10^3$ times. 3. Progesterone antiserum was contained a large amount of anti-BSA antibodies. 4. The anti-BSA was completely absorbed by using of polymerised BSA. 5. The molecular weight of albumin polymer (polymerised BSA) obtained by using 2.5% glut. araldehyde was $5{\times}10^5$.
본 연구는 수학 학습 과정에서 빈번하게 유발되는 학습자의 오류를 교사들이 간편하고 정확하게 진단하고 처방하는데 도움을 줄 수 있는 교사용 자료 개발의 필요성을 제안하고, 이를 통해 이 분야의 연구를 진작시키고자 한다 이를 위해 수학과 오개념 및 오류 관련 연구들을 종합 분석하여, 이를 토대로 교재개발의 첫 번째 단계라 할 수 있는 교재의 구성요소 및 체제를 제안하였다. 본 연구에서는 교사용 교재의 구성 요소로 (1)오류 유형 및 유형별 빈도수, (2)오류 진단지, (3)오류 원인 (4)예방 아이디어 (5)지도 아이디어 (6)연습지 (7)성취도 검사지 등의 7가지를 추출하였으며, 각 요소별로 현재까지의 연구 상황 및 미래 연구 방향을 제안하고 있다.
Between February 2020 and September 2021, 378 calves with diarrhea were investigated across 96 cattle breeding farms in Korea, using a rapid diagnostic kit. The study examined the infection rates of major pathogens causing diarrhea in calves, which were categorized by season, age, birth month, and region. Additionally, logistic regression analysis was conducted to investigate the factors affecting the infection rate. The study found that the five representative pathogens causing calf diarrhea exhibited differences in infection rates based on season, region, age, and birth month. Bovine rotavirus, bovine coronavirus, Cryptosporidium, and Giardia commonly exhibited varying risks of infection based on season and age. Furthermore, in addition to these risk factors, bovine rotavirus and Cryptosporidium were found to impact the infection risk of each pathogen by region, while Giardia was found to be affected by birth month.
Jung, Hae-Won;Song, Joong-Hyun;Yu, Do-Hyeon;An, Su-Jin;Sur, Jung-Hyang;Kim, Young Joo;Han, Donghyun;Jung, Dong-In
한국임상수의학회지
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제36권6호
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pp.319-324
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2019
Receptor tyrosine kinases (RTK) are major promising targets in anticancer therapy in human and veterinary medicine. Using immunohistochemistry method, we evaluated the expressionof five types RTK (PDGFR-α, PDGFR-β, VEGFR 2, c-Kit and Abl) in the six canine brain tumor samples (2 meningioma, 2 astrocytoma, 1 ependymoma and 1 choroid plexus papilloma). A total of five samples expressed PDGFR-β (5/6), one sample, the choroid plexus papilloma, expressed c-Kit (1/6), and a total of two samples expressed Abl (2/6). None of the samples showed expression of PDGFR-α and VEGFR 2. We demonstrate that a significant portion of canine brain tumors express tyrosine receptors for growth factors and show that these receptors generally localize to tumor cell membranes and the cytoplasm. Evaluation of immunohistochemical expression for the RTKs PDGFR-β, c-Kit, and Alb in canine brain samples reveals an interesting potential for molecular targeting by TKIs in therapeutic studies of canine brain tumors, and more studies will be needed to assess the interactions and efficacy of these RTKs and TKIs. Based on these results, we have some evidence for novel chemotherapeutic trials using TKIs for canine nervous tumors.
파밤나방(Spodoptera exigua (Hiibner))의 살충제 감수성을 판별할 수 있는 간편한 진단 장치가 개발되어 야외 집단을 대상으로 판별능력을 시험했다. 이 진단장치의 기본설계원리는 에스테라제와 아세틸콜린에스테라제의 효소활력이 파밤나방의 살충제 감수성과 밀접한 관련성이 있음을 이용하였다. 네가지 형태의 진단장치(ED, EM, AD 및 AM)가 고안되었고 판별효소(E-에스테라제, A-아세틸콜린에스테라제)와 억제제(D-dichlorvos, M-monocrotophos)의 종류에 따라 분류되었다. 판별억제제의 농도는 각각 ED는 1mM, EM는 10mM, AD는 100mM 및 AM는 100mM이었다. 억제되지 않은 저항성 개체는 두 효소 모두에서 적색을 보이나 억제된 감수성 개체의 시료는 무색으로 나타난다. 한 개체의 파밤나방으로부터 채취된 혈액과 머리시료가 네가지 판별장치 검색장치에 한꺼번에 이용되었다. 검색장치의 실증검증을 위해 11개의 실내와 야외 집단들을 대상으로 살충제 감수성과 검색장치 판별력을 비교하였다. 이들 집단은 파밤나방 방제에 이용되고있는 3가지 살충제들(bifenthrin, methomyl, chlorpyrifos-methyl)에 대해 네 종류의 판별장치는 상이한 약제 감수성을 보였다. ED는 bifenthrin, AD는 methomyl 및 ED와 AM은 chlorpyrifos-methyl에 대하여 약제 감수변이를 판별하는 데는 각각 효과적이었다. 이상의 본 연구에서는 개발된 검색장치는 간편하고 신속하게 특정집단의 약제 저항성개체의 빈도수를 알려줌으로 효과적인 방제방법을 선정하는데 이용될 수 있다. 특히, 각 지역의 지도소에서 이 검색장치를 이용할 경우 객관적이고 합리적인 현장 농민에게 지도할 수 있겠다.
첫 번째 에볼라 출혈열 발발은 1976년 콩고 민주 공화국과 수단에서 발생했으며, 이후 2014년서 아프리카에서 27,741건, 11,284건의 사망자가 발생했다. 발열은 Filoviridae 계열에 속하며 ssRNA 게놈을 가진 에볼라 바이러스에 의해 발생했다. 바이러스의 알려진 아형은 Bundibugyo ebolavirus, Reston ebolavirus, Sudan ebolavirus, Tai Forest ebolavirus 및 Zaire ebolavirus이다. 역사적으로 에볼라의 주요 발생 지역은 동부 및 중부 아프리카 열대 지방에서 발생했다. 서아프리카에서의 발발로 인해 전세계 사회에서 수많은 사망과 공포가 확산되었다. 효과적인 치료와 백신이 없는 상황에서 전염병을 관리하고 통제하는 가장 중요한 방법은 정확한 진단을 통해서이다. WHO(세계 보건기구)는 체외진단(IVD) 검사에서 에볼라의 선택과 사용에 관한 긴급 지침을 발표했다. RealStar Ebolavirus Screen RT-PCR 키트 1.0 (Altona), Liferiver-Ebola Virus (EBOV) 실시간 RT-PCR 키트, Xpert 에볼라 검사 및 ReEBOV 항원 검사를 통해 수많은 회사 및 연구 기관에서 진단을 받고 4가지 WHO 조달 승인 진단을 확인했다. 또한, 신속한 검사 키트 Rapid Diagnosis Test (RDT)와 같은 새로운 진단법이 현재 연구 중이다.
자궁경부암은 전 세계적으로 네번째를 차지하는 여성암이다. 자궁경부암의 대부분 원인은 인유두종 바이러스의 감염이다. 인유두종 바이러스를 검출하기 위해 다양한 분자진단학적 방법들이 고안되었다. 분자진단학적 방법 중의 real-time PCR은 목표 DNA 또는 RNA의 정량과 민감도 향상을 목표로 도입되었다. 특히, real-time PCR 과정은 수행 전에 RNA 추출 및 상보적인 DNA 합성 과정이 필요하다. 따라서 본 연구에서는 민감하고 적합한 상보적인 DNA 합성 키트를 알아보기 위해서 상보적인 DNA 합성에 이용되는 두 개의 상용화된 키트를 평가하였다. 자궁경부암 세포주에서 두개의 상보적인 DNA 합성 키트의 $R^2$과 효율성을 비교한 결과 차이가 없었다. 그러나 Invitrogen 키트보다 Takara 키트가 $10^2$ 및 $10^3$ SiHa 세포주에서 P<0.001를 나타내었고 $10^1$ 및 $10^2$ HeLa 세포주에서도 P<0.001를 나타내었다. 이를 통해 Takara 키트가 Invitrogen키트보다 민감도가 높음을 알 수 있었다. 또한 40개의 탈락세포검체의 8, 4, 2, 1 mL을 이용하여 상보적인 DNA 합성 키트를 비교한 결과 Invitrogen 키트보다 Takara 키트가 8, 4, 1 mL에서 P<0.01 및 0.5 mL에서 P<0.05을 나타내어 임상 검체를 이용하였을 때에도 Takara 키트가 Invitrogen 키트보다 민감도가 높음을 알 수 있었다. 본 연구는 적합한 상보적인 DNA 합성 키트를 확인하기 위해 수행되었으며, 상보적인 DNA 합성 키트가 real-time PCR 결과 다양성에 영향을 미친다는 것을 시사하였다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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