For the elucidation of substrate specificity to the brown copra meal by Bacillus sp. ${\beta}-mannanase.$, the enzymatic hydrolysate after 24 hr of reaction was heated in a boiling water bath for 10 min, and then centrifuged to remove the insoluble materials from hydrolysates. The major hydrolysates composed of D.P 5 and 7 galactosyl mannooligosaccharides. For the separate of galactosyl mannooligosaccharides, the supernatant solution of 150 ml was put on a first activated carbon column. The column was then washed with 5 l of water to remove mannose and salts. The oligosaccharides in the column were eluted by a liner gradient of $0{\sim}30%$ ethanol, at the flow rate of 250 ml per hour. The sugar composition in each fraction tubes was examined by TLC and FACE analysis. The combined fraction from F3 was concentrated to 30 ml by vacuum evaporator. Then put on a second activated carbon column. The oligosaccharides in the column were eluted by a liner gradient of $0{\sim}30%$ ethanol (total volume: 5 l), at the flow rate of 250 ml per hour. The eluent was collected in 8 ml fraction tubes, and the total sugar concentration was measured by method of phenol-sulfuric acid. The major component of F2 separated by 2nd activated carbon column chromatography were identified $Gal^3Man_4(6^3-mono-{\alpha}-D-galactopyranosyl-{\beta}-mannotetraose)$. To investigate the effects of brown copra meal galactomannooligosaccharides on growth of Bifidobacterium longum, B. bifidum were cultivated individually on the modified-MRS medium containing carbon source such as $Gal^3Man_4$, compared to those of standard MRS medium.
Selverajah, Malarvili;Zakaria, Zainul Amiruddin;Long, Kamariah;Ahmad, Zuraini;Yaacob, Azhar;Somchit, Muhammad Nazrul
CELLMED
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v.6
no.2
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pp.11.1-11.7
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2016
The aimed of the presence study was to determine the antiulcer potential of virgin coconut oil (VCO), either extracted by wet process (VCOA) or fermentation process (VCOB), and to compare their effectiveness against the copra oil (CO) using the HCl/ethanol-induced gastric ulcer model. Earlier, the oils underwent chemical analysis to determine the free fatty acids composition, physicochemical properties and anti-oxidant capability. In the antiulcer study, rats (n=6) were pre-treated orally for 7 consecutive days with distilled water (vehicle), 100 mg/kg ranitidine (positive group) or the respective oils (10, 50, and 100% concentration). One hour after the last test solutions administration on Day 7th, the animals were subjected to the gastric ulcer assay. Macroscopic and microscopic analyses were performed on the collected rat's stomachs. From the results obtained, the chemical analysis revealed i) the presence of high content of lauric acid followed by myristic acid and palmitic acid in all oils and; ii) the significant (*p< 0.05) different in anisidine- and peroxide-value, percentage of free fatty acid, total phenolic content and total antioxidant activity among the oils. The animal study demonstrated that all oil possess significant (*p< 0.05) antiulcer activity with VCOB being the most effective oil followed by VCOA and CO. The macroscopic observations were supported by the microscopic findings. Interestingly, all oils were more effective than 100 mg/kg ranitidine (reference drug). In conclusion, coconut oils exert remarkable antiulcer activity depending on their methods of extraction, possibly via the modulation of its antioxidant and anti-inflammatory activity.
Objective: The objective was to determine standardized ileal digestibility (SID) of amino acids (AA) in 11 plant protein sources fed to growing pigs. Methods: Eleven feed ingredients used were sesame meal, two sources of soybean meal (SBM) produced in the Republic of Korea, a source of SBM produced in India, high-protein distillers dried grains (HPDDG), perilla meal, canola meal, copra meal, corn germ meal, palm kernel expeller, and tapioca distillers dried grains (TDDG). Experimental diets were prepared to contain each test ingredient as a sole source of AA, and a nitrogen-free diet was also prepared to estimate the basal ileal endogenous losses of AA. Twelve barrows surgically fitted with T-cannulas at the distal ileum with an initial body weight of 29.0 kg (standard deviation = 3.0) were individually housed in metabolism crates equipped with a feeder and a nipple drinker. A $12{\times}9$ incomplete Latin square design was employed with 12 experimental diets, 12 animals, and 9 periods. After a 5-d adaptation period, ileal digesta were collected on d 6 and 7 in each experimental period. Results: Values for apparent ileal digestibility of most indispensable AA in three sources of SBM were greater compared with other test ingredients except HPDDG and canola meal (p<0.05). Pigs fed diets containing SBM sources had also greater SID of most indispensable AA compared with those fed diets containing other test ingredients (p<0.05) except for HPDDG and canola meal. There was no difference in the apparent ileal digestibility and SID of AA among sources of SBM. The TDDG had the least value for the SID of methionine among test ingredients (p<0.05). Conclusion: The SID of most AA in SBM, HPDDG, and canola meal were greater than those in sesame meal, perilla meal, copra meal, and TDDG.
An ${\alpha}$-D-galactosidase (${\alpha}$-D-galactoside galactohydrolase, EC 3. 2. 1. 22) from sunflower seed was purified by affinity chromatography using N-$\varepsilon$-aminocaproyl-${\alpha}$-D-galactopyranosylamine coupled to sepharose and its properties were examined. The specific activity of the purified enzyme, tested with p-nitrophenyl-${\alpha}$-D-galactopyranoside as substrate, was 291.66 units/mg protein, representing an 115-folds purification of the original crude extract. The final preparation obtained from by Sephadex G-25 chromatography showed a single band on SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The molecular weight was determined to be 42,000 by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis. The purified galactosidase showed maximum activity at pH 4.5 and 55$^{\circ}C$, and was stable in the pH and temperature ranges of 4.0 to 5.0 and 30 to 55$^{\circ}C$, respectively. The enzyme activity was inhibited by Ag$\^$2+/, Hg$\^$2+/ and Co$\^$2+/. The enzyme activity was not affected considerably by treatment with other metal compounds. The enzyme liberated galactose from melibiose, raffinose, copra galactomannan, guar gum and locust bean gum by TLC, and also the hydrolysis rate of substrate was compared by HPLC.
Bacillus licheniformis was grown in minimal nutrient medium containing 1% (w/v) of distillers dried grain with soluble (DDGS), palm kernel meal (PKM), wheat bran (WB) or copra meal (CM), and the enzyme activity of endoglucanase, ${\beta}$-glucosidase, xylanase and reducing sugars was measured to investigate a possibility of using cost-effective agricultural residues in producing cellulolytic and hemicellulolytic enzymes. The CM gave the highest endoglucanase activity of 0.68 units/mL among added substrates at 48 h. CM yielded the highest titres of 0.58 units/ml of ${\beta}$-glucosidase, compared to 0.33, 0.23, and 0.16 units/mL by PKM, WB, and DDGS, respectively, at 72 h. Xylanase production was the highest (0.34 units/mL) when CM was added. The supernatant from fermentation of CM had the highest reducing sugars than other additional substrates at all intervals (0.10, 0.12, 0.10, and 0.11 mg/mL respectively). It is concluded that Bacillus licheniformis is capable of producing multiple cellulo- and hemicellololytic enzymes for bioethanol production using cost-effective agricultural residues, especially CM, as a sole nutrient source.
This study was conducted to investigate the variation in nutrient composition of oilseed meals and to develop prediction equations for amino acid concentrations. Energy and nutrient contents were determined in a total of 1,380 feed ingredient samples including copra byproducts, corn distillers, dried grains with solubles, palm kernel byproducts, and soybean meal. The ingredient samples were imported to the Republic of Korea between 2006 and 2015. Data were analyzed using the MIXED procedure of SAS. The regression procedure of SAS was used to generate the prediction equation for the lysine concentration using the crude protein (CP) concentration as an independent variable. The concentrations of moisture, gross energy, CP, ether extract, crude fiber, ash, calcium, phosphorus, lysine, methionine, cysteine, and threonine in tested oilseed meals differed (P<0.05) depending on producing countries. The prediction equations for amino acid concentrations (% as-is basis) in the oilseed meals are: lysine = -1.08 + 0.080 × CP (root mean square error = 0.244, R2 = 0.924, and P<0.001); threonine = -0.297 + 0.044 × CP (root mean square error = 0.099, R2 = 0.958, and P<0.001). In conclusion, energy and nutrient compositions vary in the oilseed meals depending on the producing countries. Moreover, the crude protein concentration can be used as a suitable independent variable for estimating lysine and threonine concentrations in the oilseed meals.
A thermostable extracellular $\beta$-mannanase from the culture supernatant of a fungus Aspergillus niger gr was purified to homogeneity. SDS-PAGE of the purified enzyme showed a single protein band of molecular mass 66 kDa. The $\beta$-mannanase exhibited optimum catalytic activity at pH 5.5 and $55^{\circ}C$. It was thermostable at $55^{\circ}C$, and retained 50% activity after 6 h at $55^{\circ}C$. The enzyme was stable at a pH range of 3.0 to 7.0. The metal ions $Hg^{2+}$, $Cu^{2+}$, and $Ag^{2+}$ inhibited complete enzyme activity. The inhibitors tested, EDTA, PMSF, and 1,10-phenanthroline, did not inhibit the enzyme activity. N-Bromosuccinimide completely inhibited enzyme activity. The relative substrate specificity of enzyme towards the various mannans is in the order of locust bean gum>guar gum>copra mannan, with $K_m$ of 0.11, 0.28, and 0.33 mg/ml, respectively. Since the enzyme is active over a wide range of pH and temperature, it could find potential use in the food-processing industry.
Park, Sung-Kwon;Cho, Eun-Seok;Jeong, Yong-Dae;Sa, Soo-Jin
Korean Journal of Agricultural Science
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v.43
no.5
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pp.769-776
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2016
This study was conducted to investigate the digestibility of dry matter (DM) and nitrogen (N) in oilseed meals and distillers dried grains (DDG) fed to growing-finishing pigs. As experimental animals, eleven barrows (initial body weight, $71.7{\pm}17.0kg$) were housed in individual metabolism cages. The experimental design consisted of an $11{\times}8$ incomplete Latin square with 11 dietary treatments and 8 replication periods. The diets were individually formulated with dehulled soybean meal produced in Korea (SBM-KD), soybean meal produced in India (SBM-I), soybean meal produced in Korea (SBM-K), corn high-protein distiller dried grains (HPDDG), tapioca distillers dried grains (TDDG), canola meal (CAM), corn germ meal (CGM), copra meal (COM), palm kernel meal (PKM), sesame meal (SM), and perilla meal (PM). Pigs with SBM-KD and SBM-K showed greater (p < 0.05) intake of N than SBM-I, HPDDG, and PKM. Total feces output was decreased (p < 0.05) in SBMs (SBM-KD, -I, and -K), HPDDG, and CGM compared with TDDG, SM, and PM. The DM in excreted feces was decreased (p < 0.05) in SBMs and CGM compared to TDDG, SM, and PM. Similarly, the SM and PM fed to pigs resulted in greater (p < 0.05) fecal excretion of N than the others. Apparent total tract digestibility (ATTD) of DM in SBMs and CGM was greater (p < 0.05) than TDDG, SM, and PM. The SBMs fed to pigs showed higher (p < 0.05) ATTD of N than TDDG, COM, SM, and PM. In conclusion, our results provided nutritional information about various ingredients and would be useful to contain more precise amounts of nutrients included in feed ingredients of pig diet.
This study was performed to determine the estrous cycles by macroscopic observation of the ovarian changes using the laparoscopy and to make use of these results for embryo transfer in Korean black goat (Copra hircus aegagrus). Laparoscopic examinations of the ovaries were performed from 2 days after $CIDR^(R)$ removal to 22 days after ovulation. The serial morphological changes of follicles and corpus luteum (CL) were observed. CL was classified corpus hemorrhagicum(CH), corpus luteum (CL) and corpus albicans (CA) by its maturation and regression. On the day before ovulation (Day 0), Graafian follicles (GF) were found on one or both ovaries. On the day (Day 1) and $2^{nd}$day (Day 2) of ovulation, and ovulation depression (OD) and an early stage corpus hemorrhagicum $(CH_1)$ were observed at the site of GF, respectively. On Days 3 to 4, more developed and enlarged corpus hemorrhagicum $(CH_2\;and\;CH_3)$ arised from the ovulation of the GF with well vascularization. On Days 5 to 6, it was identified that mature corpus luteum $(CL_3)$ was grown on the ovary, and fully developed CL with adjacent follicles were occupied most part of the ovary on Days 17 and 18. Then the size of CL was diminished, and completely luteal regression $(CL_1\;or\;CA)$ with new large follicle was identified on Days 20 and 22. From these results, the 4 stages of the estrous cycle in Korean black goats were 1) estrus (Day 0) for 1 day, 2) metestrus $(Day\;1{\sim}4)$ for 4 days (stage of CH development), 3) diestrus $(Day\;5{\sim}16/17)$ for 12 or 13 days (luteal stage), and 4) proestrus $(Day\;17/18{\sim}20/22)$ for 4 or 5 days (stage of luteal regression and follicular growing). Laparoscopy for observation of ovarian changes was invasive than laparotomy. Additionally, it had advantages of reduced adhesion and quick operation time. It was considered that laparoscopic examination of ovarian changes will be useful for embryo transfer in the Korean black goats.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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