• Journal of Dairy Science and Biotechnology
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• 제18권1호
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• pp.1-8
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• 2000

본 실험은 산양유 casein의 조성 및 분별 그리고 이화학적 성질에 관하여 연구하고자 산양유의 일반성분을 분석하고 초유와 정상유로 산 casein을 제조하였으며 chymosin 작용과 전기영동에 의한 분리특성 및 DEAE-cellulose column chromatography에 의한 분별을 실시하였다. 그 결과, 산양 정상유의 단백질, 지방, 유당 함량은 각각 2.70${\pm}$0.27%, 3.82${\pm}$0.51% 및 4.10${\pm}$0.29%이었으며 정상유 casein보다 초유 casein에서chymosin처리에 의해 더 많은 NPN 함량이 유리되었다. 우유 및 산양유 casein을 chymosin 처리하여 전기영동을 실시한 결과 casein 조성이 서로 다르게 나타났으며 그 분리양상 또한 차이를 보였다. 산양 정상유 casein을 0.03${\sim}$0.25 M NaCl linear gradient로 DEAE-cellulose column chromatography를 실시한 결과 명확히 분별되지 않아 농도 기울기를 달리한 0.08${\sim}$0.18 M NaCl linear gradient로 column chromatography를 실시한 결과 5개의 Peak로 분리되었고 그 비율은 각각 5.27%, 26.07%, 25.97%, 30.40%및 12.29%이었다. 또한, 순수한 동정, 특히 n-casein 분획을 확인하기 위하여 chymosin을 처리한 산양 정상유 casein을 동일한 조건에서column chromatography를 실시한 결과 6개의peak로 분리되었으며 그 비율은 각각 17.06%, 9.10%, 17.85%, 20.11%, 27.03% 및 8.85%로 나타났다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제17권6호
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• pp.587-592
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• 1989

토양으로부터 분리한 호알카리성 Bacillus sp. YS-309의 조효소액을 조제하고 제핵산, ammonium sulfate 침전, DEAE-cellulose column chromatography, Sephacryl S-200 gel-filtration, DEAE-Sephadex A-50 chromatography 등을 단계적으로 수행하여 6.9배 정제된 순도 98%의 정제효소를 얻었으며, 활성염색을 실시하여 정제한 효소단백질이 $\beta$-galactosidase임을 확인하였다. 정제효소의 분자량은 205,000으로 monomer의 분자량이 56,000인 동일크기의 tetramer로 구성되어 있다고 판단되었다.

• 대한수의학회지
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• 제13권1호
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• pp.47-52
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• 1973

An attempt was carried out to purify the cell components of Bordetella bronchiseptica by the mild procedures. From the supernatant of sonic treated colls, the K-agglutinogen, hemagglutinogen and skin necrotizing factor were separated by a successive use of DEAE-cellulose column chromatography and ammonium sulfate precipitation. The specific activity of purified K-agglutinogen was demonstrated by a gel-diffusion test and was also found to be free from other biologically active substances of B. bronchiseptica: namely hemagglutinin, skin-necrotizing factor and O-antigen.

• 한국식품과학회지
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• 제5권2호
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• pp.78-83
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• 1973

선별된 Aspergillus 속의 한 균주인 S-1의 조(粗) naringin 분해효소의 정제에 관하여 검토한 결과 정제도의 관점에서 Sephadex G-200, starch gel electrophoresis, DEAE-Cellulose column chromatogram, 황산암모늄분획의 순위로 좋았으며 각 정제법에 따른 결과는 다음과 같다. 1) 조효소(粗酵素)를 starch gel electrophoresis 한 결과 단백 mg 당 naringinase 활성이 1,000 unit 로 정제되었다. 2. 단백 mg 당 0.37 unit, naringinase 활성인 조효소(粗酵素)를 황산암모늄분획한 결과 0.25포화 이하에서는 protein per mg 3 unit, 0.75포화 이하에서는 12 unit, 075포화 이상 완전포화 fraction 에서는 34 unit 로 정제되었으며 회수율로 볼때는 황산암모늄 0.75포화 이하에서 가장 좋았다. 3. Sephadex G-200에 의해 정제한 결과 protein per mg 1,337 unit 였으며 DEAE-Cellulose column chromatography 한 결과는 430 unit per protein mg 으로 정제되었다. 4. DEAE-Cellulose column chromatography 후 sephadex G-200에 의해 정제한 결과는 여지전기영동에 의해 단일 단백으로 나타났으며 이 단일 단백은 naringin 을 purunin 까지만 분해하였다.

• 한국식물병리학회지
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• 제14권6호
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• pp.559-562
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• 1998

Odontoglossum ringspot virus (ORSV) was finally purified from ORSV-infected orchid plants by diethylaminoethyl (DEAE) cellulose anion exchange column chromatography. The virus was reliably eluted by potassium chloride at the concentration from 0.1 M to 0.13 M. Partial purification was done by solubilization with Triton X-100 (allkylphenoxypolyethoxy ethanol) and precipitation with polyethylene glycol (PEG; MW 8,000). The finally purified ORSV represented one distinct homogeneous band and the molecular weight of its capsid protein was about 17,500 Dalton in electrophoretic analysis. Electron microscopy showed not only intact particles ranged from 280 nm to 340 nm in length, but also segmented particles that final 140 nm to 220 nm and even disks. Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) showed that final yield was 12 mg/100 g of the infected leaves. Bioassay demonstrated that the purified ORSV had the normal infectivity to orchid plants and Nicotiana glutionsa. Based on these data, anion exchange column chromatography could be efficiently applied to the purification of ORSV and other viruses similar to ORSV.

• 한국식품영양학회지
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• 제10권4호
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• pp.503-508
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• 1997

L. edodes의 배양액 및 균사체로부터 항암작용이 있는 단백 다당류의 추출 및 정제방법에 관한 실험을 실시하였다. 단백다당류 추출에서 비이온성 계명 활성제인 2% Triton X-100 용액으로 추출할 경우 상온에서 추출하여도 통상의 10$0^{\circ}C$ 열수 추출을 통해 얻을 수 있는 것보다 수율이 높았다. 그러나 계명활성제 용액에 4N NaCl을 첨가하여 추출하면 ethanol 침전과정에서 단백다당류의 침전물을 얻을 수 없었다. 열수 추출에 있어서 추출 온도는 10$0^{\circ}C$가 효과적이고 추출 시간은 4시간 정도면 충분하였다. 열수 추출 결과 ethanol 침전 및 동결건조를 통하여 얻어진 조단백 다당류의 정제 실험에서는 alumina를 충전제로 하는 gel filtration보다 sephadex에 의한 gel filtration 또는 DEAE-cellulose, DEAE-sephadex를 이용한 ion exchange chromatography가 보다 효과적이다.

• Applied Biological Chemistry
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• 제20권1호
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• pp.136-141
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• 1977

돼지 백혈구(白血球) Iysosome의 n-butanol 추출물(抽出物)로 부터 DEAE-cellulose, Sephadex c-200 column chromatography 및 Polyacrylamide gel electrophoresis 로서 acid phosphatase, aryl sulfatase, ${\beta}-glucuronidase$로서 및 cathepsin D를 분리(分離)정제하고 그 성질을 조사하였다.

• 한국미생물·생명공학회지
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• 제8권2호
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• pp.125-133
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• 1980

토양으로부터 분리한 포도당 이성화효소를 강하게 생산하는 방사균을 Bergey's manual 8판에 따라 동정한 결과 Streptomyces antibioticus 근록의 균주이었다. 본 균의 배양액으로부터 균체를 모아서 해사를 넣고 파쇄 하여 증류수로 추출하고 Mn-처리를 하여 핵단백질을 제거한 후 황산 ammonia 분획침전(0.5∼0.8포화), 수석, DEAE-cellulose column chromatography, DEAE-sephadex (A-50) column chromatography 및 sephadex G-200에 의한 gel filtration을 거쳐 비활성도로 약 380배, 회수율 25％ 정도로 분리 정제하였다.

• 한국균학회지
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• 제20권1호
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• pp.72-76
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• 1992

고등균류의 배양액 및 균사체로부터 항암작용이 있는 단백다당류의 추출 및 정제방법에 관한 실험을 구름버섯 균사배양체를 이용하고 실시하였다. 실온에서 비이온성 계면활성제인 2% Triton X-100과 함께 교반시키면서 추출했을 때 얻어진 단백다당류의 함량이 이미 사용되어 온 $100^{\circ}C$ 열수에 의한 추출방법을 통해 얻을 수 있는 것보다 더 좋았다. 그러나 4 N NaCl을 포함한 2% Triton-X-100 용액으로 처리했을 때는 추출 후 ethanol 침전과정에서 단백다당류의 침전물을 얻을 수 없었다. 열수추출과 ethanol 침전과정에서 얻어진 단백다당류의 순도를 높이기 위해 chromatography를 이용한 정제실험을 하였다. alumina와 DEAE-Cellulose, DEAE-Sephadex를 각각 충전제로 하여 시료를 전개시키고 280nm에서의 흡광도를 기준으로 단백질 성분의 용출을 확인하고 이들 분획에 대하여 anthrone정색반응과 625nm에서의 흡광도를 측정함으로써 단백다당류를 분리, 정제하였다. 단백다당류의 정제는 alumina를 충전제로 사용하는 것보다 DEAE-Cellulose와, DEAE-Sephadex를 충전제로 한 chromatography에 의하여 더 효율적으로 정제되었다.

• Journal of Yeungnam Medical Science
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• 제13권1호
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• pp.46-58
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• 1996

세포막 정보전달 과정에 참여하는 효소로 inositol triphosphate($InsP_3$)를 분해하는 $InsP_3$ kinase를 소의 뇌 조직으로 부터 새로운 정제방법을 개발하고 isozyme들의 특성을 관찰하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 분쇄한 소의 뇌조직을 PEG로 단백침전하고 DEAE cellulose chromatography 하여 $InsP_3$ kinase I, II의 두 isozyme을 얻었으며, 각각의 isozyme 분획을 Matrix green gel 및 calmodulin-Affigel 15 column으로 chromatography하였다. Phenyl-TSK HPLC하여 정제하였으며 I은 3,103배, II는 2,310 배의 정제를 나타내었다. 정제 단계에서 specific activity를 비교해 볼 때 Matrix green gel chromatography가 DEAE cellulose에서 보다 I이 30배, II가 약 2.3배로 나타났고 정제배수도 I이 17.2%에서 62.1%로 II가 16.6%에서 38%로 나왔으나 calmodulin-Affigel 15과 비교시는 큰 차이가 없었다. 그러므로 Matrix green gel이 정제에서 매우 중요한 단계라 할 수 있다. 효소의 분자량을 알기 위하여 DEAE HPLC로 두 개의 isozyme을 분리하여 전기영동한 결과 I은 환자량 145,000, 85,500 및 69,500이 3개의 단백질을 얻었고 II는 분자량 79,000 및 57,000의 2개의 단백질을 얻었다.