Peroxiredoxins (Prxs) are a superfamily of thiol-specific antioxidant proteins present in all organism and involved in the hydroperoxide detoxification of the cell. To determine the structural organization of yeast-Prx, electron microscopic analysis was performed. The average images of yeast-Prxs revealed three different structure, i.e. spherical-shaped structure, ring-shaped structure and irregularly-shaped small particles. In order to analyze the conformational change of yeast-Prx by reduction and oxidation, Prxs were subjected to DTT and $H_2O_2$. In presence of DTT, yeast-Prx showed a high tendency to form a decamer. However, they changed into dimeric or spherical structure in the oxidized state. Here we also show ionic interaction between dimeric subunits is primarily responsible for yeast-Prx oligomerization.
Effect of the north (N) or south pole (S) of a magnet and dithiothreitol (DTT) or heparin sodium (H) on the orientation of bull sperm were studied. Sperm were collected from four Japanese Black bulls of Okinawa Prefectural Livestock Experimental Station were treated with various concentrations of DTT or H during the first and sixth days and were then exposed them to N or S with a magnetic field of 3,000 Gauss for 24 hours. Experimental results showed that both N and S significantly increased the perpendicular oriented percentage of bull sperm in most treatments not treated or treated with DTT or H. Anisotropy of magnetic field of bull sperm was the main cause which induced them to orient perpendicular to the magnetic direction. The results of the experiment also showed that, in most cases, the two polarities had the same effect on the orientation of bull sperm. However, in some cases, N exerted a stronger effect on the perpendicular percentage of bull sperm than S, such as with the 20 mM DTT treatment at the first and sixth days and the 100 units H treatment at the sixth day. These cases showed that the perpendicular oriented percentage of bull sperm at N was significantly higher than that of S. It was only the 100 units heparin treatment at S both at the first and sixth days that upward perpendicular orientation was higher than that at N. This might be due to the fact that protamin-DNA structure of a small number of bull sperm nuclei slightly changed because of heparin action.
Objective : Facial nerve palsy is a common complication of treatment for vestibular schwannoma (VS), so preserving facial nerve function is important. The preoperative visualization of the course of facial nerve in relation to VS could help prevent injury to the nerve during the surgery. In this study, we evaluate the accuracy of diffusion tensor tractography (DTT) for preoperative identification of facial nerve. Methods : We prospectively collected data from 11 patients with VS, who underwent preoperative DTT for facial nerve. Imaging results were correlated with intraoperative findings. Postoperative DTT was performed at postoperative 3 month. Facial nerve function was clinically evaluated according to the House-Brackmann (HB) facial nerve grading system. Results : Facial nerve courses on preoperative tractography were entirely correlated with intraoperative findings in all patients. Facial nerve was located on the anterior of the tumor surface in 5 cases, on anteroinferior in 3 cases, on anterosuperior in 2 cases, and on posteroinferior in 1 case. In postoperative facial nerve tractography, preservation of facial nerve was confirmed in all patients. No patient had severe facial paralysis at postoperative one year. Conclusion : This study shows that DTT for preoperative identification of facial nerve in VS surgery could be a very accurate and useful radiological method and could help to improve facial nerve preservation.
Cellular redox state is known to be perturbed during ischemia and that $Ca^{2+}$ and $K^2$ channels have been shown to have functional thiol groups. In this study, the properties of thiol redox modulation of the ATP-sensitive $K^2$ ($K_{ATP}$) channel were examined in rabbit ventricular myocytes. Rabbit ventricular myocytes were isolated using a Langendorff column for coronary perfusion and collagenase. Single-channel currents were measured in excised membrane patch configuration of patch-clamp technique. The thiol oxidizing agent 5,5'-dithio-bis-(2-nitro-benzoic acid) (DTNB) inhibited the channel activity, and the inhibitory effect of DTNB was reversed by dithiothreitol (disulfide reducing agent; DTT). DTT itself did not have any effect on the channel activity. However, in the patches excised from the metabolically compromised cells, DTT increased the channel activity. DTT had no effect on the inhibitory action by ATP, showing that thiol oxidation was not involved in the blocking mechanism of ATP. There were no statistical difference in the single channel conductance for the oxidized and reduced states of the channel. Analysis of the open and closed time distributions showed that DTNB had no effect on open and closed time distributions shorter than 4 ms. On the other hand, DTNB decreased the life time of bursts and increased the interburst interval. N-ethylmaleimide (NEM), a substance that reacts with thiol groups of cystein residues in proteins, induced irreversible closure of the channel. The thiol oxidizing agents (DTNB, NEM) inhibited of the $K_{ATP}$ channel only, when added to the cytoplasmic side. The results suggested that metabolism-induced changes in the thiol redox can also modulate $K_{ATP}$ channel activity and that a modulatory site of thiol redox may be located on the cytoplasmic side of the $K_{ATP}$ channel in rabbit ventricular myocytes.
Purpose : The purpose of this study was to investigate the quantitative evaluation of the corticospinal tract (CST) at the multiple levels by using functional MRI (fMRI) co-registered to diffusion tensor tractography (DTT). Materials and Methods : Ten normal subjects without any history of neurological disorder participated in this study. fMRI was performed at 1.5 T MR scanner using hand grasp-release movement paradigm. DTT was performed by using DtiStudio on the basis of fiber assignment continuous tracking algorithm (FACT). The seed region of interest (ROI) was drawn in the area of maximum fMRI activation during the motor task of hand grasp-release movement on a 2-D fractional anisotropy (FA) color map, and the target ROI was drawn in the cortiocospinal portion of anterior lower pons. We have drawn five ROIs for the measurement of FA and apparent diffusion coefficient (ADC) along the corona radiata (CR) down to the medulla. Results : The contralateral primary sensorimotor cortex (SM1) was mainly found to be activated in all subjects. DTT showed that tracts originated from SM1 and ran to the medulla along the known pathway of the CST. In all subjects, FA values of the CST were higher at the level of the midbrain and posterior limb of internal capsule (PLIC) than the level of others. Conclusion : Our study showed that co-registered fMRI and DTT has elucidated the state of CST on 3-D and analyzed the quantitative values of FA and ADC at the multiple levels. We conclude that co-registered fMRI and DTT may be applied as a useful tool for clarifying and investigating the state of CST in the patients with brain injury.
Mercury vapor inhalation-induced acute respiratory failure(ARF) has been reported to be fatal. This study was designed to observe the possible mechanism of inhaled mercury vapor poisoning in the respiratory system. Sixty percent of rats(12/20) exposed to mercury vapor were dead within 72 hours of exposure whereas all the rats(20/20) exposed to mercury vapor combined with dithiothreitol(DTT) vapor survived. The histological observation showed that ARF was a direct cause of the death induced by mercury vapor inhalation, which was significantly circumvented by DTT vapor. Cyclic AMP mediated chloride secretion was inhibited by luminal side but not serosal side sulfhydryl blocking agents (Hf$^{2+}$$\rho$-chloromercuribenzoic acid or $\rho$-chloromercuriphenyl sulfonic acid) in a dose-dependent manner in a primary cultured rat airway monolayer. The inhibitory component of cAMP induced chloride secretion was completely restored by luminal side DTT(0.5mM). these results suggest that the oxidized form(Hg$^{2+}$) of mercury vapor(Hg0) contribute to ARF and subsequent death. The finding is important as it can provide important information regarding emergency manipulation of ARF patients suffering from by mercury vapor poisoning.ing.
We report on a patient who showed visual recovery following bilateral occipital lobe infarct, as evaluated by follow up functional magnetic resonance imaging (fMRI) and diffusion tensor tractography (DTT). A 56-year-old female patient exhibited severe visual impairment since onset of the cerebral infarct in the bilateral occipital lobes. The patient complained that she could not see anything, although the central part of the visual field remained dimly at 1 week after onset. However, her visual function has shown improvement with time. As a result, at 5 weeks after onset, she notified that her visual field and visual acuity had improved. fMRI and DTT were acquired at 1 week and 4 weeks after onset, using a 1.5-T Philips Gyroscan Intera. The fiber number of left optic radiation (OR) increased from 257 (1-week) to 353 (4-week), although the fiber numbers for right OR were similar. No activation in the occipital lobe was observed on 1-week fMRI. By contrast, activation of the visual cortex, including the bilateral primary visual cortex, was observed on 4-week fMRI. We demonstrated visual recovery in this patient in terms of the changes observed on DTT and fMRI. It appears that the recovery of the left OR was attributed more to resolution of local factors, such as peri-infarct edema, than brain plasticity.
Purpose: Diffusion tensor imaging (DTI) data must be analyzed by an analyzer after data processing. Hence, the analyzed data of DTI might depend on the analyzer, making it a major limitation. This paper reviewed previous DTI studies reporting the repeatability and reproducibility of data from the corticospinal tract (CST), one of the most actively researched neural tracts on this topic. Materials and Methods: Relevant studies published between January 1990 and December 2018 were identified by searching PubMed, Google Scholar, and MEDLINE electronic databases using the following keywords: DTI, diffusion tensor tractography, reliability, repeatability, reproducibility, and CST. As a result, 15 studies were selected. Results: Measurements of the CSTs using region of interest methods on 2-dimensional DTI images generally showed excellent repeatability and reproducibility of more than 0.8 but high variability (0.29 to 1.00) between studies. In contrast, measurements of the CST using the 3-dimensional DTT method not only revealed excellent repeatability and reproducibility of more than 0.9 but also low variability (repeatability, 0.88 to 1.00; reproducibility, 0.82 to 0.99) between studies. Conclusion: Both 2-dimensional DTI and 3-dimensional DTT methods appeared to be reliable for measuring the CST but the 3-dimensional DTT method appeared to be more reliable.
This study was done to find optimal cryopreservation medium and method to improve the post-thaw motility of human sperm. Thirty three semaen samples were included in the study. Of these, nineteen Samples showing normal semen profile were frozen using three cryprotectants (TYB, TYB+DTT and KS II)to compare post-thaw motility. Fourteen samples were frozen with vapor freezing and programmable freezing methods to compare post-thaw motility in correlation with freezing method. After 24 hrs of cryostorage , the vials were thawed and the post-thaw sperm motility was assessed by two kinds of computer-aededsperm analysis (CASA; SAIS and Hamilton Thorn). As a result, the post-thaw motility of the KS II group was higher than the TYB or TYB+DTT group in normal semen(34.8%, 28.3% and 23.0%, respectively). In the asthenospermia group, a significantly hither post-thaw motility was observed in the KS II (18.5%) compared to those of TYB or TYB+DTT group (13.6%, 10.0%, respectively). No difference was observed between vapor freezing group and computerized freezing group in normal semen (27.8%, 33.2%, respectively) and semen group showing asthenospermia (12.8%, 12.9%, respectively). In conclusion, our results indicate that KS II medium is reliable for cryopreservation of human sperm and vapor freezing and programmable freezing were equally effective in terms of the recovery of motile spermatozoa.
The objective of this study was to evaluate the development of porcine follicular oocytes fertilized by intracytoplasmic sperm injection (ICSI). Cumulus-oocyte-complexes (COCs) were collected by aspiration from follicles of 2~7 mm in diameter from a local slaughterhouse. Oocytes were matured in vitro for 40~44 h, and spermatozoa were prepared by swim-up in the presence or absence of 5 mM dithiothreitol (DTT) and then M II stages of the oocyte were either centrifuged or not centrifuged for the following injection of ooplasm. Injected oocytes were cultured in NCSU 23 medium for 6 to 8 days. The results obtained were as follows: 1. The rates of cleavage and development rates into blastocyst by ICSI were not significantly different between the with (53.0% and 19.7%) or without (48.3% and 23.8%) centrifugation, respectively (P<0.05). 2. The cleavage and developmental rates to blastocyst after ICSI with or without 5 mM DTT treated-sperm were not significantly different (60.4% vs 16.4% and 45.5% vs 22.2%), respectively (P<0.05). 3. The cleavage and the developmental rates to btastocyst were not significantly different between the zygotes obtained by IVF (51.8% vs. 22.4%) and ICSI (51.4% vs. 21.6%) (P<0.05). 4. The number of blastomere in blastocyst stages after IVF or ICSI was not significantly different (46.7$\pm$2.9 and 41.9$\pm$4.6).
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[게시일 2004년 10월 1일]
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