We present the experimental study to realize a DNA separation chip using asymmetrically-switched nonuniform electric fields. The DNA separation chip redistributes DNA molecules within a specific area based on the size- and field-dependent nonlinearity of DNA drift velocity. The present chip is composed of a width variable channel to distribute nonuniform electric field, a DNA loading slit and a pair of electrodes to apply electric field. We focus on the design of DNA separation chips with identifying the nonlinearity of DNA drift velocity using three different DNA molecules (11.1kbp, 15.6kbp, and 48.5kbp) in the chips. It is demonstrated that different size of DNA shows different net migration in different direction under the asymmetrically-switched nonuniform electric field.
The identification of the DNA structure as a double-stranded helix consting of two nucleotide chain molecules was a milestone in modern molecular biology. The DNA chip technology is based on reverse hybridization that follows the principle of complementary binding of double-stranded DNA. DNA chip can be described as the deposition of defined nucleic acid sequences, probes, on a solid substrate to form a regular array of elements that are available for hybridization to complementary nucleic acids, targets. DNA chips based on cDNA clons, oligonucleotides and genomic clons have been developed for gene expression studies, genetic variation analysis and genomic changes associated with disease including cancers and genetic diseases. DNA chips for gene expression profiling can be used for functional analysis in human eel Is and animal models, disease-related gene studies, assessment of gene therapy, assessment of genetically modified food, and research for drug discovery. DNA chips for genetic variation detection can be used for the detection of mutations or chromosomal abnormalities in cnacers, drug resistances in cancer cells or pathogenic microbes, histocompatibility analysis for transplantation, individual identification for forensic medicine, and detection and discrimination of pathogenic microbes. The DNA chip will be generalized as a useful tool in clinical diagnostics in near future. Lab-on-a chip and informatics will facilitate the development of a variety of DNA chips for diagnostic purpose.
DNA chips are becoming increasingly popular as a convenient way to perform vast amounts of experiments related to genes on a single chip. And the importance of analyzing the data that is provided by such DNA chips is becoming significant. A very important analysis on DNA chip data would be clustering genes to identify gene groups which have similar properties such as cancer. Clustering data for DNA chips usually deal with a large search space and has a very fuzzy characteristic. The Particle Swarm Optimization algorithm which was recently proposed is a very good candidate to solve such problems. In this paper, we propose a clustering mechanism that is based on the Particle Swarm Optimization algorithm. Our experiments show that the PSO-based clustering algorithm developed is efficient in terms of execution time for clustering DNA chip data, and thus be used to extract valuable information such as cancer related genes from DNA chip data with high cluster accuracy and in a timely manner.
Zhang, Xuzhi;Ji, Xinming;Cui, Zhengguo;Yang, Bing;Huang, Jie
Bulletin of the Korean Chemical Society
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제33권1호
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pp.69-75
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2012
Five-channel electrochemical chips were fabricated based on the Micro-electromechanical System (MEMS) technology and were used as platforms to develop DNA arrays. Different kinds of thiolated DNA strands, whose sequences were related to white spot syndrome virus (WSSV) gene, were separately immobilized onto different working electrodes to fabricate a combinatorial biosensor system. As a result, different kinds of target DNA could be analyzed on one chip via a simultaneous recognition process using potassium ferricyanide as an indicator. To perform quantitative target DNA detection, a limit of 70 nM (S/N=3) was found in the presence of 600 nM coexisting noncomplementary ssDNA. The real samples of loop-mediated isothermal amplification (LAMP) products were detected by the proposed method with satisfactory result, suggesting that the multichannel chips had the potential for a high effective microdevice to recognize specific gene sequence for pointof-care applications.
To explore the application of DNA chip technology for the detection and typing of Human Papillomavirus (HPV), the HPV6, 11, 16 and 18 gene fragments were isolated and printed onto aminosilane-coated glass slides by a PixSys 5500 microarrayer as probes to prepare the HPV gene chips. HPV samples, after being labeled with fluorescent dye by restriction display PCR (RD-PCR) technology, were hybridized with the microarray, which was followed by scanning and analysis. The experimental condition for preparing the HPV gene chips was investigated, and the possibility of HPV genotyping using gene chips was discussed. The technique that was established in this study for preparing HPV gene chips is practical. The results of the present study demonstrated the versatility and inspiring prospect of using this technology to detect and genotype HPV.
DNA chips are used for experiments on genes and provide useful information that could be further analyzed. Using the data extracted from the DNA chips to find useful patterns or information has become a very important issue. In this paper, we explain the application developed for classifying DNA chip data using a classification method based on the Particle Swarm Optimization (PSO) algorithm. Considering that DNA chip data is extremely large and has a fuzzy characteristic, an algorithm that imitates the ecosystem such as the PSO algorithm is suitable to be used for analyzing such data. The application enables researchers to customize the PSO algorithm parameters and see detail results of the classification rules.
This study exploits the robot system which is necessary in gene study and bio-technology industry. As well, a DNA chip, which of use has been increased recently, can be manufactured with this system. The robot consists of a device spotting DNA on the silylated slide, a well plate, a bed for fixing well plates, devices of washing and drying the pin in DNA spotting .device, a distillation-water vessel, and a discharge vessel of wash water. We made the period of sticking DNA to the pin on the well plate to be 15 seconds. The spot size of DNA was set to be 0.28 mm on the average by bringing the slide into contact with pin during 1 second. If DNA is spotted in minimum space possible about 0.32mm, this system can stick about 8,100 DNA spots on the well plate with this rate. Analyzing the procedure: Movement starts, Pin washes, dries, and smears DNA on the well plate. Spotting DNA onto 12 chips took 2 minutes and 50 seconds.
최근 DNA 칩의 등장으로 유전자 관련 실험과 연구가 매우 용이해졌으며 이를 활용한 다양한 실험 결과로 대량의 데이터가 제공되고 있다. DNA칩에 의해 제공된 데이터는 2차원 행렬로 표현되며 하나의 축은 유전자를 나타내고 다른 하나의 축은 샘플정보를 나타낸다. 이러한 데이터에 대하여 빠른 시간 안에 좋은 품질의 군집화를 수행함으로써 이후의 분석 단계인 분류화 작업의 정확도와 효율성을 높일 수 있다. 본 논문에서는 생태계 모방 알고리즘의 하나인 Particle Swarm Optimization 알고리즘을 사용하여 방대한 양의 DNA칩 데이터에 대한 효율적인 군집화 기법을 제안하였으며 실험을 통해서 PSO 기반의 군집화 알고리즘이 기존의 군집화 알고리즘들보다 수행속도 및 품질 면에서 우수한 성능을 가짐을 보였다.
Smart sensors and biochip technologies have received a great deal of attention in recent years not only because of the enormous potential markets in the healthcare expenditures but more importantly because of its great impact on the quality of human life in the future. Collaborative research among BT (Bio Technologies), IT (Information Technologies) and NT (Nano Technologies) will bring us a new paradigm of the healthcare services. Examples include disease prediction based on the genetic tests, personal medicines, point-of-care analysis, rapid and sensitive infectious disease diagnostics, environmental monitoring for chemical or biological warfares, intelligent drug delivery systems etc. In this report, recent accomplishment in the research area on biosensors, DNA chips, Protein Chips and Lab-on-a-chips are reviewed.
In this presentation, we will discuss several recent achievements developed in my laboratory for microarray-based diagnosis of human genetic mutations including HNF-1 and BRCA1 mutations. To determine the presence of the genetic mutations in a human sample, we prepared allele-specific oligonucleotide chips from selected mutation sites and generated target probes using a tow-step method for Cy-3 DNA $samples^{1)}$ or in vitro transcription of promoter-tagged PCR products for Cy-3 RNA $samples^{2)}$. Hybridization of the target probes to the chips successfully identified all of the genotypes for the tested sites. For more reliable diagnosis, we also employed single base extension (SBE) reaction and zip-code microarray technique for our strategy. Particularly we developed an efficient PNA zip-code microarray for the detection of $HNF-1{\alpha}$$mutations^{3)}$. Using multiplex SBE reactions and zip-code strategy, we were able to correctly diagnose several mutation sites in exon 2 of $HNF-1{\alpha}$ with a wild-type and mutant including a MODY3 patient. These works represent successful applications of DNA microarray technology for the diagnosis of human genetic mutations.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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