On June in 1970 the authors discovered a pathogenecity, cytoplasmic polyhedrosis virus, of the Smithia virus in the larvae of Liparis dispay L. appeared on quercus forest in Chung-Neung district and had carried out a experiment to detect the pathogenecity of Smithia virus through the inoculation of it into the larvase, such as Liparis dispay L. Hyphantrea cunea DRURY, and Dendrolinus spectabilis BUTLER. The results obtained were as follows ; 1) Death rate of L.dispay and D.spectabilis treated by 10$^{6}$ /ml cytoplasmic polyhedrosis virus of Smithis virus were 88.0% and 85.5% respectively, when the larvaes of these insects are big enough. But there were none of pathogenecity in case of Hyphantrea cunea DRURY. 20 Dead larvae caused by the injection of Smithia virus had begum to find out about on 10 days after inoculation. Miximum death rate of L. didpay and D. spectabilis appeared on 20-25days nad on 25-30days, respectively, after the incoulation. 3) In the cytoplasm of Mid-gut cylindrical cells of both of these insects, polyhedrosis, such s hexagonal (0.5-2.0-6.0 micron) were found out and in these insects, polyhedrosis, such as hexaginal (0.5-2.0-6.0 mivton) were found out and in case of D.spectabilis were a few polyhedrosis, such as tetragonal, trianglar polyhedrosis. 4) Diluted concentration of `0$^{6}$ /ml cytoplasmic polyhedrosis virus of Smithia virus were spread out in the field conditions. The corrected mortality was confirmed as about 87.8%.
A cytoplasmic polyhedrosis virus (CPV) was isolated from the larvae of Thaumetopoea pityocampa and shown to cause an infection of midgut cells. This viral infection revealed several important diagnostic symptoms, including discoloration of the posterior midgut, reduced feeding, and extended development time of the larvae. The virus infection is lethal to Thaumetopoea pityocampa, and with the increasing doses kills the larvae within 4-5 days post infection. Electron microscopy studies showed typical cytoplasmic polyhedral inclusion bodies that are icosahedral, and ranged from 2.4 to $5.3{\mu}m$ in diameter. Electrophoretic analysis of the RNA genome showed that the virus has a genome composed of 10 equimolar RNA segments with the sizes of 3,907, 3,716, 3,628, 3,249, 2,726, 1,914, 1,815, 1,256, 1,058, and 899 bp, respectively. Based on morphology and nucleic acid analysis, this virus was named Thaumetopoea pityocampa cytoplasmic polyhedrosis virus (TpCPV), and belongs to the genus Cypovirus, family Reoviridae.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제21권1호
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pp.117-125
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2010
The tropical tasar silkworms, Antheraea mylitta (D) produce famous silk 'Kosa' in central part of India. Due to outdoor rearing it became susceptible to viral infection including cytoplasmic polyhedrosis virus (CPV). The common mode of entry of cytoplasmic polyhedrosis virus is per os and cause gresserie disease to the larvae. Histopathological studies elucidated the insect CPV virus produces infective polyhedral inclusion bodies (PIBs) in the midgut cell cytoplasm of virus infected fifth instar larvae. The PIBs multiply enormously in the cytoplasm without invading the nucleus. Ultrastructural studies confirmed the pathological effects of CPV on in midgut cell cytoplasm. The multiplication of polyhedral inclusion bodies took place into the vacuoles and form virogenic stromata in the cytoplasm of cells. However, the encapsulations of polyhedral inclusion bodies into the polyhedrin protein occurred and polyhedra were released into the lumen. At the late stage of infection, cells showed the regressed cytoplasmic organelles with large vacuoles and elongated mitochondria. Hence, the horizontal transmission of CPV causing the midgut cells disintegration in the tasar silkworm, Antheraea mylitta (D) confirmed during infection.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제10권1호
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pp.69-72
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2005
Bleaching powder solution (1 to $5\%$), slaked lime solution (0.1 to $0.5\%$) and formalin (1 and $2\%$) were tested for their efficacy against cytoplasmic polyhedrosis virus and Nosema mylittansis spores to control virosis and pebrine respectively in tasar silkworm, Antheraea mylitta in indoor rearing condition. All the disinfectants tested were found effective in suppressing the infection of virosis and pebrine significantly. Complete inactivation of Antheraea mylitta cytoplasmic polyhedrosis virus (AmCPV) was recorded when treated with $4\%$ bleaching powder, $0.4\%$ slaked lime for 20 min and $2.0\%$ formalin for 30 min. Similarly treatments of $3.0\%$ bleaching powder solution for 20 min and $2.0\%$ formalin for 30 min were found effective in complete inactivation of N. mylittanis spores.
Singh, G.P.;Roy, D.K.;Sahay, Alok;Suryanarayana, N.
International Journal of Industrial Entomology and Biomaterials
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제13권2호
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pp.97-101
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2006
The efficacy of wood ash from Terminalia arjuna (arjun) and T. tomentosa (asan) has been tested against virosis of tasar silkworm, Antheraea. mylitta D. The Polyhedral Occlusion Bodies (POBs) of Cytoplasmic Polyhedrosis Virus of A. mylitta (AmCPV) were exposed to the aqueous solution (0.5 to 4%) of wood ash for 5 to 30 minutes. The treated suspension of POBs was orally inoculated once to tasar silkworm larvae after 24 hours of $1^{st}$ moult, and larvae reared in indoor on arjun leaves till spinning. The application of aqueous solution of wood ash has established its potential as antiviral agent against cytoplasmic polyhedrosis virus. Two percent aqueous solution of wood ash from arjun and asan dissolved the Polyhedral Occlusion Bodies (POBs) of cytoplasmic polyhedrosis virus of tasar silkworm and inactivated the virions within a short period of 20 to 30 minutes. In vivo efficacy of aqueous solution of wood ash resulted in reduction of larval mortality due to virosis. The mortality was reduced to $2.56{\pm}0.21\;and\;3.03{\pm}0.32%$ when treatment of 2.0% solution of wood ash of arjun and asan respectively were applied for 20 minutes, compared to inoculated control $(92.18{\pm}7.52%)$. No mortality was recorded when treatment of 2.5% solution of wood ash of arjun and asan were applied for 10 minutes or more.
This experiment was undertaken to examine the injurious environment conditions for occuring of the virus disease, grasserie and cytoplasmic polyhedrosis in rearing of silk worms, to observe of cytoplsamic polyhedrosis diseased silkworms with histological preparation and to define the virus origin on the gattine and the disease of shrinked form after moulting (Okichijimi). The results obtained are as follows. 1) The grasserie in spring season rearing was remarkably infected in highly percent with 20.1 % in high temperature condition during 3rd to 4th instar, the high temperature during 1st to 2nd instar and 5th instar in 16.5% and 16.3%, respectively. In the fall season rearing, the disease was infected by the feeding of soft leaves plot in 5.3% and 4.8%, respectively with significant difference in 5% level, accordingly, it was thought to the nutritional condition is a factor in occuring of the disease. 2) In spring season rearing, the number ofl infected silk worms of cytoplasmic polyhedrosis was increased in the high temperautre and high humidity conditions, and in fall season rearing, order of the low temperature and high humidity plot, first feeding plot and feeded with hard leaves plot were found insome high infected ratio of the disease than control plot. 3) The occuring of cytoplasmic polyhedrosis was observed even in control rearing plot with the examining of anatomical and histological preparation in spring and fall. 4) It was found that the high diseased ratio of the gattine and disease of shrinked form after moulting in 21.8% of control and 93.2% in feeded with inocylated plot in the biosassay of inoculum. It was defined as a virus flacherie acoording to the Danaka and Shimizu's examine method.
담배나방 유충에서 분리한 세포질다각체병 바이러스의 형태, 다각체 단백질 및 핵산의 전기영동상과 바이러스의 병원성을 조사하여 본 바이러스를 이용한 담배나방의 생물적 방제 이용성을 검토하고자 본 실험을 수행하였다. 다각체의 형태는 외관상 6각형으로 0.5~3.7 ${\mu}m$ 크기이고 바이러스 입자는 정 20면체로 55nm였다. SDS-PAGE에 의한 다각체 단백질은 단일 롤리?타이드인 24.3 Kd와 5개의 작은 구성분으로 이루어졌다. 바이러스입자는 7개의 폴리?타이드로 구성되어 있으며 분자량은 28.0~133.6 Kd였다. 바이러스 게놈은 10개의 조각으로 된 총 분자량 18.08 Md인 이본쇄 RNA로 각 조각의 분자량 범위는 0.65~2.79 Md이였다. 3령 유충에 대한 담배나방 세포질 다각체병바이러스의 $LC_{50}$은 $2.895{\times}10^5PIBs/ml$이었으며 $5.0{\times}10^{6}PIBs/ml$의 농도에서 $LT_{50}$에서 16.4일이었다.
세포질다각체 바이러스에 대한 가잠의 품종별 저항성과 이형 세포질다각체 바이러스 첨식에 의한 유발에 관한 시험을 한 결과는 다음과 같다. 1. 품종간의 저항성 1) 일본종 및 중국종 사이에 뚜렷한 차이가 없었다. 2) 장잠기(4령)가 추잠기(2령) 보다 저항성이 강했다. 3) 육각형 세포질다각체 바이러스가 사각형 세포질다각체 바이러스보다 병원성이 높았다. 4) 육각형 세포질다각체 바이러스의 LC$_{50}$의 평균치는 원종에서는 2령기잠 처리에서 6.12$\times$$10^{6}$/$m\ell$, 4령기잠 처리에서 1.57$\times$$10^{7}$ /$m\ell$ 이었고 교잡종에서는 2령기잠 처리에서 1.28$\times$$10^{6}$/$m\ell$, 4령기잠 처리에서 4.99$\times$$10^{6}$/$m\ell$이었다. 5) 사각형 세포질다각체 바이러스의 LC$_{50}$의 평균치는 원종에서는 2령기잠 처리에서 2.06$\times$$10^{7}$ /$m\ell$, 4령기나 처리에서 5.67$\times$$10^{7}$ /$m\ell$ 이었고 교잡종에서는 2령기잠 처리에서 9.84$\times$$10^{6}$/$m\ell$, 사령기잠 처리에서 3.86$\times$$10^{7}$ /$m\ell$이었다. 2. 이형 세포질다각체 바이러스 첨식에 의한 유발사각형 세포질다각체 바이러스 첨식에 의한 육각형 세포질다각체 바이러스의 유발은 1) 영기별로 볼 때 2령기잠 처리에서가 4영기잠 처리에서보다 월등히 높은 유발률을 보였다. 2) 유형별로 볼 때 대부분이 육각형과 사각형의 혼합감염 형태로 나타났다. 3) 농도별로 볼 때 대체로 1.3$\times$$10^{6}$/$m\ell$ 농도를 중심한 중간농도에서 높은 유발률을 나타냈다.타냈다.
1. 활성 virus T-CPV에 대한 유발현상은 잠103 및 잠104어느 것이나 male$\times$ female 및 male$\times$female 처리가 높았으며, 접중농도에 있어서 male$\times$female 및 male$\times$female 처리의 H-CPV단독 유발현상은 $10^{7}$ /m1이하에서 높은 경향이었다. 2. Formalin첨식에 의한 유발현상은 잠103 및 잠104 어느 것이나 male$\times$female 및 male$\times$female가 높은 경향이 있다. 3. 냉장처리에 의한 유발현상에서도 formalin첨식의 경우와 같은 경향이 있다. 물론, 병장처리에 의하여 중장형다각체병이 유발되는 것은 전대에 접종된 occult virus가 활성화한다는 것이라 생각할 수 있으나 그 유발되는 정도는 역시 occult virus와 관계되는 유전적, 생리적 및 환경적 여러가지 요인들을 생각할 수 있다. 따라서 실제적인 저온에 의한 유발관계에서 사육환경을 지배하는 사육의 온습도, 생리적요인을 지배하는 엽질 등을 감안해야 할 것이다. 본 시험결과에서 보면 occult virus가 차대에 경란전달되어 사육중 유발요인에 따라서 활성화하는 것은 분명하다. 그러나 지금까지 occult virus를 찾아낼 수 있는 방법은 전자현미경 및 혈청학적인 기술에 의존해도 불가능하다. 따라서 잠종을 생산하는 과정에서 occult virus의 유무를 확인할 수 있는 방법은 active virus가 검출되는 나방(모아)을 대상으로 하는 경우로 제한하여 시험을 해야 할 것이다. 여기서 또한 밝혀져야 하는 것은 occult virus 경란전달과 sublethal infection에 의한 경란전달의 차이점인 것이다. 그리고 현재 우리가 보유하고 있는 품종별로 occult virus의 잠재된 상태를 유발요인별로 검토하므로서 저항성 품종육성에도 좋은 자료가 될 것으로 생각한다.
We examined the intracellular localization of NS5 protein of Dendrolimus punctatus cytoplasmic polyhedrosis virus (DpCPV) by expressing NS5-GFP fusion protein and proteins from deletion mutants of NS5 in baculovirus recombinant infected insect Spodoptera frugiperda (Sf-9) cells. It was found that the NS5 protein was present at the plasma membrane of the cells, and that the N-terminal portion of the protein played a key role in the localization. A transmembrane region was identified to be present in the N-terminal portion of the protein, and the detailed transmembrane domain (SQIHMVWVKSGLVFF, 57-71aa) of N-terminal portion of NS5 was further determined, which was accorded with the predicted results, these findings suggested that NS5 might have an important function in viral life cycle.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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