• 생명과학회지
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• 제14권2호
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• pp.325-330
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• 2004

효모에 있어 자외선에 의한 절제회복 관여 DNA회복유전자가 많이 알려져 있으나, 이들이 어떤 기능을 하는지는 아직 잘 알려져 있지 않다. 본 연구에서는 자외선 조사 시 절제회복의 초기 단계에 절대적으로 필요한 RAD3 유전자와 유사한 유전자인 HRD3 유전자를 분열형 효모인 Schizosaccharomyces pombe에서 분리하여 그 특성을 연구하였다. 이 결과 분리한 유전자는 효모 RAD3 유전자와 염기서열에서 약 70%이상의 유사성을 보였다. 이 유전자의 염기서열 결과 유전자 산물의 분자량은 75 kDa였다. 2-D gel 결과 과잉발현 시 HRD3 단백질은 숙주 단백질의 합성 억제 또는 분해 촉진을 유발하여 숙주세포인 대장균에 독성초과를 나타내었다. HRD3 유전자와 lacZ 유전자를 융합시킨 여러 가지 재조합 vector를 만들어 이들 융합단백질을 분리, 연구 한 결과 HRD3 단백질의 카르복실 말단부분이 효모에 있어서 DNA회복기능과 대장균에서의 독성효과를 나타내는 중요부위임이 확인되었다.

• Biomolecules & Therapeutics
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• 제26권4호
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• pp.399-408
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• 2018

In this study, we examined the molecular and functional characterization of choline uptake in the human esophageal cancer cells. In addition, we examined the influence of various drugs on the transport of [$^3H$]choline, and explored the possible correlation between the inhibition of choline uptake and apoptotic cell death. We found that both choline transporter-like protein 1 (CTL1) and CTL2 mRNAs and proteins were highly expressed in esophageal cancer cell lines (KYSE series). CTL1 and CTL2 were located in the plasma membrane and mitochondria, respectively. Choline uptake was saturable and mediated by a single transport system, which is both $Na^+$-independent and pH-dependent. Choline uptake and cell viability were inhibited by various cationic drugs. Furthermore, a correlation analysis of the potencies of 47 drugs for the inhibition of choline uptake and cell viability showed a strong correlation. Choline uptake inhibitors and choline deficiency each inhibited cell viability and increased caspase-3/7 activity. We conclude that extracellular choline is mainly transported via a CTL1. The functional inhibition of CTL1 by cationic drugs could promote apoptotic cell death. Furthermore, CTL2 may be involved in choline uptake in mitochondria, which is the rate-limiting step in S-adenosylmethionine (SAM) synthesis and DNA methylation. Identification of this CTL1- and CTL2-mediated choline transport system provides a potential new target for esophageal cancer therapy.

• 한국식품영양과학회지
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• 제33권6호
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• pp.1074-1077
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• 2004

저령의 에틸아세테이트 추출물에서 4개의 분획을 제조한 후 백혈병 세포인 K-562, L-1210, HL-60와 U-937 세포의 세포생존 억제효능을 관찰하였다. Fr. 2는 L-1210, HL-60 세포 억제효능이 미비하였고, Fr. 3은 4종의 백혈병 세포주에 대하여 세포생존 억제효능이 있었다. 이 효능은 L-1210 세포에 대하여 가장 강하게 나타났다. 세포사멸 작용을 증명하는 DNA분절 현상을 L-1210 세포에서 관찰하였을 때, fr. 3을 30 $\mu\textrm{g}$/mL, 100 $\mu\textrm{g}$/mL로 처리한 군에서 만 DNA분절 현상이 관찰되었다. Fr. 3에 대한 DNA합성 억제능을 [$^3$H]thymidine incorporation test로 관찰하였을 때 50 $\mu\textrm{g}$/mL, 100 $\mu\textrm{g}$/mL로 처리한 군에서만 [$^3$H]thymidine incorporation이 저하되었다. 결론적으로 저령에는 백혈병세포인 L-1210과 HL-60의 세포생존 억제성분이 포함되어 있으며, 억제작용은 L-1210에 가장 뚜렷이 나타내었다. Fr. 3은 L-1210 세포에 대하여 DNA 합성능을 저해시켰고, Fr. 3가 L-1210 세포에 대하여 세포생존 억제작용을 나타내는 것은 계획된 세포사멸현상인 apoptosis에 의한 것으로 사료된다. 따라서 fr. 3에 대한 성분 연구가 요구되어진다.

• 한국식품영양과학회지
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• 제32권3호
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• pp.428-436
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• 2003

Carotenoids는 항암 효과가 있는 것으로 알려져 있으나 각각의 carotenoids가 대장암에 미치는 영향에 대해서는 명확하게 밝혀진 바가 없다. 본 연구에서는 4가지 종류의 carotenoids가 인간의 대장에서 유래한 암세포인 HT-29 세포의 증식에 미치는 영향을 조사하였다. $\alpha$-carotene, $\beta$-carotene, lutein lycopene을 농도를 달리 하여 세포 배양액 에 첨가하여 살아있는 세포의 수를 측정한 결과 $\beta$-carotene는 세포의 증식을 다소 증가시키는 반면 $\alpha$-carotene, lutein, lcopene은 세포의 증식을 감소하였다. 세포의 증식을 억제한 carotenoids 중에서 lycopene이 그 효과가 가장 컸다. ErbB receptor family는 세포의 증식을 촉진하고 대장암에서 그 발현이 증가된 것으로 보고되었기 때문에 lycopene이 heregulin-ErbB3 signaling을 억제하는지를 조사하였다. Lycopene는 ErbB2 단백질을 감소하였고 ErbB3 단백질의 변화를 초래하였다. Heregulin을 첨가하여 인산화를 유도한 경우 ErbB3의 인산화, ErbB3와 p85의 결합, Akt 인산화가 lycopene에 의해 억제되었다. 이 결과들은 carotenoids 중 lycopene이 대장암 세포 증식 억제 효과가 가장 크고, 대장암 세포의 DNA 합성을 억제하고 apoptosis를 유도하는 lycopene효과의 일부는 Erb-B3와 Akt의 인산화 감소에 기인하는 것임을 나타낸다.

• 대한한방종양학회지
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• 제7권1호
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• pp.109-116
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• 2001

By applying in vitro invasion assay model, we examined the anti-metatstastic effect of ChunghjagamTang(CLJGT). In 3H-thymidine incorporation assay, CLJGT treated groups showed the decreased DNA synthesis rate compared with control group. Gelatin zymogram assay showed that CLJGT decreases the gelatinolytic activity of MMP-9 from A-549, at the concentration of $800{\mu}g/ml$. We examined whether CLJGT inhibits the invasion of A-549 cells through the matrigel precoated transwell chamber. The results showed that CLJGT effectively inhibited the invasion of A-549 as compared with the control (+PMA) groups. From our research, part of mechanism underlying anti-metastastic effect of CLJGT was proven in vitro.

• Journal of Microbiology and Biotechnology
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• 제11권5호
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• pp.876-879
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• 2001

${\gamma}$ -Tubulin is an essential component involved in microtubule nucleation. The present work examined whether the fast proliferation of cancer cells can be retarded by the depletion of ${\gamma}$ -tubulin expression. Two different gastric cancer cell lines and one control cell line were treated with antisence oligonucleotides complementary to the messenger RNA of ${\gamma}$ -tubulin. The$[^3H]$ -thymidine incorporation in the two gastric cancer cell lines, SNU-1 and SNU-216, was dramatically reducd by treatment with the ${\gamma}$ -tubulin antisense oligonucleotides in a dosage-dependent manner. In contrast, the control cell line, NIH/3T3, showed no significant effect from the antisense oligonucleotides even at a high concentration. The ablation of ${\gamma}$ -tubulin expression in the tumor cells resulted in an altered DNA synthesis during mitosis and it decreased the cell progression. Accordingly, the use of antisense oligonucleotides may be an effective way of inhibiting the proliferation of human gastric cancers.

• International Journal of Oral Biology
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• 제34권4호
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• pp.185-190
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• 2009

This study examined the effects of red light generated from a light emitting diode (LED) upon proliferation and mitochondrial stress in human gingival fibroblasts (hGFs). Cells were exposed to LED-generated red light at a clinically relevant intensity and distance with a 610-630 nm wavelength for various times (0-48 min). At different exposure times, cells were processed for the analysis of succinate dehydrogenase (SDH) activity, proliferation, mitochondrial membrane potential (MMP) and cytotoxicity. Cell cycle progression was also investigated by flow cytometry after staining with propidium iodide. Red light exposure was found to inhibit SDH activity and DNA synthesis in hGFs in a time-dependent manner. Light exposure also reduced the MMP levels in these cells and this was closely associated with a $G_0/G_1$ arrest. In contrast, exposure of hGFs to red light for 48 min led to a dramatic loss of MMP with an attendant increase in cytotoxicity. These findings demonstrate that LED-generated red light may cause mitochondrial stress and growth inhibition in hGFs during tooth whitening therapy, depending on the length of the exposure.

• 한국약용작물학회지
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• 제12권5호
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• pp.406-414
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• 2004

Resveratrol, which is both a phytoalexin with antifungal activity and a phytochemical associated with reduced cancer risk and reduced cardiovascular disease, is synthesized in a limited number of plant species including peanut. Resveratrol synthesis is catalyzed by the enzyme stilbene synthase including resveratrol synthase (RS). Resveratrol synthase gene (RS3) obtained from peanut, Arachis hypogaea, Fabaceae has been transferred into chinese foxglove, Rehmannia glutinosa by using Agrobacterium mediated transformation. RS t-DNA introduced to chinese foxglove (R. glutinosa L) by transformation and its reaction product, $resveratrol-3-O-{\beta}-D-glucoside$ was isolated and characterized using HPLC. Also its biological effects was tested in inhibition of the lipid peroxidation of mouse LDL by glycosylated stilbenes derivatives obtained from transgenic plants. $Resveratrol-3-O-{\beta}-D-glucoside$ isolated from transgenic R. glutinosa L. showed antimicrobial activity of the growth inhibition zone against Escherichia coli and Salmonella typhimurium. Therefore, this compound can be contributed to be useful as a phytoalexin for plant health as well as a phytochemical for human health.

• 한국동물학회지
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• 제22권2호
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• pp.81-93
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• 1979

Progesterone은 배양중인 생쥐 초기배아의 난할을 억제하는 효과를 나타내고 있는데 이의 기작을 밝히기 위하여 이 호르몬이 배아 세포들의 각종 대사작용에 미치는 영향을 조사하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. Progesterone은 배아의 아미노산 흡수능 (uptake)을 증가시키었으나 동화능 (incorporation)을 연저히 감소시켰다. 2. Progesterone은 핵산 전구물질들 (uridine과 thymidine)의 흡수능과 동화능을 모두 저하시켰다. 본 실험의 결과로 미루어 Progesterone은 배아 세포들의 단백질, RNA 그리고 DNA 등의 고분자화합물의 합성을 저해하여 배아의 난할을 억제하는 것으로 보이며 배아 세포들의 투과성의 변화와는 직접 관련이 없는 것으로 사료된다.

• 대한임상검사과학회지
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• 제52권1호
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• pp.69-77
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• 2020

종양 억제 유전자 p53은 인간 간암세포 Hep3B에서는 불활성화되어 있다. 베르베린(berberine)은 암세포의 증식을 억제하는 것으로 보고되어 있다. 우리는 베르베린을 처리한 Hep3B 세포에서 세포사멸이 유도되는지를 조사하였고 이 세포사멸이 p53과 DNA methyltransferase의 발현과 연관되어 있는지를 관찰하였다. MTT 분석을 통하여 세포 생존력을 측정하였다. 세포사멸은 각각 Annexin V flow 세포 분석을 사용하여 측정하였다. 베르베린이 처리된 세포에서 DNMT 효소 활성, mRNA 발현, 단백질 발현 정도가 검사되었으며, p53 단백질 발현은 웨스턴 블롯 분석에 의해 검사되었다. 베르베린 처리는 시간 및 용량 의존적으로 Hep3B세포의 세포사멸을 증가시켰다. 베르베린 처리 시 DNMT3b의 활성 정도, mRNA 발현 그리고 단백질 발현 정도가 모두 감소되었다. 이와는 대조적으로, Hep3B에서는 비활성인 p53 단백질의 발현은 DNMT3b의 감소와 동시에 증가했다. ERK의 발현은 변화가 없었으나, P-ERK의 발현은 농도 의존적으로 감소하는 것으로 나타났다. 이러한 결과는 Hep3B 세포에 베르베린의 처리는 DNMT3b의 발현을 감소시켜서 종양 억제 유전자인 p53의 증가를 유도할 수 있고, 이를 통해서 세포사멸을 증가 시킬 수 있다는 것을 나타낸다. 이는 베르베린이 간암 세포의 증식 억제에 효과적으로 작용할 수 있음을 보여준다.