• 제목/요약/키워드: Culture filtrate

검색결과 373건 처리시간 0.03초

Characterization of Aspergillus niger Mutants Deficient of a Protease

  • Chung, Hea-Jong;Park, Seung-Moon;Kim, Dae-Hyuk
    • Mycobiology
    • /
    • 제30권3호
    • /
    • pp.160-165
    • /
    • 2002
  • Aspergillus niger has been used as a host to express many heterologous proteins. It has been known that the presence of an- abundant protease is a limiting factor to express a heterologous protein. The protease deficient mutant of A. niger was obtained using UV-irradiation. A total of $1{\times}10^5$ spores were irradiated with $10{\sim}20%$ survival dose of UV, 600 $J/m^2$ at 280 nm, and the resulting spores were screened on the casein-gelatin plates. Ten putative protease deficient mutants showing the reduced halo area around colonies were further analyzed to differentiate the protease deficient mutant from other mutant types. Among ten putative mutants, seven mutants showed significant growth defect on nutrient rich medium and two mutants appeared to be the secretory mutants, which resulted in the impaired secretion of extracellular proteins including proteases. A mutant $pro^--20$ showed reduced halo zone without any notable changes in growth rate. In addition, the starchdegrading and glucose oxidase activities in the culture filtrate of $pro^--20$ mutant showed the similar range as that of the parental strain, which suggested that the $pro^--20$ mutant ought to be the protease deficient mutant rather than a secretory mutant. The reduced proteolytic activity of the $pro^--20$ was demonstrated using SDS-fibrin zymography gel. The reduced extracellular proteolysis was quantified by casein degradation assay and, comparing with the parental strain, less than 30% residual extracellular protease activity was detected in the culture filtrate of the $pro^--20$ mutant. The bio-activity of an exogenously supplemented hGM-CSF(human Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor) in the culture filtrate of $pro^--20$ mutant was detected until eight times more diluted preparations than that of the parental strain.

Bacillus subtilis 분리균의 Mannanase와 Xylanase 생산성과 효소 특성 (Production and Properties of Mannanase and Xylanase by a Bacillus subtilis Isolate)

  • 윤기홍
    • 한국미생물·생명공학회지
    • /
    • 제43권3호
    • /
    • pp.204-211
    • /
    • 2015
  • 새만금 갯벌로부터 xylan과 locust bean gum (LBG)을 분해하는 미생물을 분리하여 그 생화학적 특성과 16S rRNA 서열을 조사한 결과 Bacillus subtilis로 확인되었다. 분리균 YB-30은 konjac이나 LBG가 존재한 상태에서 배양할 경우 mannanase의 생산성이 급격하게 증가되며, 밀기울이 존재하에서는 xylanase의 생산성이 증가되였다. Konjac (3.5%)과 밀기울(1%)이 동시에 첨가된 배지에서 균의 성장이 정지기에 진입하였을 때 mannanase와 xylanase의 생산성이 최고 수준에 도달하였다. 배양상등액의 mannanase와 xylanase는 60℃와 pH 6.0, 55℃와 pH 5.5에서 각각 최대 활성을 보였다. 고온에서는 두 효소 모두 안정하지는 않았으며 xylanase가 mannanase보다 안정성이 낮았다. 밀기울은 쌀기울보다 많은 양의 arabinoxylan을 함유하고 있으므로 배양상등액으로 분해하였을 때 밀기울로부터 생성되는 환원당의 양이 더 많은 것으로 확인되었으며, 이로 보아 B. subtilis YB-30에 의해 생산되는 xylanase와 mannanase는 사료첨가용 효소로 활용 가능성이 높다고 여겨진다.

버섯병원균에 대한 길항세균 Bacillus sp. SD-10이 생산하는 항균물질의 분리 (Isolation of Antimicrobial Substance by Produced Bacillus sp. SD-10 with Antagonistic Activity Towards Mushroom Pathogens)

  • 이상원;류현순;갈상완;박기훈;김철호;최영주
    • 생명과학회지
    • /
    • 제14권3호
    • /
    • pp.467-471
    • /
    • 2004
  • Bacillus sp. SD-10이 생산하는 항균물질을 이용하여 버섯의 갈색무늬병균 및 푸른곰팡이병균에 대한 천연물 버섯병해 방제약재 개발을 위한 기초적 연구를 행하였다. Bacillus sp. SD-10은 35∼4$0^{\circ}C$의 배양온도에서 30∼40 hrs 배양하였을 때 가장 높은 항균활성을 나타내었다. 이 배양액을 이용하여 T. virens의 균사 생육저해 및 포자발아 억제 농도를 검토한 결과, 균사생육은 30 ul 이상 처리 시 뚜렷하게 저해되었으며 포자발아는 평판배지에 5%(v/v) 이상 첨가 시 완전하게 억제되었다. Bacillus sp. SD-10의 배양액으로부터 항균물질을 순수분리하여 UPX-1으로 명명하고, UPX-1을 $^1H-$NMR과 $^{13}C$-NMR 스펙트럼으로 구조를 동정한 결과 탄소 6개로 구성된 당 2개가 2당류 구조로 결합되어 있는 화합물임이 밝혀졌다. UPX-1은 T. virens 뿐 아니라 Pse. tolaassi에도 아주 강한 항균효과를 나타내었다.

Paenibacillus woosongensis의 만난분해 효소활성 (Mannanolytic Enzyme Activity of Paenibacillus woosongensis)

  • 윤기홍
    • 미생물학회지
    • /
    • 제46권4호
    • /
    • pp.397-400
    • /
    • 2010
  • 만난의 분해활성을 갖는 Paenibacillus woosongensis의 배양 상등액으로부터 mannanase, ${\beta}$-mannosidase와 ${\alpha}$-galactosidase 활성이 관찰되었다. 배양상등액 내의 locust bean gum를 분해하는 mannanase는 pH 5.5와 $60^{\circ}C$, para-nitrophenyl-${\beta}$-D-mannopyranoside를 분해하는 ${\beta}$-mannosidase는 pH 6.5, $50^{\circ}C$, para-nitrophenyl-${\alpha}$-D-galactopyranoside를 분해하는 ${\alpha}$-galactosidase는 pH 6.0-6.5와 $50^{\circ}C$에서 각각 최대활성을 보였다. 배양상등액의 만난 분해효소는 mannotriose, mannotetraose, mannopentaose, mannohexaose와 같은 만노올리고당을 분해할 뿐 아니라 mannobiose도 분해하였다. 또한 melibiose, raffinose, stachyose 등의 ${\alpha}$-1,6 결합형 galacto-oligosaccharides를 분해하여 galactose를 생성하였다. 이러한 결과로 보아 P.woosongensis는 galactomannan을 완전히 분해하는데 필요한 3종류 효소를 모두 생산하는 것으로 판단된다.

Streptomyces sp. A252의 배양적 특성 및 항진균활성 (Antifungal Activity and Cultural Characteristics of the Streptomyces sp. A252)

  • 이용세;최장원;라경수;백형석
    • 생명과학회지
    • /
    • 제9권1호
    • /
    • pp.8-14
    • /
    • 1999
  • A252 균주의 항균성물질의 생성 및 균주의 배양적 특성을 조사한 결과 균체의 생장은 TSB와 malt extract-yeast extract (ISP-2) 배양기가 좋았으며, 배양여액의 항균활성은 TSB와 nutrient broth에서 효과적이였다. TSB 배지에서 균사생장 및 배양여액의 항균활성은 $25^{\circ}C$와 pH 6.5에서 최적화 되었으며, 2$\%$ TSB 농도에서는 1$\%$에 비해 생장은 좋았으나 배양여액의 항균활성에는 차이가 없었다. A252 균주의 균사 생장은 접종 72시간 후에 최대치에 달하였으며 반면 배양액의 항균력은 접종 60시간 후인 idiophase에 가장 높은 수준을 보였지만 96시간 후에는 약간 감소하는 경향을 나타냈다. 배양여액의 항균활성은 $121^{\circ}C$ 고온에서도 안정하였으며, pH에 대한 안정성은 4.0 - 9.0의 범위였다. A252 균주의 생리적 특성 및 분생자경의 형태 등을 관찰한 결과 Streptomyces sp.로 동정되었다.

  • PDF

Ovicidal Activity of Lactic Acid Produced by Lysobacter capsici YS1215 on Eggs of Root-Knot Nematode, Meloidogyne incognita

  • Lee, Yong Seong;Naning, Kyaw Wai;Nguyen, Xuan Hoa;Kim, Sun Bae;Moon, Jae Hak;Kim, Kil Yong
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
    • /
    • 제24권11호
    • /
    • pp.1510-1515
    • /
    • 2014
  • Lysobacter capsici YS1215 isolated from soil previously showed nematicidal potential for biological control of the root-knot nematode. In this study, lactic acid, a nematicidal compound, was isolated from culture filtrate of YS1215, and its ovicidal activity was investigated. Purification and identification of lactic acid were performed by a series of column chromatographies and identified by $^1H$ and $^{13}C$ NMR spectra and GC-MS analysis. Our results showed that bacterial culture filtrate containing lactic acid significantly inhibited egg hatching. The lowest egg hatch rate (5.9%) was found at a high concentration ($25 {\mu}l/ml$) of lactic acid at 5 days after incubation, followed by 20 (15.2%), 15 (23.7%), 10 (29.8%), and $5(36.4%){\mu}l/ml$, while egg hatching in the control (sterile distilled water) was 44.5%. This is the first report of lactic acid as an ovicidal compound, and it may be considered as an alternative of chemical pesticide against root-knot nematodes.

한국산(韓國産) 고등(高等) 균류(菌類)의 성분(成分) 연구(硏究)(제41보)(第41報) -Lentinus edodes DMC7 균주(菌株)의 배양(培養) 여액(濾液)의 항암(抗癌) 성분(成分)- (Studies on Constituents of the Higher Fungi of Korea(XLI) -An Antitumor Fraction from the Culture Filtrate of Lentinus edodes DMC7-)

  • 정경수;최응칠;김병각
    • 한국균학회지
    • /
    • 제12권4호
    • /
    • pp.129-132
    • /
    • 1984
  • 한국산 담자균류로부터 새로운 항종양 성분을 개발하기 위하여 표고의 일개 균주인 Lentinus edodes DMC7을 인공배지에서 진탕배양하여 그 균사 배양물을 얻었다. 그중 배양 여액으로부터 수용성 고분자 분획을 분리하여 LF-3라고 명명하였다. LF-3는 ICR 마우스에 이식된 Sarcoma 180세포에 대하여 항암작용을 나타내었으며 그 저지율은 53. 1%였다.

  • PDF

Endophytic Fungi of Salt-Tolerant Plants: Diversity and Ability to Promote Plant Growth

  • Khalmuratova, Irina;Choi, Doo-Ho;Kim, Jong-Guk;Lee, In–Seon
    • Journal of Microbiology and Biotechnology
    • /
    • 제31권11호
    • /
    • pp.1526-1532
    • /
    • 2021
  • Suaeda australis, Phragmites australis, Suaeda maritima, Suaeda glauca Bunge, and Limonium tetragonum in the Seocheon salt marsh on the west coast of the Korean Penincula were sampled in order to identify the endophytes inhabiting the roots. A total of 128 endophytic fungal isolates belonging to 31 different genera were identified using the fungal internal transcribed spacer (ITS) regions and the 5.8S ribosomal RNA gene. Fusarium, Paraconiothyrium and Alternaria were the most commonly isolated genera in the plant root samples. Various diversity indicators were used to assess the diversity of the isolated fungi. Pure cultures containing each of the 128 endophytic fungi, respectively, were tested for the plant growth-promoting abilities of the fungus on Waito-C rice germinals. The culture filtrate of the isolate Lt-1-3-3 significantly increased the growth of shoots compared to the shoots treated with the control. Lt-1-3-3 culture filtrate was analyzed and showed the presence of gibberellins (GA1 2.487 ng/ml, GA3 2.592 ng/ml, GA9 3.998, and GA24 6.191 ng/ml). The culture filtrate from the Lt-1-3-3 fungal isolate produced greater amounts of GA9 and GA24 than the wild-type Gibberella fujikuroi, a fungus known to produce large amounts of gibberellins. By the molecular analysis, fungal isolate Lt-1-3-3 was identified as Gibberella intermedia, with 100% similarity.

Beauveria bassiana Bb08의 살충성 물질 생산을 위한 배양조건의 통계적 최적화 (Statistical Optimization of Culture Conditions for the Production of Aphicidal Metabolites of Beauveria bassiana Bb08)

  • 고은수;임영훈;정형철;최재필;박인서;김정준;이동진;김근
    • 한국미생물·생명공학회지
    • /
    • 제41권4호
    • /
    • pp.398-406
    • /
    • 2013
  • 본 연구에서는 B. bassiana Bb08가 생산하는 진딧물 살충 대사산물의 최대 생산을 위하여 박스벤켄(Box-Behnken) 디자인과 표면반응분석을 이용한 통계적 방법을 사용하였다. 균배양을 위한 배지는 옥수수분말, 미강, 옥수수침지액분말로 구성되었다. 균배양액은 원심분리 후 상등액을 $0.45{\mu}m$ 막여과지로 여과한 후 3령의 목화진딧물에 살포하였고, 6일 동안 매일 죽은 진딧물 수를 계수하여 살충율을 계산하였다. 통계분석한 결과 최적의 배양조건은 온도 $26.2^{\circ}C$, 배지 초기 pH 5.9, 플라스크 진탕 속도 209.0 rpm, 그리고 균배양 시간은 5.9일로 나타났다. 여과액 살포 후 4, 5, 그리고 6일째 기대 살충율은 각각 76.8, 84.9, 그리고 89.4%이었다, 배양조건 4가지 모두 살충성 대사산물 생산에 유의한 영향을 미쳤고, 영향이 큰 요인 순서는 온도, pH, 배양시간, 진탕속도의 순서로 분석되었다.