• 한국안광학회지
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• 제13권3호
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• pp.95-101
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• 2008

목적: 활성산소종의 하나인 $H_2O_2$는 DNA, RNA에 직접적인 손상을 주어 유전자를 변형시키고 세포고사를 일으켜 각종 질환을 일으키는 발병인자로 알려져 있다. 본 연구는 결막 세포주에서 일어나는 $H_2O_2$에 의한 세포고사에서 EGCG의 보호효과를 알아보고자 실험하였다. 방법: 세포의 생존율은 MTT assay로 확인하였고, 세포고사의 형태적인 특징은 DNA 단절화을 통해 확인하였으며, EGCG의 자유라디칼 제거능력을 측정하기 위해 DPPH free radical 소거능을 실시하고, 세포내 활성산소량의 평가를 위한 DCFH-DA assay를 시행하였다. 세포내의 mRNA 발현은 RTPCR을 시행하여 밴드 양상을 확인하였다. 결과: 세포생존율과 프리라디칼 소거능은 EGCG의 처리 농도 의존적으로 증가하였고, DNA 분절화와 세포내 활성산소량은 감소하였다. mRNA 합성에서 bcl-2, bcl-xL의 발현은 증가하였고, bax 발현은 감소되었다. 결론: EGCG는 $H_2O_2$로 세포고사를 유도한 결막 세포주에서 항산화효과를 나타냈으며, EGCG가 anti-apoptosis 관련한 mRNA의 발현을 증가시켜 결막 세포주의 산화적 손상을 억제함으로서 세포보호효과를 나타냈음을 확인할 수 있었다.

• 한국안광학회지
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• 제18권4호
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• pp.525-531
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• 2013

목적: 점안마취제 성분인 proparacaine hydrochloride (PPC)에 의한 결막세포주의 세포자연사와 이에 대한 epigallocatechingallate(EGCG)의 보호효과를 알아보고자 하였다. 방법: 동일한 조건으로 배양된 결막세포주에 Alcaine$^{(R)}$ 0.5%, PPC 0.5%, 그리고 0.01% benzalkonium chloride (BAC)을 각각 15분간 처리한 후, 추가적으로 12시간과 24시간 배양한 후 세 군으로 나누어 MTT assay와 LDH assay를 실시하였다. 배양된 결막세포주에 EGCG를 $10{\mu}M$의 농도로 3시간 동안 전 처리한 후 0.5% PPC를 15분간 추가 배양한 다음 유세포분석기를 이용한 세포자연사 정도를 측정하였다. 결과: Alcaine$^{(R)}$ 0.5%, PPC 0.5%, BAC 0.01%를 15분 동안 처리한 직후와 다시 12시간과 24시간 추가 배양한 결과 모든 군에서 세포생존율이 증가하지 않았다(p<0.05). 0.5% PPC 단독처리군($32.2{\pm}2.0%$)에 비해 $10{\mu}M$의 EGCG 3시간 전 처리하고 PPC 0.5% 후 처리한 군(68.2%)에서 세포 생존율은 더 높아졌다. 또한 PPC 0.5% 처리한 군에서 유도된 세포자연사는 EGCG 첨가로 감소되었다. 결론: 점안마취제인 PPC에 EGCG를 전처리함으로써 세포생존율을 증가시키고, 세포자연사를 억제함으로서 EGCG는 세포보호 효과가 있는 것으로 나타났다.

• 운동영양학회지
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• 제23권4호
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• pp.14-22
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• 2019

[Purpose] Here, we aimed to determine the effect of Polygonum cuspidatum stem extract (PSE) on exorbital lacrimal gland-excised rat models and hyperosmotic stress-stimulated human conjunctival cells (HCCs). [Methods] Seven week old male Wistar rats were divided into six groups. Only the rats in the control group (NOR, n=5) did not undergo surgery. Three days after the surgery, the exorbital lacrimal gland-excised rats were randomly allocated to five groups: (1) vehicle-treated dry-eyed rats (DED, n=5); (2) PSE (10 mg/kg) treated DED rats (PSE-10, n=5); (3) PSE (100 mg/kg) treated DED rats (PSE-100, n=5); and (4) PSE (250 mg/kg) treated DED rats (PSE-250, n=5). In addition, the HCC line was co-treated with hyperosmolar media (528 mOsm) and PSE (1-100 μg/ml). [Results] PSE treatment restored the tear volume and goblet cell density by inhibiting severe corneal irregularities and damage. The treatment with PSE significantly attenuated the hyperosmolar stress-induced inflammation and cell death through the suppression of mRNA expression levels of Tumor necrosis factor-α (TNF-α), Interleukin-6 (IL-6), Interleukin-1β (IL-1β), and Interferon-γ (IFN-γ), and the expression of Bcl-2-associated X protein (Bax) as well as the activation of caspase-3 in vitro. [Conclusion] The inhibitory effects of PSE treatment on dry eye disease indicate the potential of nutritional intervention by PES against inflammatory diseases without adverse effects.

• 한국안광학회지
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• 제12권3호
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• pp.19-25
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• 2007

현재 시중에서 유통되고 있는 소프트 콘택트렌즈 관리용액인 다목적용액(Multi Purpose Solution, MPS)이 결막세포주(Clone 1-5C-4 cell line)에 미치는 증식저해정도와 가토안의 각막상피 및 내피조직에 미치는 손상정도를 비교 관찰하고자 시행하였다. MPS는 $ReNu^{(R)}$ (Baush & Lomb, USA), Opti-free $express^{(R)}$ (Alcon, USA), Free-sol $plus^{(R)}$ (Hanamedicon, Korea)를 사용하였다. 세포증식 저해율은 결막세포주를 배양 한 후 MTT assay로 검정하였고, 형태학적으로는 광학현미경으로 Hematoxylin & Eosin staining 표본을 제작하여 관찰하였다. In vivo 실험은 백색 가토 9마리(18안)를 3군으로 분류하여 실험군인 좌안(9안)에는 각 MPS제품을, 대조군인 우안(9안)에는 보존제가 포함되지 않은 멸균생리식염수를 접안하였다. 일정기간 접안 후, 가토안의 각막표변을 Rose bengal로 염색하여 관찰하였고 각막상피 및 내피조직의 변화는 주사전자현미경(Scanning Electron Microscopy, SEM)으로 비교 관찰하였다.