난자성숙 재개와 1-세포기 배아의 세포주기에서, cAMP-의존성 protein kinase A와 diacylglycerol-의존성 protein kinase C가 핵막붕괴에 미치는 영향을 조사하였다. 난자성숙 재기는 dbcAMP, IBMX, TPA, 또는 diacyllycerol에 의해 억제되었다. 또한 protein kinase A와 protein kinase C 활성제를 같이 처리하면 난자성숙이 더욱 억제되었다. 그러나 1-세포기 배아의 전핵막붕괴에는 아무런 영향도 미치지 못하였으며, 단지 protein kinase C 활성제만이 세포질 분열을 억제하였다. 이상의 결과로부터, protein kinase A와 protein kinase C에 의한 단백질 인산화 양상이 GV난자의 핵막붕괴와 1-세포기 배아의 전핵막붕괴에 미치는 세포내 작용기작은 상이함을 알 수 있었으며, 전기영동 결과, 81 KD 단백질이 난자성숙 재개에 중요한 역할을 하리라 사료되었다.
Human polymorphonuclear leukocytes(PMN) are the most numerous host cell in periodontal pockets and their presumed role is to form a protective barrier between the bacteria and periodontal tissues. Microbial component LPS activates macrophages to produce $IL-1{\beta}$, $MIP-1{\alpha}$, $-1{\beta}$, $TNF-{\alpha}$ and IL-6, etc. These cytokines have autocrine function to the macrophages, and paracrine function to other cell such as PMN and affect them to produce some biological functions. In the present study, human PMN were tested for the expression of $IL-1{\beta}$ and $MIP-1{\alpha}$ mRNA. Also we performed the receptor binding assay and in vitro assay for the antimicrobial action of HL-60 cell to determine whether HL-60 can replace the peripheral PMN in analyzing the biological functions. PMN were stimulated with $IL-1{\beta}$, TPA, $MIP-1{\alpha}$, LPS, IL-2 and total cytoplasmic RNA were extracted for the northern blot analysis. In order to determine the induction kinetics of $IL-1{\beta}$ or $MIP-1{\alpha}$ mRNA expression, cells were stimulated for 0,1,2,3 hours. We found peak expression of $IL-1{\beta}$ mRNA after 1hr of induction with $IL-1{\beta}$, LPS and after 2hr of induction with TPA. $MIP-l{\alpha}$ also induced but a scarce $IL-l{\beta}$ message from PMN. In contrast to the $IL-l{\beta}$ mRNA expression, $MIP-1{\alpha}$ were not induced from PMN in any culture conditions. Receptors for $MIP-1{\alpha}$ were identified on dibutyryl cyclic AMP(dbcAMP)-treated HL-60 as well as peripheral PMN. dbcAMP treatment significantly enhanced antimicrobial action of undifferentiated HL-60 cell. MIP-1 further increased enhancing effect of dbcAMP. $IL-1{\beta}$, to a lesser extent, also increased dbcAMP-induced enhancing effect of antimicrobial action of HL-60 cell.
Cyclic-AMP-dependent protein kinase (PKA) seems to function as a negative regulator of the c-Jun $NH_2-terminal$ kinase (JNK) signaling pathway. We demonstrate here that the activity of the PKA catalytic subunit (PKAc) is reduced in apoptotic PC12 pheochromocytoma cells. Apoptotic progress was inhibited by dibutyryl cyclic AMP (dbcAMP), an analog of cAMP. The rescue by dbcAMP was attributable to inhibition of the JNK but not of the p38 signaling pathway, due to the induction of PKA activity. JNK was present in immunocomplexes of PKAc, and PKAc phosphorylated JNK in vitro. Presence of p38 kinase, however, was not prominent in immunocomplexes of PKAc. Our data suggest that JNK is a target point of negative regulation by PKAc in the JNK signaling pathway.
본 연구는 phosphatidylinositol 대사의 기질 및 억제물질이 돼지 난모세포의 체외 성숙·수정에 미치는 영향에 대하여 실험을 하였다. 난모세를 inositol (250 mM) 첨가 또는 무첨가한 mTLP-PVA 배양액에서 46시간 체외배양하였다. 성숙이 완료된 난모세포는 신선 돼지정액을 이용하여 6시간 동안 mTALP-PVA 배양액에서 체외수정을 시켰다. 수정 후 6시간에 이들 난모세포를 10% 혈청을 첨가한 TCM-199 배양액에서 추가로 12시간 배양하였다. 제 2성숙분열중기로 성숙한 남모세포의 비율은 대조구 (67.3%)에 비하여 inositol (81.4%)을 첨가하여 46시간 체외성숙시킨 난모세포에서 더 높았다 (P<0.05). 체외수정 후 18시간에 웅성전핵 형성율은 대조구의 27.3%보다 inositol (42.0%)을 첨가한 배지에서 성숙시킨 난모세포에서 더 높게 나타났다 (P<0.05). 난모세포의 성숙에 대한 inositol의 작용을 조사하기 위하여 LiCl (10 mM) 또는 dbcAMP (0.5 mM)를 첨가한 배지에서 난모세포를 배양하였을 때, 이들 두 약제는 난모세포의 성숙을 억제하였다 (P<0.05). 그러나 이 두 약제의 억제작용은 inositol 첨가에 의해 해제되어 대조구 수준까지 성숙율이 개선되었다. DbcAMP와 verapamil은 상승작용을 하여 난모세포의 성숙을 억제하였다. Verapamil을 단독으로 첨가하였을 때, 난모세포의 성숙분열 개시에는 영향이 없었으나 제 2성숙분열중기로의 성숙은 억제되었다. 이상의 결과로부터, inositol 첨가에 의해 PI-Cycle이 활성화되어 간모세포의 핵 및 세포질 성숙과 막의 변화가 유도되어 난모세포의 성숙이 inositol 첨가에 의해 개선되었다는 것이 시사되었다.
흰쥐의 여포내 혹은 구멍만 낸 여포내의 난자, 또는 다른 여포에 옮겨 넣은 난자의 경우, 그 여포를 17시간 배양하여도 배양액에 hCG가 첨가되지 않는 한, 여포내 난자는 GV를 유지하였다. 즉, 기본 배양액에서 배양할 경우 88.8%-95.2%의 여포내 난자가 GV를 유지하였다. 그러나, hCG를 배양액에 첨가하였을 때 대부분이 핵막붕괴(GVBD)를 일으키고 단지 11.1%-19.4%의 여포내 난자만이 GV를 유지하였다. 난자를 dbcAMP나 IBMX가 들어있는 배양액에서 4시간 동안 배양한 후 다른 여포에 옮겨 넣어 계속 17시간동안 배양할 경우에도 그 결과가 앞의 것과 같았다. 즉 dbcAMP가 들어있는 배양액에서 배양한 후 다른 여포로 옮겨 넣었을 때 그 여포를 기본 배양액으로 배양하면 86.1%의 난자가 GV를 유지하였으며 만일 배양액에 hCG를 첨가하면 단지 13.1%의 난자가 GV를 유지하였다. 또한 IBMX가 들어있는 배양액에서 먼저 배양한 경우에는 결국 여포는 난자의 성숙을 억제하는 환경을 제공하고 있으며 이같은 억제효과는 배양액에 첨가된 hCG에 의하여 소실된다.
The aim of this study was to investigate what protein(s) of porcine epididymal fluid (pEF) are able to enhance the nuclear maturation of porcine germinal vesicle (GV) oocytes in vitro. Proteins of pEF were fractionated by affinity, ion exchange, and gel filtration chromatography. Porcine cumulus-oocytes complexes (COC) from follicles were cultured in tissue culture medium (TCM 199) containing various fractions obtained by chromatography. Porcine COCs were also cultured in TCM 199 containing various meiosis inhibitors and pEF. After 24 or 48 h culture, oocytes were examined for evidence of GV breakdown, metaphase I, anaphase-telophase I, and metaphase II. When porcine COCs were cultured in the medium with meiosis inhibitor such as, dibutyryl cAMP (dbcAMP) and forskolin (Fo), more than 80% of oocytes were unable to resume meiosis. However, porcine COCs supplemented with pEF were able to overcome the inhibitory effect of dbcAMP and Fo. Maturation rate of oocytes was significantly (p<0.05) increased in the media supplemented with cationic protein(s) during in vitro maturation than in those with anionic protein(s) (44.1% vs 20.0%). When oocytes were cultured in the TCM 199 with fractions obtained by gel filtration, the maturation rate of oocytes was significantly (p<0.05) higher in fraction 11 containing 18 kDa than other fractions. The present study suggests that 1) dbcAMP and Fo prevent the spontaneous maturation of oocyte after isolation from follicles, and that pEF contain a substance(s) that improves meiosis resumption in vitro of porcine COCs, 2) cationic 18 kDa protein(s) are responsible for promotion of Mil stage.
본 논문에서는 동적시간교정법(dynamic time warping: DTW)과 다중퓨전기법(multiple fusion strategy: MFS)을 연속 적용하여 비유사도기반 분류법(dissimilarity-based classification: DBC)을 최적화시키는 방법의 실험결과를 보고한다. DBC란 샘플패턴을 분류하기 위하여 샘플의 특징 값을 이용하는 대신에 샘플들 사이의 비유사도를 측정하여 분류기를 설계하는 방법이다. DTW에서는 다음과 같이 두 단계로 나누어 비유사도를 측정한다. 먼저 상관계수를 이용하여 객체 샘플들을 대응시키기 위한 최적의 대응경로를 찾을 수 있도록 샘플들을 조정한다. 그리고 기존의 거리측정법으로 조정된 샘플들 사이의 비유사도를 측정한다. MFS에서는 분류기결합 뿐만 아니라 비유사도 행렬생성에서도 퓨전기법을 적용한다. 즉, DTW 기법으로 작성한 다수의 비유사도 행렬들을 결합하여 새로운 비유사도 행렬을 생성한 다음, 이 행렬공간에서 여러 개의 베이스 분류기를 학습하여 다시 결합한다. 본 논문에서 제안한 방법을 벤취마크 영상 데이터베이스를 대상으로 실험한 결과, 기존의 방법과 비교하여 분류성능을 향상시킬 수 있음을 확인하였다. 이와 같은 실험결과로 볼 때, 제안 방법을 멀티미디어 정보검색 등과 같은 다른 고차원 응용에도 활용할 수 있을 것으로 사료된다.
Hyun Kim;Yoori Choi;Youngsun Lee;Jae-Kyung Won;Sung Ho Lee;Minseok Suh;Dong Soo Lee;Hyun-Seung Kang;Won-Sang Cho;Gi Jeong Cheon
Journal of Korean Neurosurgical Society
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제67권2호
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pp.146-157
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2024
Objective : Chronic subdural hematomas (cSDHs) are generally known to result from traumatic tears of bridging veins. However, the causes of repeat spontaneous cSDHs are still unclear. We investigated the changes in vasculature in the human dura mater and outer membrane (OM) of cSDHs to elucidate the cause of their spontaneous repetition. Methods : The dura mater was obtained from a normal control participant and a patient with repeat spontaneous cSDHs. The pathological samples from the patient included the dura mater and OM tightly adhered to the inner dura. The samples were analyzed with a particular focus on blood and lymphatic vessels by immunohistochemistry, 3-dimensional imaging using a transparent tissue clearing technique, and electron microscopy. Results : The dural border cell (DBC) layer of the dura mater and OM were histologically indistinguishable. There were 5.9 times more blood vessels per unit volume of tissue in the DBC layer and OM in the patient than in the normal control. The DBC layer and OM contained pathological sinusoidal capillaries not observed in the normal tissue; these capillaries were connected to the middle meningeal arteries via penetrating arteries. In addition, marked lymphangiogenesis in the periosteal and meningeal layers was observed in the patient with cSDHs. Conclusion : Neovascularization in the OM seemed to originate from the DBC layer; this is a potential cause of repeat spontaneous cSDHs. Embolization of the meningeal arteries to interrupt the blood supply to pathological capillaries via penetrating arteries may be an effective treatment option.
1) 모든 처리에서 공히 가장 낮은 농도에서 약해를 유발한 계면활성제는 LE, NP, LN, SDSS, PAAS 및 DBC였으며, Tween, Span, SP, SC, STPP 및 CLIS 등은 고농도에서 약해유발이 가장 적었다. 2) 논담수상태에서는 음이온계면활성제가 비이온 계면활성제보다 낮은 농도에서 약해를 유발하였으나 그 밖의 처리에서는 거의 유사한 경향이었다. 3) 벼와 피는 약해에 있어서 거의 동일한 반응을 보였으며 각 초종간에 반응의 차이는 거의 없었다. 4) 밭상태와 건답상태의 발아전 처리에서는 10%이상의 고농도 시료에서도 약해유발이 매우 적었으나 논담수상태의 발아전 처리에서는 모든 처리 중 가장 낮은 농도에서 약해가 유발되었다.
The pepsinogen secretion was stimulated by the cholecystokinin, caerulein, isoproterenol, and carbachol, respectively. But it was increased slightly and returned to control level by the combiantions of total saponin with each above the agents. Even though the atropine had the inhibition effect, the pepsinogen secretion was recovered to normal level from depressed condition by the combination of the atropine with total saponin. Propranolol showed the same pattern as atropine, too. On the other hand, the pepsinogen secretion was stimulated by the DBcAMP alone, but decreased to control level by the combination with the total saponin. In the case of DBcGMP, the pepsinogen secretion was decreased by itself, but stimulated the above control level by the combination with total saponin. Histamine alone had little effect on the pepsinogen secretion, but when combinated with total saponin, the pepsinogen secretion was increased. Serotonin alone and with total saponin, had no effect respectively, From the above results, the total saponin may have the normalization action stimulating or decreasing the pepsinogen secretion to the control level.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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