It is commonly acknowledged that bone morphogenic protein (BMP-2) functions as a potential osteogenic inducer in bone formation. Recently, several papers reported that bone marrow-derived stem cell (BMSC) from human is not responsive to BMP-2 in comparison to high capacity of BMP-2 in the osteoinduction of stromal cell derived from bone marrow of rodent animals such as rat or mouse. In this study, we characterized BMSC derived from 11 years old donor for the responsiveness to rhBMP-2, dexamethasone (Dex) and 1,25-dihydroxyvitamin D (vitamin D), in order to analyze their function in the early osteogenesis. The effect of over mentioned agents was evaluated by means of assessing alkaline phosphatase (ALP) activity/staining, RT-PCR analysis and von Kossa staining. In addition, we analyzed the meaning of expressed several osteoblastic markers such as alkaline phosphatase, collagen typeI, osteopontin, bone sialoprotein and osteocalcin with relation to either differentiation or mineralization. Only in the presence of Dex, human BMSC could commit osteoblastic differentiation and matrix mineralization, and either BMP-2 or vitamin D treatment was not able to induce. But BMP-2 or Vitamin D showed potential synergy effect with Dex. ALP and bone sialoprotein were clearly expressed in response of Dex treatment compared to weak expression of osteopontin in early osteogenesis. Therefore, we expect that this study will contribute partly to elucidiating early osteogenesis mechanism in human, but variations among bone marrow donors must be considered through further study.
이 연구의 목적은 과잉치 치수 유래 줄기세포의 계대 배양 속도에 대한 상아모세포 연관 유전자의 발현을 비교하는 것이다. 줄기세포는 다른 여러 형태의 세포로 분화할 수 있는 미 분화된 세포이다. 이는 환경이나 특정 자극에 의해 세포 분열이 일어나며 근육이나 골 같은 특정 장기의 조직으로 분화할 수 있다. 20명의 어린이에서 발거한 과잉치에서 과잉치 치수 유래 줄기세포가 얻어졌다. 10계대까지 배양하는 동안 가장 빠른 속도로 계대 배양된 세포와 가장 느린 속도로 계대 배양된 세포 각 3계대와 10계대 세포를 얻어 실험을 진행하였다. 각 세포는 분화제를 처리한 군과 처리하지 않은 군으로 나누었다. 이 실험에서 발현도를 살펴본 유전자는 Osteonectin (ONT), Osteocalcin (OCN), Alkaline Phosphatase (ALP), Dentin matrix acidic phosphoprotein 1 (DMP-1), Dentin sialophosphoprotein (DSPP)이다. 분화가 된 세포가 전반적으로 더 높은 유전자 발현도를 보였으며, 미분화 세포는 10계대에서, 분화된 세포는 3계대에서 더 높은 유전자 발현도를 보였다. 빠른 계대 배양 속도를 보인 세포가 OCN과 DSPP를 제외하고 상대적으로 더 낮은 유전자 발현도를 보였다.
Patients with pediatric cancer often undergo multiple therapies, such as chemotherapy, radiation therapy, and stem cell transplantation. These treatments, while essential, can result in dental developmental issues, including hypodontia, microdontia, short roots, and delayed dental development. This report presents two cases of pediatric patients diagnosed with neuroblastoma who exhibited severe tooth mobility due to short roots as a complication of cancer treatment. Moreover, we investigated the conservative management of the patients' conditions using resin wire splints and orthodontic miniscrews for skeletal anchorage along with long-term follow-ups to evaluate their prognosis.
Leong, Dephne Jack Xin;Setzer, Frank C.;Trope, Martin;Karabucak, Bekir
Restorative Dentistry and Endodontics
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제41권2호
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pp.98-105
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2016
Objectives: The biocompatibility of two experimental scaffolds for potential use in revascularization or pulp regeneration was evaluated. Materials and Methods: One resilient lyophilized collagen scaffold (COLL), releasing metronidazole and clindamycin, was compared to an experimental injectable poly(lactic-co-glycolic) acid scaffold (PLGA), releasing clindamycin. Human dental pulp stem cells (hDPSCs) were seeded at densities of $1.0{\times}10^4$, $2.5{\times}10^4$, and $5.0{\times}10^4$. The cells were investigated by light microscopy (cell morphology), MTT assay (cell proliferation) and a cytokine (IL-8) ELISA test (biocompatibility). Results: Under microscope, the morphology of cells coincubated for 7 days with the scaffolds appeared healthy with COLL. Cells in contact with PLGA showed signs of degeneration and apoptosis. MTT assay showed that at $5.0{\times}10^4$ hDPSCs, COLL demonstrated significantly higher cell proliferation rates than cells in media only (control, p < 0.01) or cells co-incubated with PLGA (p < 0.01). In ELISA test, no significant differences were observed between cells with media only and COLL at 1, 3, and 6 days. Cells incubated with PLGA expressed significantly higher IL-8 than the control at all time points (p < 0.01) and compared to COLL after 1 and 3 days (p < 0.01). Conclusions: The COLL showed superior biocompatibility and thus may be suitable for endodontic regeneration purposes.
Lim, Kitaek;Park, Soo Hyun;Kim, Jangho;SeonWoo, Hoon;Choung, Pill-Hoon;Chung, Jong Hoon
Journal of Biosystems Engineering
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제38권1호
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pp.55-63
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2013
Purpose: The present study aimed at image processing methods for automatic cell pattern recognition and morphological analysis for tissue engineering applications. The primary aim was to ascertain the novel algorithm of adaptive brightness correction from microscopic images for use as a potential image analysis. Methods: General microscopic image of cells has a minor problem which the central area is brighter than edge-area because of the light source. This may affect serious problems to threshold process for cell-number counting or cell pattern recognition. In order to compensate the problem, we processed to find the central point of brightness and give less weight-value as the distance to centroid. Results: The results presented that microscopic images through the brightness correction were performed clearer than those without brightness compensation. And the classification of mixed cells was performed as well, which is expected to be completed with pattern recognition later. Beside each detection ratio of hBMSCs and HeLa cells was 95% and 92%, respectively. Conclusions: Using this novel algorithm of adaptive brightness correction could control the easier approach to cell pattern recognition and counting cell numbers.
Mesenchymal stem cells (MSCs) are effective in treating autoimmune diseases and managing various conditions, such as engraftment of allogeneic islets. Additionally, autologous and HLA-matched allogeneic MSCs can aid in the engraftment of human allogeneic kidneys with or without low doses of tacrolimus, respectively. However, HLA alloantigens are problematic because cell therapy uses more HLA-mismatched allogeneic cells than autologous for convenience and standardization. In particular, HLA-mismatched MSCs showed increased Ag-specific T/B cells and reduced viability faster than HLA-matched MSCs. In CRISPR/Cas9-based cell therapy, Cas9 induce T cell activation in the recipient's immune system. Interestingly, despite their immunogenicity being limited to the cells with foreign Ags, the accumulation of HLA alloantigen-sensitized T/B cells may lead to allograft rejection, suggesting that alloantigens may have a greater scope of adverse effects than foreign Ags. To avoid alloantigen recognition, the β2-microglobulin knockout (B2MKO) system, eliminating class-I MHC, was able to avoid rejection by alloreactive CD8 T cells compared to controls. Moreover, universal donor cells in which both B2M and Class II MHC transactivator (CIITA) were knocked out was more effective in avoiding immune rejection than single KO. However, B2MKO and CIITA KO system remain to be controlled and validated for adverse effects such as the development of tumorigenicity due to deficient Ag recognition by CD8 T and CD4 T cells, respectively. Overall, better HLA-matching or depletion of HLA alloantigens prior to cell therapy can reduce repetitive transplantation through the long-term survival of allogeneic cell therapy, which may be especially important for patients seeking allogeneic transplantation.
Jihyun Lee;Hyung-Jun Choi;Jaeho Lee;Je Seon Song;Chung-Min Kang
대한소아치과학회지
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제50권4호
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pp.421-433
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2023
This study was to examine the developmental dental abnormalities in childhood cancer survivors. Risk factors were assessed for 125 children with radiographic data through a retrospective analysis of medical records and panoramic images. 68.0% of childhood cancer survivors exhibited at least one dental abnormality. The types of abnormalities varied depending on the age at cancer diagnosis and treatment intensity, ranging from microdontia (43.2%), to abnormal root development (39.2%) and tooth agenesis (33.6%). Logistic regression analysis demonstrated that a young age at diagnosis (under 3 years), the use of heavy metal agents, a history of hematopoietic stem cell transplantation (HSCT), and combination treatment of chemotherapy, radiation therapy, and HSCT were associated with a significantly higher risk for overall dental abnormalities. The increased risk ratios were 6.00, 3.06, 3.22, and 7.87, respectively (p < 0.05). The results of this study will predict dental abnormality in permanent dentition according to the diagnosis age and treatment method of childhood cancer.
Ameloblastoma is the most representative epithelial odontogenic tumor in the craniofacial region. Through several studies on Ameloblastoma that have been conducted so far, we have been able to get closer to the reality of Ameloblastoma. However, groundbreaking insight into the pathophysiology of Ameloblastoma has not yet been provided. This review assessed three aspects of five recently published papers on Ameloblastoma: cancer stem cells, calcium signaling, and tumor microenvironment, and compared them with previous studies on tumor physiology, including cancer. In addition, the characteristics of Ameloblastoma revealed by the experimental methods presented in the currently published five papers provide the possibility of Ameloblastoma as a study model in general tumor or cancer studies. Furthermore, the mechanisms of action of the chemicals identified in the studies support their potential as candidates for the second-line treatment of Ameloblastoma.
Journal of the Korean Association of Oral and Maxillofacial Surgeons
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제47권6호
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pp.454-464
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2021
Objectives: This study aimed to investigate the in vitro osteoinductivity of the combination of bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) and nanohydroxyapatite (nHAp) and the in vivo effects of implants coated with nHAp/BMP-2. Materials and Methods: To evaluate the in vitro efficacy of nHAp/BMP-2 on bone formation, bone marrow-derived mesenchymal stem cells (BM-MSCs) were seeded onto titanium disks coated with collagen (Col), Col/nHAp, or Col/nHAp/BMP-2. Protein levels were determined by a biochemical assay and reverse transcriptase-polymerase chain reaction. Stem cell differentiation was analyzed by flow cytometry. For in vivo studies with mice, Col, Col/nHAp, and Col/nHAp/BMP-2 were injected in subcutaneous pockets. Titanium implants or implants coated with Col/nHAp/BMP-2 were placed bilaterally on rabbit tibias and evaluated for 4 weeks. Results: In the in vitro study, BM-MSCs on Col/nHAp/BMP-2 showed reduced levels of CD73, CD90, and CD105 and increased levels of glycosaminoglycan, osteopontin, and alkaline phosphatase activity. After 4 weeks, the Col/nHAp/BMP-2 implant showed greater bone formation than the control (P=0.07), while no differences were observed in bone implant contact and removal torque. Conclusion: These results suggest that a combination of BMP-2 and an nHAp carrier would activate osseointegration on dental implant surfaces.
p63은 다양한 상피 조직의 줄기세포와 전구세포에 존재한다는 사실이 잘 알려져 있으나, 치아 형성, 특히 사기질과 뿌리 형성시기에서의 p63 위치느 ㄴ아직 연구해야 할 과제로 남아 있다. 본 연구에서는 p63이 치아 발생 동안 치아상피에 편재하여 나타나는 것을 면역조직화학 기법을 이용하여 확인하였다. p63은 피부, 모낭, 구강점막 그리고 턱밑샘 도관을 포함하는 상피의 바닥층과 바닥위층에 위치하였다. 그러나 치아 부위에서는 치아관의 모든 세포, 사기질기관, 헤르트비히 뿌리상피집 그리고 말라세쯔 상피잔사에 p63이 관찰되었다. 이 결과는 치아 발생 중 p63이 줄기세포 유지 외에도 다른 기능을 한다는 사실을 보여준다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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