Sharif, Syeda Ridita;Lee, HyunSook;Islam, Md. Ariful;Seog, Dae-Hyun;Moon, Il Soo
Molecules and Cells
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제38권5호
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pp.402-408
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2015
Protein O-GlcNAcylation, dictated by cellular UDP-N-acetylglucosamine (UDP-GlcNAc) levels, plays a crucial role in posttranslational modifications. The enzyme GlcNAc kinase (NAGK, E.C. 2.7.1.59) catalyzes the formation of GlcNAc-6-phosphate, which is a major substrate for the biosynthesis of UDP-GlcNAc. Recent studies have revealed the expression of NAGK in different types of cells especially in neuronal dendrites. Here, by immunocytochemistry (ICC) and immunonucleochemistry (INC) of cultured rat hippocampal neurons, HEK293T and GT1-7 cells, we have showed that NAGK immuno-reactive punctae being present in the nucleoplasm colocalized with small nuclear ribonucleoprotein-associated protein N (snRNPN) and p54NRB, which are speckle and paraspeckle markers, respectively. Furthermore, NAGK IR cluster was also found to be colocalized with GTF2H5 (general transcription factor IIH, polypeptide 5) immuno reactive punctae. In addition, relative localization to the ring of nuclear lamin matrix and to GlcNAc, which is highly enriched in nuclear pore complexes, showed that NAGK surrounds the nucleus at the cytoplasmic face of the nuclear outer membrane. By in situ proximity ligation assay (PLA) we confirmed the colocalization of NAGK with snRNPN in the nucleus and in dendrites, while we also verified the interactions of NAGK with p54NRB, and with GTF2H5 in the nucleus. These associations between NAGK with speckle, paraspeckle and general transcription factor suggest its regulatory roles in gene expression.
Objective: This review aims to analyze the effects of electromechanically assisted walking in patients with cerebral palsy(CP). Design: A systematic review and meta-analysis. Methods: We reviewed systematically using the PRISMA (Preferred Reporting Items for Systematic Reviews and Meta-Analyses) checklist guidelines. The inclusion criteria for this study were all CP patients. The intervention was electromechanically assisted walking. The outcome measures included gait parameters, function, spasticity. Studies excluded from this review were excluded from the review if they were non-English languages and if the study was not published as a full report, and if they were not randomized controlled trials (RCTs) designs. The RevMan 5.4 program was used to evaluate and explain the results. The risk of bias was evaluated independently by two reviewers. The quantitative meta-analysis, including mean differences (MD) and associated standard deviations (SD) from baseline and follow-up assessments, were recorded. Results: A total of 634 articles were searched. Two hundred eighty-nine duplicate articles were excluded, and 345 of 634 originals were left for selection. Of these 74 papers, 44 were out of topic, and 19 reported no mean or standard deviation values. And one was a non-experimental study. Finally, ten studies were included. All 10 RCTs of electromechanically assisted walking were analyzed. The meta-analysis showed a significant improvement in gait cycle (95% CI (confidence intervals), 0.09 to 0.19, I2=0%), Gross Motor Function Measure (GMFM) D (95% CI, 3.27 to 13.17, I2=0%) and GMFM E (95% CI, 0.22 to 6.41, I2=0%). Conclusions: Electromechanically assisted training helps in walking in patients with CP.
Importance: Carbapenem-resistant Enterobacteriaceae are emerging as a global public health risk. Therefore, assessing the prevalence of carbapenem-resistant Escherichia coli (CRE) in both humans and animals is important. Objective: We aimed to ascertain the occurrence and characteristics of CRE isolated from companion animals, dogs and cats. Methods: E. coli strains were tested for antimicrobial susceptibility using the broth microdilution technique. Antimicrobial resistance genes were detected by polymerase chain reaction and sequencing analysis. The molecular characteristics of CRE were determined using multi-locus sequence typing, replicon typing, and pulsed-field gel electrophoresis (PFGE). Results: In total, 13 CRE isolates (0.13%) were identified from dogs possessing blaNDM-5 along with β-lactamase genes, mostly blaCMY-2 (92.2%) and blaTEM-1 (53.8%). The commonly observed mutations were S83L and D87N in gyrA, S80I in parC, and S458A in parE. CRE carried non-beta-lactam resistance genes, with the majority being tet(B) (100%), sul (84.6%), and aac(3)-II (53.8%). Nine different PFGE patterns (P1-P9), IncX3-type plasmids (69.2%), and ST410 (84.6%) were predominantly detected. Conclusions and Relevance: This investigation provides significant insight into the prevalence and molecular characteristics of blaNDM-5-carrying E. coli in dogs. The co-existence of blaNDM-5 and other antimicrobial resistance genes in E. coli potentially poses severe health hazards to humans.
Two feeding trials were conducted to determine the optimum feeding frequency in growing Korean rockfish, (Sebastes schlegeli) reared at the temperatures of $15^{\circ}C$ and $19^{\circ}C$. Fish averaging $92.2{\pm}0.7$ g (mean${\pm}$standard deviation [SD]) at $15.0{\pm}0.5^{\circ}C$ and $100.2{\pm}0.4g$ ($mean{\pm}SD$) at $19.0{\pm}0.5^{\circ}C$ water temperature were randomly distributed into each of 15 indoor tanks containing 250-L sea water from a semi-recirculation system. A total of five feeding frequency groups were set up in three replicates as follows: one meal in a day at 08:00 hour, two meals a day at 08:00 and 17:00 hours, three meals a day at 08:00, 14:00, and 20:00 hours, four meals a day at 08:00, 12:00, 16:00, and 20:00 hours, and one meal every 2 days at 08:00 hour. Fish were fed at the rate of 1.2% body weight (BW)/d at $15^{\circ}C$ and 1.5% BW/d at $19^{\circ}C$. At the end of 8 wks of feeding trial weight gain and specific growth rate were significantly higher at the fish fed groups of one meal a day and two meals a day at $15^{\circ}C$ and fish fed groups of 1 meal every 2 days at $19^{\circ}C$ were significantly lower than those of all other fish fed groups. Glutamic oxaloacetic transaminase and glutamic pyruvic transaminase of fish fed group at 1 meal every 2 days was significantly higher than those of all other fish fed groups in both experiments. Weight gain, specific growth rate and condition factor were gradually decreased as the feeding frequency increased. The results indicate that growing Korean rockfish 92 and 100 g perform better at $15^{\circ}C$ than $19^{\circ}C$ water temperature. As we expected, current results have indicated that a feeding frequency of 1 meal a day is optimal for the improvement of weight gain in growing Korean rockfish grown from 92 g to 133 g at $15^{\circ}C$ and 100 g to 132 g at $19^{\circ}C$ water temperature.
Cervi Parvum Cornu(CPC) is that the young horn of deer family and has been traditionally used as a medicine in Eastern. The purpose of present study was to investigate the effects of CPC on cell cycle progression and its molecular mechanism in human periodontal ligament cells (HPOLC). In cell proliferation assay, 1 ng/ml, 10 ng/ml, 100 ng/ml, 1 ㎍/ml and 10 ㎍/ml of CPC were used, all treatment groups increased the cell growth. Maximal cell proliferation was observed in cells exposed to 100 ng/ml of CPC at 4 day, and 10 ng/ml and 100 ng/ml of CPC at 6 days. S phase was increased and G1 phase was decreased in the group treated with 100 ng/ml of CPC in cell cycle analysis. The protein levels of cyclin D1 were not changed, but the levels of cyclin E, cdk 2, cdk 4 and cdk 6 were increased. The protein levels of p21, pRb were decreased as compared to that of control group, but the levels of p53 was not changed in the cells both treated with CPC Md untreated. These results suggested that CPC increases the cell proliferation and cell cycle progression in HPDLC, which is linked to an increased cellular levels of cyclin E, cdk 2, cdk 4 and cdk 6, and decreased the levels of p53, p21.
본 실험적 연구는 강섬유의 길이와 혼입율이 콘크리트의 파괴인성과 강도에 미치는 영향을 고찰하기 위하여 수행되었다. 강섬유의 길이(30,60mm)와 혼입율(0.0, 0.5, 1.0, 1.5, 2.0%)을 달리한 노치를 가진 강섬유보강콘크리트 보를 제작하여 3점 휨시험을 하였으며, 그 실험결과로부터 파괴에너지, CMOD 및 휨강도 등을 구하였다. 또한 파괴에너지로부터 콘크리트의 파괴인성을 평가하였다. 연구결과, 콘크리트의 파괴인성과 강도는 전반적으로 강섬유의 혼입율이 증가할수록 증가하였으며 강섬유의 길이는 휨강도에는 큰 영향을 주었으나 파괴인성과 압축강도에는 거의 영향을 주지않았다. 또한 강섬유의 분산성, 시공연도 및 굵은골재의 최대치수 등을 고려할 때, 콘크리트의 파괴인성과 강도측면에서 강섬유의 혼입율은 1.0%정도가 최적이라 판단되며, 그길이가 긴 경우 약간 유리하였다.
The highly potent cytotoxic DNA-DNA cross-linker consists of two cyclopropa[c]pyrrolo[3,4-3]indol-4(5H)-ones insoles [(+)-CPI-I] joined by a bisamido pyrrole (abbreviated to "Pyrrole"). The Pyrrole is a synthetic analog of Bizelesin, which is currently in phase II clinical trials due to its excellent in vivo antitumor activity. The Pyrrole has 10 times more potent cytotoxicity than Bizelesin and mostly form DNA-DNA interstrand cross-links through the N3 of adenines spaced 7 bp apart. The Pyrrole requires a centrally positioned GC base pair for high cross-linking reactivity (i.e., $5^1$-T$AT_2$A*-$3^1$), while Bizelesin prefers purely AT-rich sequences (i.e., $5^1$-T$AT_4$A*-$3^1$, where /(equation omitted) represents the cross-strand adenine alkylation and A* represents an adenine alkylation) (Park et al., 1996). In this study, the high-field $^1$H-NMR and rMD studies are conducted on the 1 1-mer DNA duplex adduct of the Pyrrole where the 5′(equation omitted)TAGTTA*-3′sequence is cross-linked by the drug. A severe structural perturbation is observed in the intervening sequences of cross-linking site, while a normal B-DNA structure is maintained in the region next to the drug-modified adenines. Based upon these observations, we propose that the interplay between the bisamido pyrrole unit of the drug and central C/C base pair (hydrogen-bonding interactions) is involved in the process of cross-linking reaction, and sequence specificity is the outcome of those interactions. This study suggests a mechanism for the sequence specific cross-linking reaction of the Pyrrole, and provides a further insight to develop new DNA sequence selective and distortive cross-linking agents.
The influence of supplementing diets with various levels of organic zinc (OZ) on the performance, meat quality attributes, and sensory properties of broiler chickens was investigated. A total of 3,200 1-d-old female broiler chicks were randomly allotted to 16 floor pens (replicates) with 200 birds per pen. A corn-wheat-soybean meal basal diet (control) was formulated and 20 ppm OZ (20 OZ), 40 ppm OZ (40 OZ), or 80 ppm OZ (80 OZ) was added to the basal diet to form four dietary treatments with four replicates per treatment. Live performance of broiler chickens, meat quality, and sensory properties were evaluated. The results showed no significant difference among the treatments for live performance of broiler chickens. Significant increases (p<0.05) in thigh skin epidermis and dermis thickness were shown in the OZ supplementation groups; however, no effect of OZ on the thickness of back skin epidermis or dermis was found. Dietary OZ levels did not affect the pH of breast and thigh meat or the water holding capacity (WHC) of thigh meat, but the WHC of breast meat increased significantly (p<0.05) when birds were fed 40 OZ and 80 OZ. Results of a sensory analysis showed no differences among the dietary treatments. In conclusion, dietary OZ did not affect live performance or sensory properties of broiler chickens but did increase the WHC of breast meat and thickness of skin layers; thus, improving carcass quality in broiler chickens.
The antitumor antibiotic (+)-CC-1065 can alkylate N3 of guanine in certain sequences. A previous high-field $^1H$ NMR study on the$(+)-CC-1065d[GCGCAATTG*CGC]_2$ adduct ($^*$ indicates the drug alkylation site) showed that drag modification on N3 of guanine results in protonation of the cross-strand cytosine [Park, H-J.; Hurley, L. H. J. Am. Chem. Soc.1997, 119,629]. In this contribution we describe a further analysis of the NMR data sets together with restrained molecular dynamics. This study provides not only a solution structure of the (+)-CC-1065(N3- guanine) DNA duplex adduct but also new insight into the molecular basis for the sequence- specific interaction between (+)-CC-1065 and N3-guanine in the DNA duplex. On the basis of NOESY data, we propose that the narrow minor groove at the 7T8T step and conformational kinks at the junctions of 16C17A and 18A19T are both related to DNA bending in the drugDNA adduct. Analysis of the one-dimensional $^1H$ NMR (in $H_2O$) data and rMD trajectories strongly suggests that hydrogen bonding linkages between the 8-OH group of the (+)-CC-1065 A-sub-unit and the 9G10C phosphate via a water molecule are present. All the phenomena observed here in the (+)-CC-1065(N3-guanine) adduct at 5'$-AATTG^*$are reminiscent of those obtained from the studies on the (+)-CC-1065(N3-adenine) adduct at $5'-AGTTA^*$, suggesting that (+)-CC-1065 takes advantage of the conformational flexibility of the 5'-TPu step to entrap the bent structure required for the covalent bonding reaction. This study reveals a common molecular basis for (+)-CC-1065 alkylation at both $5'-TTG^*$ and $5'-TTA^*$, which involves a trapping out of sequence-dependent DNA conformational flexibility as well as sequence-dependent general acid and general base catalysis by duplex DNA.
Sepsis is the leading cause of death in critically ill patients. Today, around 60% of all cases of sepsis are caused by Gram-negative bacteria. The cell wall component lipopolysaccharide (LPS) is the main initiator of the cascade of cellular reactions in Gram-negative infections. The core receptors for LPS are toll-like receptor 4 (TLR4), MD-2 and CD14. Attempts have been made to antagonize the toxic effect of endotoxin using monoclonal antibodies against CD14 and synthetic lipopolysaccharides but there is as yet no effective treatment for septic syndrome. Here, we describe an inhibitory effect of a phosphatidylethanolamine derivative, PE-DTPA (phosphatidylethanolamine diethylenetriaminepentaacetate) on LPS recognition. PE-DTPA bound strongly to CD14 ($K_d$, $9.52{\times}10^{-8}M$). It dose dependently inhibited LPS-mediated activation of human myeloid cells, mouse macrophage cells and human whole blood as measured by the production of tumor necrosis factor-${\alpha}$ (TNF-${\alpha}$) and nitric oxide, whereas other phospho-lipids including phosphatidylserine and phosphatidylethanolamine had little effect. PE-DTPA also inhibited transcription dependent on $NF-{\kappa}B$ activation when it was added together with LPS, and it rescued LPS-primed mice from septic death. These results suggest that PE-DTPA is a potent antagonist of LPS, and that it acts by competing for binding to CD14.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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