미생물 세포 바이오센서는 환경오염물질의 모니터링을 위한 좋은 분석도구가 될 수 있다. 이는 리포터유전자들(예로, lux, gfp or lacZ)을 방향족 화합물이나 중금속과 같은 오염물질에 반응하는 유도 조절유전자와 결합하여 만든다. 이러한 유전자 재조합기술을 이용하여 많은 종류의 미생물 바이오센서가 개발되었으며 환경, 의학, 식품, 농업, 및 방위등 다양한 분야에서 활용되고 있다. 또한 바이오센서의 민감도와 검출범위는 조절유전자의 변형을 통해 증가시킬 수있다. 최근에는 미생물 바이오센서 세포를 고효율 검색용 세포 에레이의 칩, 광섬유 등에 고착하여 활용하고 있다. 본 논문은 특이 오염물질의 검출을 위한 유전자 재조합으로 만든 미생물 세포 바이오센서의 현황과 미래에 대해 고찰한다.
In recent years, the importance of proteomic works, such as protein expression, detection and identification, has grown in the fields of proteomic and diagnostic research. This is because complete genome sequences of humans, and other organisms, progress as cellular processing and controlling are performed by proteins as well as DNA or RNA. However, conventional I protein analyses are time-consuming; therefore, high throughput protein analysis methods, which allow fast, direct and quantitative detection, are needed. These are so-called protein microarrays or protein chips, which have been developed to fulfill the need for high-throughput protein analyses. Although protein arrays are still in their infancy, technical development in immobilizing proteins in their native conformation on arrays, and the development of more sensitive detection methods, will facilitate the rapid deployment of protein arrays as high-throughput protein assay tools in proteomics and diagnostics. This review summarizes the basic technologies that are needed in the fabrication of protein arrays and their recent applications.
Korean mistletoe has a variety of biological effects, such as immunoadjuvant activities. This study investigates the effects of Korean mistletoe lectin (Viscum album L. var. coloratum agglutinin, VCA) on human T lymphocytes to determine whether VCA acts as an immunomodulator. Purified human T-lymphocytes were cultured with VCA and RNA from each point was analyzed using Affymetrix human genome chips containing 22,500 probe sets which represents more than 18,000 transcripts derived from 14,500 human genes. As a result, there was a striking upregulation of genes coding for chemokines. Seventeen genes out of 50 coding for proteins with chemokine activity were upregulated including CXCL9 and IL-8 which are related to the treatment of cancer. In addition, 28 cytokine genes were upregulated including IL-1, IL-6, IL-8, IFN-$\gamma$, and TNF-$\alpha$. Taken together, the data suggest that Korean mistletoe lectin, in parallel with European mistletoe, has an ability to modulate human T cell function.
Toxicology is under challenge from several new trends in science and technology, namely computer, the Internet, genome projects, genomic technologies, and combinatorial chemistry. These new trends will drastically change research style of toxicology. In addition to conventional uni cellular tests and animal tests using rodents, computer simulation, DNA chips (microarrays), in vivo tests using simple model organisms such as nematodesor flies become important routine screening tests. How to arrange these tests in tiers will become a new problem. Endocrine disruptors hypothesis is a good example for this kind of futuristic approach. Computer, particularly the Internet, is also enabling toxicologists and regulatory experts to collaborate more closely. The IPCS (International Program for Chemical Safety) which is ajoint project of WHO, ILO and UNEP, is a well-known international collaborative research for chemical risk assessments. The GINC project of IPCS is an effort to utilize the Internet for such collaborations. Some efforts were also made to establish regional collaboration network in East Asia under this project.
바이오센서의 구조와 기능 그리고 종류에 대해 소개하였다. 이 분야의 연구가 과거 15년간 각국에서 경쟁적으로 연 구하였으나 glucose sensor가 상품화되 었을 뿐 연구결과를 상 품화한 것은 극히 적은 수였다. 그러나 최근 몇 년간 특히 포켓용 i-STAT point-of-care system의 도입 그리고 surface plasmon resonance와 evanescent wave 측정 장치 의 출현으로 상품화된 바이오샌서의 수가 크게 증가하는 추세에 었다. 이들 중 의료임상과 생물공정 그리고 환경오염 측정용으로 응 용되고 있는 몇 가지 상품에 대하여 약술하였다.
유전자 칩의 정확성은 각 유전자들의 식별자로 활용되는 probe들에 의해 결정된다. 칩에 삽입되는 probe들은 반응오류를 피하기 위해 이중구조, 녹는점, 그리고 CG구조와 같은 요소들을 고려한다. 또한 다른 유전자들과의 교차반응을 최소화하기 위해 specificity를 고려한다. probe의 specificity 검증은 전체 유전자들에 대해 탐색해야 하므로 대규모 염색체에 대해서는 많은 계산이 요구된다. 본 논문에서는 specificity 검증을 위한 효율적인 알고리즘을 제시한다. 제시한 알고리즘은 해시테이블을 활용하여 probe가 specificity를 만족하지 못하게 하는 유전자 시퀀스들만을 탐색하여 비교한다. 제시한 알고리즘이 기존 알고리즘보다 효율적임을 실험결과를 통해 보인다.
Kim, Joo-Hwan;Koo, Ye-Mo;Lee, Woo-Sun;Suh, Soo-Kyung;Kang, Jin-Seok;Han, Eui-Sik;Kim, Seung-Hee;Park, Sue-N.
Molecular & Cellular Toxicology
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제3권3호
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pp.165-171
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2007
Mitomycin C (MMC), an antitumor antibiotic isolated from Streptomyces caespitosus, is used in chemotherapy of gastric, bladder and colorectal cancer. MMC is activated in vivo to alkylate and crosslink DNA, via G-G interstrand bonds, thereby inhibiting DNA synthesis and transcription. This study investigates gene expression changes in response to MMC treatment in order to elucidate the mechanisms of MMC-induced toxicity. MMC was admistered with single dose (0.32 and 1.6 ${\mu}M$) to TK6 cells. Applied Biosystem's DNA chips were used for identifying the gene expression profile by MMC-induced toxicity. We identified up- or down-regulated 90 genes including cyclin M2, cyclin-dependent kinase inhibitor 1A (p21, cip1), programmed cell death 1, tumor necrosis factor (ligand) superfamily, member 9, et al. The regulated genes by MMC associated with the biological pathways apoptosis signaling pathway. Further characterization of these candidate markers related to the toxicity will be useful to understand the detailed mechanism of action of MMC.
Fluorescence in situ hybridization (FISH) techniques allow the enumeration of chromosome abnormalities and from a great potential for many clinical applications. In order to produce quantitative and reproducible results, expensive tools such as a cooled CCD camera and a computer software are required. We have developed a Chromosome Image Processing System (Chips) using FISH that allows the detection and mapping of the genetic aberrations. The aim of our study, therefore, is to evaluate the capabilities of our original system using a black-and-white video camera. As a model system, three repetitive DNA probes (D18Z1, DXZ1, and DYZ3) were hybridized to variety different clinical samples such as human metaphase spreads and interphase nuclei obtained from uncultured peripheral blood lymphocytes, uncultured amniocytes, and germ cells. The visualization of the FISH signals was performed using our system for image acquisition and pseudocoloring. FISH images were obtained by combining images from each of probes and DAPI counterstain captured separately. Using our original system, the aberrations of single or multiple chromosomes in a single hybridization experiment using chromosomes and interphase nuclei from a variety of cell types, including lymphocytes, amniocytes, sperm, and biopsied blastomeres, were enabled to evaluate. There were no differences in the image quality in accordance with FISH method, fluorochrome types, or different clinical samples. Always bright signals were detected using our system. Our system also yielded constant results. Our Chips would permit a level of performance of FISH analysis on metaphase chromosomes and interphase nuclei with unparalleled capabilities. Thus, it would be useful for clinical purposes.
Diao, Chun-Yu;Guo, Hong-Bing;Ouyang, Yu-Rong;Zhang, Han-Cong;Liu, Li-Hong;Bu, Jie;Wang, Zhi-Hua;Xiao, Tao
Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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제15권4호
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pp.1817-1822
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2014
Objective: The aim of this study was to screen for possible biomarkers of metastatic osteosarcoma (OS) using a DNA microarray. Methods: We downloaded the gene expression profile GSE49003 from Gene Expression Omnibus database, which included 6 gene chips from metastatic and 6 from non-metastatic OS patients. The R package was used to screen and identify differentially expressed genes (DEGs) between metastatic and non-metastatic OS patients. Then we compared the expression of DEGs in the two groups and sub-grouped into up-regulated and down-regulated, followed by functional enrichment analysis using the DAVID system. Subsequently, we constructed an miRNA-DEG regulatory network with the help of WebGestalt software. Results: A total of 323 DEGs, including 134 up-regulated and 189 down-regulated, were screened out. The up-regulated DEGs were enriched in 14 subcategories and most significantly in cytoskeleton organization, while the down-regulated DEGs were prevalent in 13 subcategories, especially wound healing. In addition, we identified two important miRNAs (miR-202 and miR-9) pivotal for OS metastasis, and their relevant genes, CALD1 and STX1A. Conclusions: MiR-202 and miR-9 are potential key factors affecting the metastasis of OS and CALD1 and STX1A may be possible targets beneficial for the treatment of metastatic OS. However, further experimental studies are needed to confirm our results.
Lee Young-Keun;Jang Yu-Sin;Chang Hwa-Hyoung;Hyung Seok Won;Chung Hye-Young
Journal of Microbiology
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제43권3호
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pp.308-312
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2005
The global RNA transcription profiles of Bacillus lentimorbus WJ5 under an in vitro co-culture with Colletotrichum gloeosporioides were analyzed in order to study the antagonistic bacteria-fungi interactions. Using a filter membrane system, B. lentimorhus WJ5 was exposed to the spores of C. gloeosporioides at the late exponential stage. The transcription profiles of the B. lentimorhus WJ5, both with and without a challenge from C. gloeosporioides, were analyzed using custom DNA chips containing 2,000 genome fragments. A total of 337 genes were expressed, with 87 and 47 up- and down-regulated, respectively. Of these, 12 genes, which were involved in central carbon metabolisms, and 7 from minor catabolism were relatively highly up-regulated (> 10 fold) and down-regulated (< 0.2 fold), respectively. Nine genes, which were thought to be related to the antifungal activity, were also up-regulated, but their levels were not so high (2.0 - 9.7 folds). From the results, during the early stage of the co-culture of B. lentimorbus WJ5 and C. gloeosporioides, nutrient competition seemed to occur; therefore, the genes from central carbon metabolisms could be up-regulated, while those from minor catabolism could be down-regulated.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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