Kim, Dong-Bum;Kwon, Sang-Hoon;Ahn, Chi-Seok;Lee, Young-Hee;Choi, Soo-Young;Park, Jin-Seu;Kwon, Hyeok-Yil;Kwon, Hyung-Joo
BMB Reports
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제44권11호
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pp.758-763
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2011
Immunostimulatory CpG-DNA targeting TLR9 is one of the most extensively evaluated vaccine adjuvants. Previously, we found that a particular form of natural phosphodiester bond CpG-DNA (PO-ODN) encapsulated in a phosphatidyl-${\beta}$-oleoyl-${\gamma}$-palmitoyl ethanolamine (DOPE) : cholesterol hemisuccinate (CHEMS) (1 : 1 ratio) complex (Lipoplex(O)) is a potent adjuvant. Complexes containing peptide and Lipoplex(O) are extremely useful for B cell epitope screening and antibody production without carriers. Here, we showed that IL-12 production was increased in bone marrow derived dendritic cells in a CpG sequence-dependent manner when PO-ODN was encapsulated in Lipoplex(O), DOTAP or lipofectamine. However, the effects of Lipoplex(O) surpassed those of PO-ODN encapsulated in DOTAP or lipofectamine and also other various forms of liposome-encapsulated CpG-DNA in terms of potency for protein antigen-specific IgG production and Th1- associated IgG2a production. Therefore, Lipoplex(O) may have a unique potent immunoadjuvant activity which can be useful for various applications involving protein antigens as well as peptides.
Epilepsy is a chronic neurological disease characterized by spontaneous recurrent seizures and caused by various factors and mechanisms. Malfunction of the olfactory bulb is frequently observed in patients with epilepsy. However, the morphological changes in the olfactory bulb during epilepsy-induced neuropathology have not been elucidated. Therefore, in the present study, we investigated the expression of parvalbumin (PV), one of the calcium-binding proteins, and morphological changes in the rat main olfactory bulb (MOB) following pilo-carpine-induced status epilepticus (SE). Pilocarpine-induced SE resulted in neuronal degeneration in the external plexiform layer (EPL) and glomerular layer (GL) of the MOB. PV immunoreactivity was observed in the neuronal somas and processes in the EPL and GL of the control group. However, six hours after pilocarpine administration, PV expression was remarkably decreased in the neuronal processes compared to the somas and the average number of PV-positive interneurons was significantly decreased. Three months after pilocarpine treatment, the number of PV-positive interneurons was also significantly decreased compared to the 6 hour group in both layers. In addition, the number of NeuN-positive neurons was also significantly decreased in the EPL and GL following pilocarpine treatment. In double immunofluorescence staining for PV and MAP2, the immunoreactivity for MAP2 around the PV-positive neurons was significantly decreased three months after pilocarpine treatment. Therefore, the present findings suggest that decreases in PV-positive GABAergic interneurons and dendritic density in the MOB induced impaired calcium buffering and reciprocal synaptic transmission. Thus, these alterations may be considered key factors aggravating olfactory function in patients with epilepsy.
Porous Ti-systems with unidirectionally aligned channels were synthesized by freeze-drying and a heat treatment process. $TiH_2$ powder and camphene were used as the source materials of Ti and sublimable vehicles, respectively. Camphene slurries with $TiH_2$ content of 10 and 15 vol% were prepared by milling at $50^{\circ}C$ with a small amount of oligomeric polyester dispersant. Freezing of the slurry was done in a Teflon cylinder attached to a copper bottom plate cooled at $-25^{\circ}C$ while unidirectionally controlling the growth direction of the camphene. Pores were generated subsequently by sublimation of the camphene during drying in air for 48 h. The green body was heat-treated at $1100^{\circ}C$ for 1 h in a nitrogen and air atmosphere. XRD analysis revealed that the samples composed of TiN and $TiO_2$ phase were dependent on the heat-treatment atmosphere. The sintered samples showed large pores of about 120 mm which were aligned parallel to the camphene growth direction. The internal wall of the large pores had relatively small pores with a dendritic structure due to the growth of camphene dendrite depending on the degree of nucleation and powder rearrangement in the slurry. These results suggest that a porous body with an appropriate microstructure can be successfully fabricated by freeze-drying and a controlled sintering process of a camphene/$TiH_2$ slurry.
Morphological evolution and growth mechanism at the solid/liquid interface during solidification were investigated in the Ni-base superalloy GTD111M by directional soldification and quenching(DSQ) technique. The experiments were conducted by changing solidification rate(V) and thermal gradient(G) which are major solidification process variables. High thermal gradient condition could be obtained by increasing the furnace temperature and closely attaching the heating and cooling zones in the Bridgeman type furnace. The dendritic/equiaxed transition was found in the G/V value lower than $0.05$\times$10{^3}^{\circ}C$s/$\textrm{mm}^2$, and the planar interface of the MC-${\gamma}$ eutectic was found under $17 $\times$ 10{^3}^{\circ}C$ s/$\textrm{mm}^2$. It was confirmed that the dendrite spacing depended on the cooling rate(GV), and the primary spacing was affected by the thermal gradient more than solidification rate. The dendrite lengths were decreased as increasing the thermal graditne, and the dendrite tip temperature was close to the liquidus temperature at $50 \mu\textrm{m}$/s.
The effects of Fe and Si additions on the microstructures and mechanical properties of aluminum bronze have been investigated. In a bar-type specimen cast in a die mold, the addition of Fe promoted the dendritic solidification of the ${\alpha}$ phase. The hardness values increased slightly in the Fe-added specimen with heat treatment, while these values was increased significantly in the specimens with Si or with combined additions of Fe and Si. When a centrifugal casting bush with combined addition of Fe and Si was heat treated, the FeSi compound within the matrix was finely dispersed, and was observed to be the origin of cup-cone type conical dimple failure in the tensile fracture surface. The mechanical properties of the heat treated centrifugal casting bushes, whose nominal alloy compositions were (Cu-7.0Al-0.8Fe-3.0Si)wt%, exhibited tensile strength of $703-781N/mm^2$, elongation of 6.6-11.7% and hardness of Hv 222.6-249.2. These high values of strength and elongation were attributed to the strengthening of the matrix due to the combined addition of Fe and Si, and to precipitation of fine the FeSi compound.
An unusual long-period and heavy snowfall occurred in the Yeongdong region from 6 to 14 February 2014. This event produced snowfall total of 194.8 cm and the recordbreaking 9-day snowfall duration in the 103-year local record at Gangneung. In this study, satellite-derived cloud-top brightness temperatures from the infrared channel in the atmospheric window ($10{\mu}m{\sim}11{\mu}m$) are examined to find out the characteristics of clouds related with this heavy snowfall event. The analysis results reveal that a majority of precipitation is related with the low-level stratiform clouds whose cloud-top brightness temperatures are distributed from -15 to $-20^{\circ}C$ and their standard deviations over the analysis domain (${\sim}1,000km^2$, 37 satellite pixels) are less than $2^{\circ}C$. It is also found that in the above temperature range precipitation intensity tends to increase with colder temperature. When the temperatures are warmer than $-15^{\circ}C$, there is no precipitation or light precipitation. Furthermore this relation is confirmed from the examination of some other heavy snowfall events and light precipitation events which are related with the low-level stratiform clouds. This precipitation-brightness temperature relation may be explained by the combined effect of ice crystal growth processes: the maximum in dendritic ice-crystal growth occurs at about $-15^{\circ}C$ and the activation of ice nuclei begins below temperatures from approximately -7 to $-16^{\circ}C$, depending on the composition of the ice nuclei.
The downregulation of A-type $K^+$ channels ($I_A$ channels) accompanying enhanced somatic excitability can mediate epileptogenic conditions in mammalian central nervous system. As $I_A$ channels are dominantly targeted by dendritic and postsynaptic processings during synaptic plasticity, it is presumable that they may act as cellular linkers between synaptic responses and somatic processings under various excitable conditions. In the present study, we electrophysiologically tested if the downregulation of somatic $I_A$ channels was sensitive to synaptic activities in young hippocampal neurons. In primarily cultured hippocampal neurons (DIV 6~9), the peak of $I_A$ recorded by a whole-cell patch was significantly reduced by high KCl or exogenous glutamate treatment to enhance synaptic activities. However, the pretreatment of MK801 to block synaptic NMDA receptors abolished the glutamate-induced reduction of the $I_A$ peak, indicating the necessity of synaptic activation for the reduction of somatic $I_A$. This was again confirmed by glycine treatment, showing a significant reduction of the somatic $I_A$ peak. Additionally, the gating property of $I_A$ channels was also sensitive to the activation of synaptic NMDA receptors, showing the hyperpolarizing shift in inactivation kinetics. These results suggest that synaptic LTP possibly potentiates somatic excitability via downregulating $I_A$ channels in expression and gating kinetics. The consequential changes of somatic excitability following the activity-dependent modulation of synaptic responses may be a series of processings for neuronal functions to determine outputs in memory mechanisms or pathogenic conditions.
Kang, Hee Won;Kim, Ho Kyu;Moon, Bae Hun;Lee, Seo Jun;Lee, Se Jung;Rhyu, Im Joo
Applied Microscopy
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제47권2호
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pp.63-69
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2017
Golgi staining has been modified and developed since Camillo Golgi introduced the black reaction in 1873. This study focuses on the commonly used Golgi staining methods and presents comprehensive data regarding three Golgi staining methods along with their strong and weak points. The Golgi-Cox method uses mercuric chloride for brain tissue impregnation and is a reliable technique for analyzing the complete dendritic tree of cortical neurons. However, specimens tend to shrink during the staining steps. Recent combination of the Golgi-Cox method and immunofluorescence provides additional options for neuroscientists. Rapid Golgi staining requires osmium tetroxide for the post-fixation process. It homogenously stains whole structures of neurons and provides their detailed anatomical morphology. This staining is influenced by the age of the specimen, temperature of the laboratory, and duration of each procedure. The Golgi-Kopsch method uses formaldehyde and glutaraldehyde instead of osmium tetroxide and can be used regardless of the age of the specimen and the duration after fixation. This method is suitable for research using human brain fixed for a long time or for specimens obtained from old-aged animals. Selecting a Golgi staining protocol that is appropriate for the specimen type and research purpose is important to achieve best results.
During the course of evolution, animals encountered the harmful effects of fungi, which are strong pathogens. Therefore, they have developed powerful mechanisms to protect themselves against these fungal invaders. ${\beta}$-Glucans are glucose polymers of a linear ${\beta}$(1,3)-glucan backbone with ${\beta}$(1,6)-linked side chains. The immunostimulatory and antitumor activities of ${\beta}$-glucans have been reported; however, their mechanisms have only begun to be elucidated. Fungal and particulate ${\beta}$-glucans, despite their large size, can be taken up by the M cells of Peyer's patches, and interact with macrophages or dendritic cells (DCs) and activate systemic immune responses to overcome the fungal infection. The sampled ${\beta}$-glucans function as pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) and are recognized by pattern recognition receptors (PRRs) on innate immune cells. Dectin-1 receptor systems have been incorporated as the PRRs of ${\beta}$-glucans in the innate immune cells of higher animal systems, which function on the front line against fungal infection, and have been exploited in cancer treatments to enhance systemic immune function. Dectin-1 on macrophages and DCs performs dual functions: internalization of ${\beta}$-glucan-containing particles and transmittance of its signals into the nucleus. This review will depict in detail how the physicochemical nature of ${\beta}$-glucan contributes to its immunostimulating effect in hosts and the potential uses of ${\beta}$-glucan by elucidating the dectin-1 signal transduction pathway. The elucidation of ${\beta}$-glucan and its signaling pathway will undoubtedly open a new research area on its potential therapeutic applications, including as immunostimulants for antifungal and anti-cancer regimens.
Scutellariae baicalensis GEORGt Acorus gramineus SOLAND and Gastrodia elata BLUME are traditional medicines used in the treatment of incipient stoke. In this study we investigated their effects on various aspects of neuronal differentiation in single or composite forms. Water-extracts of these medicines showed neuroprotective effects on cultured rat cortical neurons in normoxia and hypoxia. To understand the mechanism for neuroprotection we carried out various cell biological assays. They stimulated initial differentiation of neuronal development (transition from stage 1 to 2), and increased the number of spines and the length and number of dendritic processes. These effects were best manifested in the experimental group, which were given a mixture of the three kinds of extracts (p<0.01). To assess improvement of brain functions we carried out Morris water-maze tests for the mice that were fed on these extracts instead of water for 4 weeks. The experimental groups, especially those which were given the mixture of the three kinds of extract, showed significant (p<0.01) enhancement in memory as early as one day after the learning trial. These results indicate that these three kinds of extracts have synergistic effects on neuronal protection and improvement of brain functions.
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