KIM Ji Hoe;PARK Hi Yun;CHO Yong Chul;CHO Myo Heon;CHANG Dong Suck
Korean Journal of Fisheries and Aquatic Sciences
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v.32
no.2
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pp.160-164
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1999
Algicidal activities of Alteromonas sp. SR-14 against Chaetoceros calcitrans were investigated at various culture conditions. The algicidal activity by Alteromonas sp. SK-14 was dependent on temperature. In mixed culture of C, calcitrans and Alteromonas sp. SR-14 at various temperatures, the algicidal activity of Alteronzonas sp. SR-14 was the highest at $20^{\circ}C$, but not showed algicidal activity above $25^{\circ}C$. With the inoculation of $10^4$ cells/ml of C. calcitrans, the diatom could not grow at the microalgal culture condition until 15 days by the simultaneous inoculation of less than 10 cells/ml of Alteromonas sp. SR-14. Alteromonas sp. SR-14 showed the strongest algicidal activity against logarithmic phase cells of C. calcitrans. During the mixed culture of C. calcitrans and Alteromonas sp. SR-14, supplementation of Conwy medium nutrients, changes of light intensity with 1,300$\~$4,600 lux and agitation with 200 rpm did not affect the algicidal activity.
The rotifer Brachionus plicatilis is one of the most important food organisms in aquaculture. The resting eggs produced by mictic female rotifers are easily stored and hatched, making them useful as the starter for the mass culture of rotifers in marine larval culture. This study examined the optimum preservation method for resting eggs to ensure a high hatching rate. To produce resting eggs, the marine rotifer B. plicatilis was cultured with Nannochloris oculata (KMMCC 16). The resting eggs were harvested and cryopreserved using 5% and 10% methanol (MeOH), dimethylsulfoxide (DMSO), and glycerol as cryoprotectant agents (CPAs). The cryopreservation comprised slow or rapid freezing and the resting eggs were stored for one month in liquid nitrogen ($-196^{\circ}C$). The resting eggs were also dried at different temperatures (30, 40, and $50^{\circ}C$) and for different times (1, 2, and 3 h). In general, the hatching rates of the resting eggs preserved with CPA were higher than those without CPA and the slow freezing method was better than the rapid freezing method. However, the optimum CPA concentration for the hatching rate of the resting eggs varied with the freezing method and kind of CPA, and the CPA also affected the viability of the resting eggs. Dried resting eggs had a high, rapid hatching rate over 80%. The moisture content of the resting eggs cryopreserved in liquid nitrogen affected the hatching rate. Drying at $30^{\circ}C$ for 1 hour resulted in a high hatching rate of the resting eggs. In conclusion, drying at $30^{\circ}C$ for 1 hour and preservation in liquid nitrogen with the slow freezing method, without CPA, is recommended for a high hatching rate (ca. 95%) of rotifer resting eggs.
In vitro elimination of Sweet potato leaf curl virus (SPLCV) from infected sweet potato is difficult due to low number of virus-free plants obtained from meristem tip culture and long growth period required for the virus detection. In this study, efficient production of the SPLCV-free sweet potato by in vitro therapy coupled with a PCR assay for virus detection was investigated. Infected shoots cultured on Murashige and Skoog medium were treated at three different temperatures for 7 weeks followed by meristem tip culture on the medium with or without ribavirin at 50 mg/L. The regenerated plantlets were tested for virus infection by a PCR assay. The results showed that the both heat- and cold-treatments, and addition of the ribavirin did not have significant effect on efficiency of the virus elimination. The meristem size, however, greatly affected the survival rate. Meristems sized over 0.4 mm survived better than smaller ones (0.2-0.3 mm). The PCR assay was approved to be a rapid, sensitive and reliable for the SPLCV detection in regenerated plantlets. Therefore, combination of cultivating meristem tips sized 0.4-0.5 mm on the medium at $22^{\circ}C$ without ribavirin and detection of SPLCV in the regenerated plantlets by the PCR assay was an efficient system for the SPLCV elimination from infected sweet potato.
Using Streptomyces sp. YU100 isolated from Korean soil, the fermentative production of phospholipase D was attempted along with its purification and characterization studies. When different carbon and nitrogen sources were supplemented in the culture medium, glucose and yeast extract were found to be the best. By varying the concentration of nutrients and calcium carbonate, the optimal culture medium was determined as 2.0% glucose, 1.5% yeast extract, 0.5% tryptone 0.3% calcium carbonate. During cultivation, the strain secreted most of the phospholipase D in the early stage of growth within 24 h. The phospholipase D produced in the culture broth exhibited hydrolytic activity as well as transphosphatidylation activity on lecithin (phosphatidylcholine). In particular, the culture broth showed 8.7 units/ml of hydrolytic activity when cultivated at $28^{\circ}C$ for 1.5 days. The phospholipase D was purified using 80% ammonium sulfate precipitation and DEAE-Sepharose CL-6B column chromatography, which produced a major band of 57 kDa on a 10% SDS-polyacrylamide gel with purity higher than 80%. The enzyme showed an optimal pH of 7 in hydrolytic reaction, and at pH 4 in a transphosphatidylation reaction. The enzyme activity increased until the reaction temperature was elevated to $60^{\circ}C$. The enzyme was relatively stable at high temperatures and neutral pH, but significantly unstable in the alkaline range. Among the detergents tested as emulsifiers of phospholipids, the highest enzyme activity was observed when 1.5% Triton X-100 was employed. However, no inhibitory effect by metal ions was detected. Under optimized reaction conditions, the purified enzyme not only completely decomposed PC to phosphatidic acid within 1 h, but also exhibited higher than 80% conversion rate of PC to PS by transphosphatidylation within 4 h.
Kim, Yong-Hee;Kim, Byung-Gak;Lee, Yong-An;Kim, Bang-Jin;Kim, Ki-Jung;Lee, Myeung-Sik;Im, Gi-Sun;Ryu, Buom-Yong
Reproductive and Developmental Biology
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v.33
no.3
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pp.171-177
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2009
Spermatogonial stem cells(SSCs) only are responsible for the generation of progeny and for the transmission of genetic information to the next generation in male. Other in vitro studies have cultured SSCs for proliferation, differentiation, and genetic modification in mouse and rat. Currently, information regarding in vitro culture of porcine Germline Stem Cell(GSC) such as gonocyte or SSC is limited and is in need of further studies. Therefore, in this study, we report development of a successful culture system for gonocytes of neonatal porcine testes. Testis cells were extracted from $10{\sim}14$-day-old pigs. These cells were harvested using enzymatic digestion, and the harvested cells were purified with combination of percoll, laminin, and gelatin selection techniques. The most effective culture system of porcine gonocytes was established through trial experiments which made a comparison between different feeder cells, medium, serum concentrations, temperatures, and $O_2$ tensions. Taken together, the optimal condition was established using C166 or Mouse Embryonic Fibroblast(MEF) feeder cell, Rat Serum Free Medium(RSFM), 0% serum concentration, $37^{\circ}C$ temperature, and $O_2$ 20% tension. Although we discovered the optimal culture condition for proliferation of porcine gonocytes, the gonocyte colonies ceased to expand after one month. These results suggest inadequate acquirement of ingredients essential for long term culture of porcine GSCs. Consequently, further study should be conducted to establish a successful long-term culture system for porcine GSCs by introducing various growth factors or nutrients.
The productivity of cyclopoid copepod, Apocyclops royi fed by various diets (Isochrysis galbana, Tetraselmis suecica, Phaeodactylum tricornutum, concentrated freshwater Chlorella and baker's yeast) was investigated at tile different temperatures ($16-36^{\circ}C$) with different salinities (5-34 ppt). A. royi was cultured in 6 ml vessels (12 wells culture plate). Total production (188 inds.) and daily production (13.4 inds.) of nauplii by A. royi female at $32^{\circ}C$ were significantly higher than those of nauplii at the different temperatures (P<0.05). Development time from nauplii to copepodite and from nauplii to adult tended to increase with increasing water temperature up to 32. And total production (169 inds.) and daily production (9 inds.) of nauplii by A. royi female at 10 ppt were significantly higher than those of nauplii at the different salinities (P<0.05). The fastest development time from nauplii to copepodite and from nauplii to adult was observed at 10 ppt and 15 ppt, respectively (P<0.05). The highest total production of A. royi nauplii and fastest development time from nauplii to adult were obtained in females fed Isochrysis galbana (P<0.05). These results may indicate that the optimum culture temperature and salinity for A. royi are $32^{\circ}C$ and 10 ppt, respectively, and Isochrysis galbana is one of the suitable diets for this copepod.
Of all the various types of tea that are available, Pu-erh tea has attracted much attention because of its healthpromoting effects. The objective of this study was to investigate the physicochemical and antioxidant properties of two types of Pu-erh tea, Gushu Pu-erh and typical Pu-erh, extracted at 80 and 100℃, respectively. The Gushu Pu-erh extracts showed lower pH but higher antioxidant potential at both the temperatures, as compared to the typical Pu-erh. The mineral content of the tea extracts was greater at 100℃ than at 80℃. Among the seven categories of the flavor compounds that were detected, the peak area of esters was the highest in the Gushu Pu-erh extracts. The type of tea and the extraction temperature significantly affected the physicochemical and functional properties of these tea extracts. This study revealed that Gushu Pu-erh extracted at 100℃ for 3 min with 30 s of shaking provides better results in terms of the antioxidant potential and mineral content.
The recombinant bovine somatotropin (rBST) was administered to the oliver flounder, Paralichthys olivaceus, to know the effects and optimal administration frequency and dosage of the hormone. The experiment was conducted with three different treatment groups (A, B and C) designated based on the duration and administration frequency of rBST and one control (D) from April 14, 1996 to March 16, 1997. The fish of hormone treated groups grew 7.86 to 10.07% (47.45 to 60.75 g in weight) better than the control at the end of the experiment (P<0.05). No significant differences in their growth were detected among treatment groups. The distinct growth improvement was recognized four weeks after completion of the first four hormone administration. When considering water temperatures measured from the experimental tanks, the effect of rBST on the flounder was greater during the period showing relatively lower temperature. The survival rates were higher in treatment groups than in the control, revealing 98.3% (A), 98.4% (B), 97.7% (C) and 93.1% (D) during the first stage of culture; 92.7% (A), 91.3% (B), 86.7% (C) and 80.0% (D) during the second stage of culture.
A hazard analysis which included watching operations, measuring temperatures of foods throughout preparation and display, and sampling and testing for microorganisms of total plate counts and coliform bacteria was conducted in various phases of product flow of Korean soups (Galbitang, Sullungtang, Jangkuk) prepared at Korean restaurants. Cooked foods were sometimes held at room temperature long enough to permit multiplication of bacteria that might have been present. This was confirmed by the finding of large numbers of aerobic mesophilic colonies ($10^6$) in samples of such foods after handling and holding for several hours before served. These bacteria decreased down to $10^1{\sim}10^2$ while the contaminated Tang were served. And internal temperature of Tang served was approximately $70^{\circ}C$. Critical control points identified were, pre-preparation, handling after cooking and holding on display. Guidelines were suggested for effective quality control of Tang (Korean soups) production. Handlers of these foods need to be informed of the hazards and appropriate preventive measures.
Agricultural drainage salt generated during irrigation of crops in San Joaquin Valley, California, exceeds 600,000 tons annually and cumulates in the field in a rapid rate. As a result, the waste is taking out more farmlands for salt storage and disposal, imposing serious concerns to environment and local agricultural industry. In searching for a potential solution to reduce or eliminate the waste, this research explored feasibility of producing a value-added product, sodium sulfate, from the waste and utilizing the product in textile dyeing. The results indicated that sodium sulfate could be produced from the salt and could be purified by a recrystallization method in a temperature range within the highest and lowest daily temperatures in summer in the valley. The recovered sodium sulfate samples, with purities ranging from 67% to 99.91, were compared with commercially available sodium sulfate in the dyeing of levelling dyes. In nylon fabrics, the salt samples had little color difference in the dyeing with C.I. Acid Yellow 23 and C.I. Acid Blue 158. All salt samples' gray scale was 5 grade. In wool fabrics, the salt samples had little color difference in dyeing with C.I. Acid Yellow 23 and C.I. Arid Blue 158. All salt samples' gray scale was 5 grade. Generally, the dyeing of levelling dyes using recovered salts from farm drainage had little color difference than the dyeing of levelling dyes using commercial sodium sulfate.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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