The present study quantitates the in vitro cytotoxicity of a variety of denture base acrylic resins using cell culture techniques combined with image analysis to measure nuclear area and DNA contents. In this study, a comparison was made among direct curing, heat curing and microwave curing resins. The results obtained from this study were as follows : 1. Morphologically, cell process and nucleus became prominent but macroscopic difference according to the resins were nit observed. In addition, increased cellular density around the specimen were observed. 2. In DNA contents measurements, $S-G_2M$ phase cell was 15.47%, 14.58% in control and heat curing resin on 1st day and the others group $21.39\sim33.36%$ were measured. 3. Nuclear area and DNA contents were increased on 3rd day except DNA content of the microwave curing resin group. These results suggest that denture base acrylic resins stimulate gingival fibroblasts in vitro, especially stimulation of direct curing resin is larger and longer than the others.
Antioxidant activity of Akebia quinata Decne was evaluated. Water extract (0.5 g/50 mL) of flowers and leaves of A. quinata were prepared and total phenol contents and radical scavenging activity of the extracts was determined for antioxidant activity. The total phenol contents of extracts from A. quinata flowers (FAQ) and leaves (LAQ) were $30.05{\mu}M\;and\;20.23{\mu}M$, while the radical scavenging activity of FAQ and LAQ were 60.51 % and 52.97%, respectively. In addition, the effect of FAQ and LAQ extract on DNA damage induced by $H_2O_2$ in human lymphocytes was evaluated by comet assay. The FAQ and LAQ showed strong inhibitory effect against DNA damage induced by $200{\mu}M$ of $H_2O_2$. These results suggest that water extracts of A. quinata Decne flowers and leaves showed significant (p<0.05) antioxidant activity and protective effect against oxidative DNA damage.
An 1.4 kb of the fad3 cDNA encoding microsomal linoleic acid desaturase catalyzing the conversion of linoleic acid (18:2, ${\omega}-6$) to linolenic acid (18:2, ${\omega}-3$) was introduced into tobacco plants by the Agrobacterium-mediated plant transformation, Among the transgenic tobacco plants conferring kanamycin resistance, five transformants showing increment in unsaturated fatty acid contents were selected and further analyzed for the transgenecity, In genomic Southern blot analyses, copy numbers of the integrated fad3 DNA in chromosomal DNA of the five transgenic tobacco plants were varied among the transgenic lines. By Northern blot analyses, the abundancy of the fad3 mRNA transcript directed by Cauliflower Mosaic Virus 35S promoter was consistent with the relative copy number of the fad3 DNA integrated in the chromosome of transgenic tobacco plants. When compared with the wild type, accumulation of linolenic acid in transgenic tobacco roots was elevated 3.7- to 4.7-fold showing a corresponding decrease in the linoleic acid contents; however, slight increments for linolenic acid were noticed in transgenic leaf tissues. These results indicated that the elevated level of fad3 expression is achieved in transgenic tobacco plants.
유전자 염기서열의 직접적인 변화 대신 염기의 수정 또는 변형을 통해 유전자 발현이 조절되는 후성유전은 크게 DNA 메틸화(methylation), 히스톤 변형(modification), ncRNA(non-coding RNA)에 의해 제어가 가능하다. 본 연구에서는 후성유전을 이해하기 위해 노화 관련 유전자를 대상으로 데이터베이스를 구축하고, DNA 메틸화를 중심으로 후성 유전학적 특성을 분석하였다. 유전자의 upstream 부위와 프로모터(promoter) 부위에 있는 CpG island(CGI)에 메틸화가 될 경우 유전자 발현을 억제하기 때문에 CGI를 중심으로 전체 유전자 그룹과 노화 관련 유전자 그룹간의 분포도를 비교 분석하였다. 또한 메틸화와 관련된 CGI로부터 얻은 메틸화 관련 motif 패턴을 이용하여 노화 유전자와의 관계를 분석하였다. 노화 관련 유전자의 CGI 분포는 전사인자 결합자리의 분포와 일치하였다. 본 연구에서 제공하는 DNA 메틸화 중심의 후성유전학적 정보는 노화 관련 유전자의 조절과 노화를 이해하는데 도움이 될 것으로 사료된다.
Some effects of dietary conditions on the metabolism of nucleic acid and protein in organs of the Albino Rats have been studied. The young rats to be examined were fed on the control diet and the diets deprived of one component among protein, carbohydrate, and lipid, such as protein free diet (PF: 432 kcal/100g) carbohydrate free diet (CF: 432kcal/100g), and lipid free diet (LF: 392kcal/100g) for three, seven, and fifteen days, respectively. The contents of DNA and RNA in the liver and the brain, and also those of protein-nitrogen(PN) and nonprotein-nitrogen (NPN) in the live, the brain, and the serum have been measured. The results are as followe: 1. The contents of DNA per gram of liver were increased by feeding on protein free diet. It is concluded that the critical factor for the result is not the increase in the rates of DNA syntheses, but the decrease in the turnover rates of DNA. 2. The metabolism of DNA in the liver showed the normal status by feeding on carbohydrate free diet. On the other hand, the rates of DNA syntheses were increased by feeding on lipid free diet. 3. The rates of DNA syntheses in the brain were decreased by feeding on the unbalanced diet, such as protein free, carbohydrete free, and lipid free diet. 4. In the liver and the brain, the rates of DNA syntheses were decreased by feeding on protein free diet. But the rates showed the normal status by feeding on the carbohydrate free diet, and also showed the similar metabolism to that in the case of the control group by feeding on lipid free diet. 5. In the liver, the rates of protein syntheses were decreased, whereas the contents of nonprotein-nitrogen were increased by feeding on protein free diet. 6. In the liver and the brain, the protein syntheses showed the more increasing rates than the rates in the case of the control diet by feeding on lipid free diet. 7. In the serum, the contents of protein did not change in a short period, also the insufficient feeling on protein was examined. It is clear that in the liver the rates of protein syntheses are decreased and the rates of protein catabolism are increased, since the rates of nucleic acid syntheses are decreased by feeding on the protein free diet. On the other hand, it is considered that in the brain the turnover rates of protein does not have correlation with the rates of nucleic acid syntheses, also these are decreased by feeding on protein free diet. And also it is believed that the phenomena of homeostasis for carrying the normal metabolism of nucleic acid and protein in the liver and the brain are operated in a short period as possible, by feeding on carbohydrate free and lipid free diets.
본 연구에서는 다양한 기능성을 가지는 복분자를 80% methanol로 추출한 후 분획물들을 제조하여 항산화 효과 및 인간 유래 위암세포인 AGS와 KatoIII을 이용하여 성장 저해 효과와 DNA손상을 측정하였다. 항산화 효과를 측정해 보기 위하여 총 폴리페놀 함량과 플라보노이드 함량, DPPH free radical의 소거활성을 측정하였는데, 먼저 폴리페놀의 경우 butanol fr., ethylacetate fr., water fr.순으로 나타났고 특히 butanol fr.의 경우 $546.25{\mu}g/mg$의 매우 높은 폴리페놀 함량을 확인 할 수 있었다. 플라보노이드의 함량 결과 ethylacetate fr., butanol fr., water fr.,순으로 나타났으며 ethylacetate fr.의 경우 $141.78{\mu}g/mg$의 높은 플라보노이드 함량을 확인할 수 있었다. DPPH free radical의 소거활성에서는 폴리페놀 함량의 순서와 같은 효과를 보였으며, 합성 항산화제인 BHA의 $RC_{50}$값 $3{\mu}g/ml$보다 water fr.을 제외하고 더 좋은 소거능을 확인 할 수 있었다. 인간 유래 위암세포주의 성장 저해 효과를 살펴본 결과 AGS와 KatoIII 세포주 모두 butanol fr.에서 가장 좋은 저해능을 나타내었고, butanol fr., ethylacetate fr., water fr. 순서로 저해효과를 나타내었다. DNA손상을 측정한 결과 역시 이와 같은 순으로 나타났으며, butanol fr.에서 1시간 이내에 약 50%정도의 손상유도 효과를 보였다. 이상의 결과에서 복분자 methanol추출물과 각각의 분획물은 항산화 효과 및 위암 세포주에 대한 성장 저해 활성 및 높은 DNA손상 유도 효과를 갖고 있음을 알 수 있었다.
동물플랑크톤 군집 연구에 DNA 바코딩과 같은 DNA 분석 기법의 적용은 분류형태학을 기반으로 하는 전통적인 종동정 시 발생할 수 있는 문제(e.g. 개체의 표현형 가소성에 의한 오동정, 유사종 및 자매종, 유생 시기의 종 동정의 어려움)를 보완할 수 있다. 최근 DNA 시퀀싱 기술의 발전으로 다양한 수생태계의 동물플랑크톤 군집은 물론, 육안 및 현미경을 통해 구분하는 데 한계가 있는 동물플랑크톤의 위 내용물에 대한 DNA 기반 군집 분석 또한 가능하게 되었으며, 이는 동물플랑크톤의 섭식 먹이원 분석을 통한 생물학적 상호작용을 이해를 돕는다. 본 논문은 동물플랑크톤 연구에 DNA 분석 기법이 활용된 사례(e.g. DNA 바코딩을 이용한 계통분류학적 연구, 메타바코딩을 이용한 군집 분석, 위 내용물 분석)를 소개하고 분석 방법을 요약하여, 최종적으로 향후 이를 활용하고자 하는 연구자들에게 연구 접근성을 높일 수 있도록 방법론적인 기초 지식을 제공하고자 하였다.
Yung Nok Lee (Dept. of Biology, Korea University) : Studies on the phosphate metabolism in Chlorella, with special reference to polyphosphate. Kor. J. Microbiol., Vol.2, No.1, p1-11 (1964). 1. Uniformly $^{32}P$-labeled Chlorella cells which were irradiated with Cobalt-60 gamma-rays of about 70, 000 $\gamma$ dose, were further grown in a standard "cold" medium ("hot".rarw."cold"), and some portions of the algae were taken out at the begining of, and at intervals during the culture, and subjected to analyze the contents of $^{32}P$- and total P in various fractions of the cell materials. Results obtained were compared with those of nonirradiated normal cells. 2. Amounts of phosphate in various fractions of the nonirradiated normal Chlorella cells were measured using uniformly $^{32}P$--labeled cells. Analysis of the $^{32}P$--labeled algal cells showed that the highest value in P-content was the fraction of RNA followed by those of lipid, polyphosphate "C" polyphosphate "B", DNA, nucleotidic labile phosphate compounds, polyphosphate "A" and protein. It was observed that content of total polyphosphates in a single Chlorella cell was almost equal to RNA-P content in the cell, and the amount of RNA-P was almost equal to ten times of DNA-P content. 3. When the $^{32}P$--labeled algae which were irradiated with gamma-rays were grown in a normal "cold" medium, phosphate contents in the fraction of DNA, nucleotidic labile phosphate compounds and protein decreased markedly, while the contents of phosphate in the fractions of polyphosphate "C" and potyphosphate "B" increased in comparison with those of unirradiated normal cells. So, it was considered that the pretreatment of above mentioned dose of gamma-ray inhibited DNA and protein synthesis from polyphosphate in Chlorella cells. 4. Proceeding the culture of $^{32}P$--labeled Chlorella in a "cold" standard medium, whose synthetic activity of DNA and protein from polyphosphate was disturded by gamma-ray irradiation, the amounts of $^{32}P$-in the fraction of polyphosphate "C" increased, in contrast with those of polyphosphate "B" fraction. According to these experimental results, it was inferred that polyphosphate "B" could transform into polyphosphate "C" in normal growing Chlorella cells.sults, it was inferred that polyphosphate "B" could transform into polyphosphate "C" in normal growing Chlorella cells.ing Chlorella cells.
Changes of plasma DNA contents and serum biochemical values were measured in rats administered with lead acetate to investigate the in vivo cytotoxic effects of lead and examine the usefulness of these in vivo cytotoxicity changes as indicators of lead exposure and diagnosis of lead poisoning. Rats were given once intraperitonealy with lead acetate (1.6, 8, 40 and 200 mg/kg b.w) and the changes of plasma DNA contents and serum biochemical values were measured at the time of 2, 4, 8, 24, 48 and 72 hours after the administration of lead acetate. Plasma DNA contents began to increase at 2 hours after the administration of lead acetate in the treatment groups of 8, 40 and 200 mg/kg b.w dose-dependently and significantly compared with control group. These DNA increases of each dosage group were continued until 24, 48 and 72 hours and the maximum levels of DNA (4.02, 10.67 and 14.10 times of control) were arrived at 8, 8 and 4 hours after the each treatment, respectively. Among 10 serum biochemical indicators, the activities of creatine kinase were increased to maximum level (6.55 times of control) at 2 hours after the administration and remained to be significantly higher than that of control by 8 hours in the treatment group of 200 mg, however, after 48 hours, the levels in the treatment groups of 40 mg above were lower than that of control. The values of aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase and lactate dehydrogenase were higher than that of control from 2 to 24 hours in the treatment group of 200 mg. Maximum levels of these enzymes were 3.34, 3.00 and 3.19 times of control, respectively. Both of alkaline phosphatase and triglyceride values in the treatment groups were decreased compared with control. In the case of alka-line phosphatse, the values were significanly decreased from 24 hours and more severely decreased until 72 hours in the treatment groups of 40 mg above (p<0.01). The minimum value was 0.36 times of control in the 200 mg group. The values of triglyceride were significantly decreased in the tratment groups of 40 mg above (p<0.01), but the values were not different significantly among the treatment groups. This study demonstrates that plasma DNA content and serum biochemical values such as aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase, lactate dehydrogenase, alkaline phosphatase and triglyceride are valuable as biomarkers for exposure assessment and diagnosis of lead poisoning.
암 관련 유전자를 후성유전학적으로 제어하는 방법에는 miRNA, DNA 메틸화, 그리고 히스톤 단백질의 변형에 의해서 가능하다. 그러나 후성유전학적 방법을 통해서 암 관련 유전자를 제어하기 위해서는 첫째, 한 유전자에 여러 miRNA들에 의해서 조절되기 때문에 선택의 문제가 있으며, 둘째, 암 관련 유전자를 제어하는 DNA 메틸화 패턴이 다양하며, 셋째, 히스톤 단백질의 변형 자체가 다양하며 각 유전자에 대한 히스톤 변형의 특이성이 있다. 따라서 후성유전학 기반 하에서 암 관련 유전자를 제어하기 위해서는 시스템 수준에서의 접근이 바람직하다. 본 연구에서는 암 관련 유전자의 네트워크를 구축하고, 이 네트워크를 기반으로 암 유전자를 제어하는 miRNA에 최우선 순위를 부여하는 방법, 암 유전자의 DNA 메틸화 모티프 패턴을 분석하는 방법, 히스톤 변형과 암 관련유전자의 상관관계를 분석하는 방법을 제시하고자 한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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