GD 기본(基本) 배지(培地)에 서로 다른 생장조절물질(生長調節物質)을 첨가(添加)한 4 가지 배지(培地)에 잣나무 배(胚)에서 유래(由來)한 Callus를 1년(年) 6개월간(個月間) 배양(培養)시켜 염색체수(梁色體數) 변이(雙異)를 조사(調査)하였다. 그 결과(結果) $0.1mg/{\ell}$와 NAA $0.1mg/{\ell}$에 2, 4-D $0.1mg/{\ell}$를 첨가(添加)한 배지(培地) 즉(卽) Auun 단독(單獨) 및 배합(培合) 처리(處理)한 배지(培地)에서는 2n 비율(比率)이 각각(各各) 29%와 17%로 낮게 나타났다. 그러나 Auxin 과 Cytokinin 을 종합(複合) 처리(處理)한 배지(培地) 즉(卽) 2, 4-D $0.1mg/{\ell}$와 BAP $0.1mg/{\ell}$에서는 52 %, 2, 4-D $0.1mg/{\ell}$와 Kinetin $0.1mg/{\ell}$에서는 36 %로써 비교적(比較的) 높은 빈도(頻度)로 2n 세포(細胞)가 나타났다. 2n 세포(細胞)의 빈도(頻度)는 기관분화(器官分化)와 상관(相關)이 높은 것으로 생각 할 수 있었다.
Corydalis remota for. peatinata의 꽃자루에서 캘러스를 유도한 후 MS기본배지에 생장조절물질을 첨가하여 체세포 배발생 및 재분화를 시도하였다. 생장조절 물질에 따른 캘러스 유도율을 비교하면 2,4-D 2.0 mg/L 에 zeatin 2.0 mg/L를 혼용 처리한 배지에서 아주 양호한 캘러스 유도 및 생장율을 나타냈다. 식물생장조절물질 또는 호르몬 첨가에 의한 체세포 배의 발생율은 광조건에서 cytokinin류의 농도가 0.5mg/L 단독 첨가한 배지에서 가장 높았다. 또한 발생된 부정배중 MS기본배지에 zeatin 1.0mg/L을 단독처리한 경우가 가장 쌍자엽형성율이 높은 것으로 나타났다. 또한 2,4-D를 미량 첨가하고 cytokinin류를 혼용첨가한 배지나 BAP를 단독 처리한 배지에서는 소식물체의 배지 접지면인 뿌리부분에 활발한 2차 배발생이 나타났다.
본 연구는 감귤 품종인 '삼보감'과 '병귤'에서 3종류의 싸이토키닌(BA, 2iP, kinetin)과 그들의 농도(0, 0.1, 0.5, 1.0, 2.0mg/L)가 마디배양에 의한 대량 증식에 미치는 영향을 구명하고자 수행되었다. 마디의 절편체는 기내 발아된 두 품종의 유묘에서 얻어졌다. 두 품종을 비교하면 신초의 수는 '병귤'에서보다 '삼보감'에서 더 많이 형성되었다. 본 실험에서 사용된 3종류의 싸이토키닌 중에 고체 MS 기본배지에 첨가된 BA가 신초의 대량 생산에 가장 효과적인 촉진제였으며 그 적정농도는 1.0 mg/L인 것으로 나타났다. 줄기의 신장 뿌리의 형성은 싸이토키닌의 종른에 관계없이 싸이토 키닌의 농도가 증가함에 따라 억제되었다. 삼보감'에서는BA 1.0 mg/L에서 가장 탄은 신초 및 엽수를 형성한 반면 '병귤에서는 어떠한 싸이토키닌의 종류나 농도도 본 실험에서 신초 및 뿌리 등의 형성에 커다란 영향이 없었다.
온전한 접합자배 또는 자엽절편을 오옥신(2,4-D, IAA)과 사이토카이닌(BA, kinetin)이 첨가된 배지에 배양하였다. 접합자배를 온전한 상태로 배양했을 경우, 오옥신은 발아를 억제하였으나 사이토카이닌은 억제하지 않았고, 체세포배의 발생은 발아되지 못하는 배에서만 유도되었다. 자엽절편을 배양한 경우, 기본배지에서 체세포배발생률이 가장 높았다. 오옥신을 첨가한 배지에서는 체세포배가 자엽의 표면에서 산재하여 발생되었는데 비해서 기본배지에서는 자엽의 기부에서만 발생되었다. 2,4-D를 첨가한 배지에서는 체세포배가 자엽의 표피 및 하표피를 포함한 다수의 세포로부터 기원되어 다배로 발생되었다. 이 체세포배를 같은 배지에 배양했을 때 일차배의 표면으로부터 이차배가 발생되었는데 이들의 경우는 주로 표피 또는 하표피의 단세포로부터 유래되었음을 조직학적으로 밝혔다.
인삼 자엽을 식물호르몬을 전혀 첨가하지 않은 Murashige와 Skoog배지에 배양할 경우 고빈도로 자엽의 표면으로부터 체세포배가 발생되었다. 그러나 cytokinin을 첨가배지에서는 체세포배의 발생이 억제되면서 부정아가 발생되었다. BAP처리배지에서 kinetin 처리보다 부정아의 발생이 높은 경향을 보였으며, IBA와 사이토카이닌의 혼합 처리시에는 부정아의 발생빈도가 단일처리보다 훨씬 증가한 경향을 보였다. 특히 0.05mg/1 IBA와 5mg/l BAP 혼합처리구에서 부정아의 형성이 $40\%$로 매우 높은 빈도로 발생하였다. 체세포배의 발생은 자엽의 기부에서만 발생된 반면 부정아는 자엽의 정부에서 주로 발생되었기 때문에 체세포배의 발생 부위와는 뚜렷이 구분되는 특징을 보였다. 또한 부정아는 접합자배의 측아와 같이 포로 둘러싼 녹색돌기로 자라다가 포가 열개되면서 유경이 생장하였는데 줄기의 구조가 아닌 단엽의 구조를 지니며 생장되었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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