Traditional soybean paste from Shandong Liangshan and Tianyuan Jiangyuan commercial soybean paste were chosen for analysis and comparison of their bacterial and fungal dynamics using denaturing gel gradient electrophoresis and 16S rRNA gene clone libraries. The bacterial diversity results showed that more than 20 types of bacteria were present in traditional Shandong soybean paste during its fermentation process, whereas only six types of bacteria were present in the commercial soybean paste. The predominant bacteria in the Shandong soybean paste were most closely related to Leuconostoc spp., an uncultured bacterium, Lactococcus lactis, Bacillus licheniformis, Bacillus spp., and Citrobacter freundii. The predominant bacteria in the Tianyuan Jiangyuan soybean paste were most closely related to an uncultured bacterium, Bacillus licheniformis, and an uncultured Leuconostoc spp. The fungal diversity results showed that 10 types of fungi were present in the Shandong soybean paste during the fermentation process, with the predominant fungi being most closely related to Geotrichum spp., an uncultured fungal clone, Aspergillus oryzae, and yeast species. The predominant fungus in the commercial soybean paste was Aspergillus oryzae.
An agar medium(HY) was developed to detect the urease-producing lactic acid bacteria. HY medium was prepared with the addition of tryptone, glucose and tween 80 to the supernatant of autoclaved skim milk and yeast extract mixture. There was no difference in eumeration of lactic acid bacteria between the HY and commercial media, such as M17, MRS and BCP agar. The urease activity of Streptococcus salivarius subsp. thermophilus was detected on the HY agar medium contained urea by the color change of bromocresol purple as the pH indicator, but not on the commerical agar media. Furthermore, it was succeeded to screen the urease activity of bacteria in skim milk used as a raw material in dairy product manufacture. Therefore, HY medium was proved to be suitable for the screening of urease-producing lactic acid bacteria.
This study was performed to assess microbial contamination of Aronia melanocarpa, blueberry, raspberry, and cranberry sold in several markets. We investigated total aerobic bacteria and detected foodborne bacteria by multiplex PCR from Aronia melanocarpa, blueberry, raspberry, and cranberry. Total aerobic bacteria of each sample showed mean 3.54 log CFU/g for Aronia melanocarpa, mean 1.90 log CFU/g for blueberry, and mean 1.40 log CFU/g for raspberry, but not detected in cranberry. Specially, Aronia melanocarpa contained high total aerobic bacteria contamination among various berries and contamination level reached 4.17 log CFU/g in sample 5. To evaluate the effect of distribution conditions, we also investigated total aerobic bacteria of various berries. Total aerobic bacteria showed mean 2.89 log CFU/g for berries in refrigerated distribution and 1.40 log CFU/g in frozen distribution, but not in dry distribution. For assessment of foodborne bacteria contamination, we conducted PCR with multiplex primers of E. coli O157, S. aureus, B. cereus, V. parahaemolyticus, L. monocytogenes, Y. enterocolitica, Salmonella spp., Shigella spp. Among these foodborne bacteria, B. cereus was amplified in Aronia melanocarpa in sample 4 and blueberry in sample 1, 2, 3, and 5. The result of quantitative analysis of B. cereus contamination showed 4.08 log CFU/g of Aronia melanocarpa in sample 4 and higher contamination rate 4.07 log CFU/g of blueberry in sample 3. These results suggest that strict food safety control in harvest and distribution of various berries is necessary to prevent foodborne disease and improve microbiological safety.
Jung, Jae Hwan;Cho, Min Kyung;Chung, So Yi;Seo, Tae Seok
한국진공학회:학술대회논문집
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한국진공학회 2013년도 제45회 하계 정기학술대회 초록집
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pp.276-276
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2013
Here we report an integrated microdevice consisting of an efficient passive mixer, a magnetic separation chamber, and a capillary electrophoretic microchannel in which DNA barcode assay, target pathogen separation, and barcode DNA capillary electrophoretic analysis were performed sequentially within 30 min for multiplex pathogen detection at the single-cell level. The intestine-shaped serpentine 3D micromixer provides a high mixing rate to generate magnetic particle-pathogenic bacteria-DNA barcode labelled AuNP complexes quantitatively. After magnetic separation and purification of those complexes, the barcode DNA strands were released and analyzed by the microfluidic capillary electrophoresis within 5 min. The size of the barcode DNA strand was controlled depending on the target bacteria (Staphylococcus aureus, Escherichia coli O157:H7, and Salmonella typhimurium), and the different elution time of the barcode DNA peak in the electropherogram allows us to recognize the target pathogen with ease in the monoplex as well as in the multiplex analysis. In addition, the quantity of the DNA barcode strand (~104) per AuNP is enough to be observed in the laser-induced confocal fluorescence detector, thereby making single-cell analysis possible. This novel integrated microdevice enables us to perform rapid, sensitive, and multiplex pathogen detection with sample-in-answer-out capability to be applied for biosafety testing, environmental screening, and clinical trials.
목 적:호흡기 감염의 증상이 없는 소아들을 대상으로 다중 역전사중합효소연쇄반응법(multiplex reverse transcription-polymerase chain reaction; mRT-PCR)을 이용하여 비인두 상주균의 이환율을 알아보고자 하였다. 방 법:2008년 7월 25일부터 28일까지 33명의 소아들을 대상으로 비강 면봉채취법으로 검체를 채취하였으며, 이들은 검체 채취 당시 심각한 호흡기 감염의 증상이 없었다. 모아진 검체에서 DNA를 추출한 후 multiplex primer set ($Seeplex^{(R)}$ PneumoBacter ACE Detection, Seegene, Seoul, Korea)로 PCR을 진행하였다. 증폭된 반응산물은 2% agarose gel과 전기 영동 자동화 시스템인 screen tape system (Lab901, Scottland, UK)에 각각 전기 영동하여 확인하였다. 결 과:전체 33명의 소아 중 남아는 15명 여아는 18명이었으며, 나이는 3.2세에서 16.3세로 중앙값은 8.2세였다. mRT-PCR 결과 30명(90.9%)의 소아들에서 양성을 보였으며(S. pneumoniae, H. influenzae, C. pneumoniae, B. pertussis), 이들 중 13명(39.4%)에서 2가지 이상의 균이 검출되었다. 균의 종류로는 12명(36.4%)에서는 S. pneumoniae와 H. influenzae, 1명(3.0%)에서는 S. pneumoniae, H. influenzae와 C. pneumoniae이 검출되었다.. 결 론:mRT-PCR은 비인두 상주균의 동정에 있어서 민감도가 높은 방법으로 생각된다. 하지만 비인두 상주균에 대한 PCR 결과가 소아들의 임상 양상과 어느 정도 일치할지에 대해서는 더 많은 연구가 필요할 것으로 생각된다.
사람의 장내세균으로부터 분리된 Bibidobacterium과 Lactobacillus는 대두 및 당근의 물추출물을 이용할 경우 균의 성장과 더불어 배지의 pH는 상대적으로 저하시켰으며, 대두와 당근의 물 추출물은 사람의 장내 세균총 중에서 유산균증식작용이 있었으며, 이와 함께 배지의 pH는 상대적으로 감소하였다. 검체 식품함유 GAM 배지에 사람의 신선한 분변을 이식하여 pH를 측정함으로써 간단하게 유산균증식작용 뿐만 아니라 건강식품을 조사할 수 있었다. 이 방법에 의해 조사한 결과 유산균 증식 효과인 pH를 저하시키는 식품은 대두, 순무, 당근, 영양부추, 마늘, 미나리, 쑥, 양파가 있었다.
Bacteria 군집 차이를 이용한 신속한 한국산 및 중국산 김치 원산지 판별 가능성의 검토를 위하여 Terminal Restriction Fragment Length Polymorphism (T-RFLP) 분석법을 적용하였다. T-RFLP 분석은 김치발효에 관여하는 주요 유산균의 빠르고, 재현성 있는 검출에는 효과적이었지만, 종(species) 수준에서의 미생물 확인에는 한계를 가지고 있어 한국산 및 중국산 김치에 특이적으로 존재하는 bacteria의 검출에는 부적합한 것으로 평가되었다. T-RFLP를 적용한 발효과정 중의 한국산 및 중국산 김치에 존재하는 bacteria 군집 천이 분석은 비슷한 양상으로 나타났고, Bacillus 속이 발효 후기까지 검출되었다. 또한 Bacillus 속은 발효 후기에 포자를 형성하는 것으로 확인되었다.
The purpose of this study was to investigate the high-level mupirocin resistance (HLMR) in Gram-positive bacteria isolated from companion animals. A total of 931 clinical specimens were collected from diseased pets. The detection of mupirocin-resistant bacteria and plasmid-mediated mupirocin resistance genes were evaluated by antimicrobial susceptibility tests, polymerase chain reactions, and sequencing analysis. Four-hundred and six (43.6%) bacteria were isolated and 17 (4.2%), including 14 staphylococci and 3 Corynebacterium were high-level mupirocin-resistant (MICs, ≥ 1,024 ug/mL) harboring mupA. Six staphylococci of HLMR strains had plasmid-mediated mupA-IS257 flanking regions. The results show that HLMR bacteria could spread in veterinary medicine in the near future.
BACKGROUND: Microbes that govern a unique biochemical process of oxidizing ammonia into dinitrogen gas, such as anaerobic ammonium oxidation (anammox) have been reported to play a pivotal role in agricultural soils and in oceanic environments. However, limited information for anammox bacterial abundance and distribution in the terrestrial habitats has been known. METHODS AND RESULTS: Phylogenetic and next-generation sequencing analyses of bacterial 16S rRNA gene were performed to examine potential anammox bacteria in paddy soils. Through clone libraries constructed by using the anammox bacteria-specific primers, some clones showed sequence similarities with Planctomycetes (87% to 99%) and anammox bacteria (94% to 95%). Microbial community analysis for the paddy soils by using Illumina Miseq sequencing of 16S rRNA gene at phylum level was dominated by unclassified Bacteria at 33.2 ± 7.6%, followed by Chloroflexi at 20.4 ± 2.0% and Acidobacteria at 17.0 ± 6.5%. Planctomycetes that anammox bacteria are belonged to was 1.5% (± 0.3) on average from the two paddy soils. CONCLUSION: We suggest evidence of anammox bacteria in the paddy soil. In addition to the relatively well-known microbial processes for nitrogen-cycle, anammox can be a potential contributor on the cycle in terrestrial environments such as paddy soils.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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