제 1형 과민반응은 비만세포에 의해 매개되는 알러지 반응으로서, 예기치 못한 알러젠에 의해 비만세포가 활성화 되어 탈 과립 되면서 히스타민등과 같은 여러 가지 매개체들을 분비하면서 과도하게 면역반응을 유도하게 된다. 주박(Korean rice wine lees)은 청주, 약주 등의 술을 걸러내는 과정에서 생기는 양조 부산물로서, 최근들어 청주를 걸러내는 과정에서 생기는 술 지게미의 생리기능에 대한 연구가 활발하게 진행되고 있다. 본 연구에서는 주박의 ethyl acetate (EA) 추출물을 이용하여 비만세포에서의 탈과립 억제 효과를 측정하였다. 그 결과 주박 EA 추출물이 탈과립의 표지인 ${\beta}$-hexosaminidase의 양을 농도 의존적으로 억제하는 것을 관찰하였고, 이러한 탈과립억제 현상이 다양한 사이토카인 중 IL-3과 IL-13의 양을 감소시킴으로써 매개된다는 사실을 RT-PCR을 통해 확인하였다. 또한 쥐에서 passive cutaneous anaphylaxis (PCA)를 유도하여 EA를 경구투여 했을 때 anaphylactic 증상을 효과적으로 억제하는 것을 관찰하였다. 이러한 결과들은 주박 EA 추출물이 항 알러지 약물의 개발에 잠재적인 후보물질이 될 수 있음을 시사한다.
Sabaiksan has been prescribed to treat various allergic diseases in herbal medicine which were induced by various vasoactive amine released from the mast cells. The constituents of Sabaiksan are Mori Cortex Radices(MCR), Lycii Cortex Radicis(LCR) and Glycyrrhizae Radix(GR). Recently, simple models of compound 48/80 induced anaphylactic shock and cutaneous reaction in vivo were developed to test various agents employed in the field of allergy and toxicology research. The purpose of this study is to evaluate the effects of Sabaiksan on compound 48/80 induced anaphylactic stock, cutaneous reaction and mesenteric mast cell degranulation rate in ICR mice, and on compound 48/80 induced peritoneal mast cell degranulation and histamine release in vitro. Groups of ICR mice were intraperitoneally pretreated with $100{\mu}{\ell}$ of saline, $MCR(2g/m{\ell}),\;LCR(2g/m{\ell}),\;GR(g/m{\ell})$ or Sabaiksan itself(MCR+LCR+GR) at 24, 12 and 1 hour before compound 48/80 solution ($10{\mu}{\ell}/gm$ B. W) were peritoneally given into them, and then mortality within 72 hours after the compound 48/80 injection, and mesenteric mast cell degranulation rate at 15 minutes after compound 48/80 injection were calculated. In vitro experiment, $400{\mu}{\ell}$ of rat peritoneal mast cell suspension$(10^6cell/m{\ell})$ were pretreated with $50{\mu}{\ell}$ of saline, $MCR(2g/m{\ell}),\;LCR(2g/m{\ell}),\;GR(g/m{\ell})$ or Sabaiksan itself at room temperature for 30 minutes, and then $50{\mu}{\ell}$ of compound 48/80 solution $(100{\mu}g/m{\ell})$ were added into it. 30 minutes after the addition of compound 48/80 solution, histamine release assay in the supernatant of peritoneal mast cell suspension were performed employing radioisotope enzymatic assay and morphologic changes of mast cells in each regular time point were photographed. Compared with controls, compound 48/80 induced anaphylactic shock was significantly inhibited by MCR and GR pretreatment into the ICR mice. Significant inhibition of compound 48/80 induced cutaneous reaction, mesenteric mast cell degranulation rate in vivo and histamine release from the rat peritoneal mast cells in vitro was observed only in MCR pretreated group. From the above results, it is suggested that MCR component of Sabaiksan may playa key role to suppress mast cell function since it has been applied to various allergic diseases.
This paper dealt with the distribution of normal mast cells in the spleen, liver and lung on cattle, horses, pigs and dogs, and also degranulation of mast cells in the dogs infected with Rompun (2% Xylazine HCl). The results observed are summarized as follows. Normal mast cells were distributed in spleen, liver and lung on cattle, horse, pig and dog. Mast cells were observed in both red pulp and surroundings of white pulp of the spleen in horse, in the white pulp of the spleen in cattle, in the trabeculae of the spleen in pigs, and in white pulp and red pulp of the spleen in dogs, respectively. Mast cells were observed in the portal triad of the liver in cattle and horses, in both portal triad and interlobular connective tissues of the liver in pigs, and not only the portal triad but also walls of the sinusoids and the central veins in dogs. A large number of mast cells were observed in the interlobular septa and peribronchioles of lung on all the species in this experiment. The mast cells are more numerous in the lungs than other organs. Author considers that numbers of normal mast cells distributed in the tissue is related to the dosage of Rompun in animal. The degranulation of mast cells were observed in the subcutaneous tissues of dog intramuscularly injected with Rompun(0.5ml/times) for 4 or 5 times and subcutaneously injected with Rompun(0.3ml/times) for 4 times. In dog intradermally injected with 0.1ml of Rompun, mast cells were decreased in number at 30 minutes and markedly decreased in number at 2 hours, but more or less increased in number at 3 hours after injection. In addition, the granules of the mast cells were decreased in number at 30 minutes and marked degranulation of the mast cells were recognized at 2 hours after injections, but normal mast cells begun to appear in subcutaneous tissue with the lapse of time from 3 hours after injection. There was also observed local infiltration of neutrophils in subcutaneous tissues of dogs intradermally injected with 0.1ml of Rompun at 30 minutes. At 2 hours after injection, numerous neutrophils and a small number of eosinophils were observed in the site of injection. Conclusionally, Rompun was regarded as a factor which causes the degranulateon of mast cell and the authors considered that histamine released from the mast cells by Rompun might cause relaxation of skeletal muscle.
In order to know the influence of mast cells on the mammary tumor development, the growth of the mammary carcinoma, the numerical changes and the morphological findings of mast cells appeared in the tumor were microscopically observed in the rat treated with DMBA and each chemical of histamine, heparin, pyrilamine or cimetidine. The results observed were summarized as follows: The tumor induction time that represented the number of days elapsing between the 3rd DMBA administration until a first tumor became $10{\times}10mm$ in diameter was $42.5{\pm}4.7$ days, and the mean number of tumor mass per rat was $3.4{\pm}1.2$ in the DMBA-treated group. No significant difference was apparent in the tumor induction time of the histamine-treated group, heparin-treated group or pyrilamine-treated group compared with the control group, but in the cimetidine-treated group the tumor induction time was $61.8{\pm}10.6$ days (p<0.005). The mean number of tumors per rat was $2.1{\pm}0.9$ in the cimetidine-treated group in contrast to $3.4{\pm}1.3$ in the control group (p<0.005). Numerical changes of mast cells were observed according to the development of DMBA induced mammary tumors that were separated into three major classes of tumors. The numbers of mast cells in all the experimental group were inclined to increase significantly according to the mammary tumor development (p<0.005), and the histamine-treated group, heparin-treated group, or pyrilamine-treated group were nearly similar to the control group. But the mast cells in the each stage of tumor development were more numerous in the cimetidine-treated group than in the control group (p<0.005). There were not significant in the numerical changes of mast cells among the experimental groups on each stage of carcinomas separated by early stage, middle stage and late stage. In the morphological characteristics of mast cells, the degranulation was not detectable from the hyperplasia stages to the early stage of carcinoma, but its degranulation was observed at the middle stage of carcinoma. Most mast cells were nearly degranulated at the late stage of carcinoma. The histamine treated group, pyrilamine-treated group and cimetidine treated group did not differ from the control group in morphological changes of mast cells, but the degranulation was shown mild in the heparin-treated group. And the degranulation gave rise to the depletion of intercellular matrix via exocytosis all the experimental group. From above results, it is supposed that mast cells inhibit the tumor development and that the inhibition is not caused by a single-factor, but by a complex activities of mast cell mediators.
석곡의 줄기는 전통 동양의학에서 위를 보하고, 진액을 보충하며, 열을 내리는 것에 사용되어 왔다. 본 연구에서는 RBL-2H3 세포에서 비만세포 탈과립과 TNF-α, IL-4, histidine decarboxylase (HDC) 발현에 미치는 석곡 열수추출물(DME)의 효과를 조사하였다. DME는 PMA와 Calcium ionophore 병행처리(PMACI)에 의해 유도되는 β-hexosaminidase 분비와 TNF-α, IL-4, HDC 발현을 현저히 억제하였다. 또한 PMACI에 의해 유도되는 NF-κB, AP-1 활성과 p38 kinase, extracellular signal-regulated kinase 1/2 (ERK1/2)과 c-Jun N-terminal kinase (JNK)의 인산화가 DME 전처리에 의해 저해되었다. 이러한 결과들은DME가 비만세포 탈과립을 억제하고, MAPKs/NF-κB/AP-1 신호전달 경로를 통해 TNF-α, IL-4, HDC 발현을 억제한다는 것을 시사한다. 본 연구결과들로 보아 DME는 과민반응과 염증성 질환을 치료하는 약물로 개발될 가능성을 가지는 것으로 사료된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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