• BMB Reports
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• 제36권2호
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• pp.173-178
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• 2003

Malignant melanoma is one of the most rapidly increasing cancer types, and patients with metastatic disease have a very poor prognosis. Detection of metastatic melanoma cells in circulation may aid the clinician in assessing tumor progression, metastatic potential, and response to therapy. Tyrosinase is a key enzyme in melanine biosynthesis. The gene is actively expressed in melanocytes and melanoma cells. Melan A is a differentiation antigen that is expressed in melanocytes. The presence of these molecules in blood is considered a marker for circulating melanoma cells. In this study, we analyzed the usefulness of this marker combination I evaluating the response to therapy in the blood of 30 patients with malignant melanoma. Circulating cells were detected by a reverse-transcriptase-polymerase-chain reaction. The tyrosinase expression was observed in 9 (30%) patients and Melan A in 19 (63.3%) patients before therapy. Following treatment, the tyrosinase mRNA was detected in only one patient, while Melan A transcripts were still present in 14 patients. We suggest that this molecular assay can identify circulating melanoma cells that express melanoma-associated antigens and may provide an early indication of therapy effectiveness.

• Journal of the Korean Wood Science and Technology
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• 제24권1호
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• pp.68-74
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• 1996

Present work was undertaken to investigate the origin of milled wood lignin(MWL) in the wood cell wall using immunocytochemical techniques, which can provide the information on the localization of specific antigens(MWL in the present study) to be examined. Spruce MWL dissolved in DMSO and emulsified with Freund adjuvant was injected directly into the mouse spleen. The animals were boostered at two-week intervals after the initial immunization. Blood samples were purified in standard procedures. The characteristics of antibodies against MWL were tested by indirect ELISA. Visualization of MWL was carried out using conventional indirect immunogold-labelling methods on the ultrathin sections of spruce wood. Immuno-TEM observations showed that the immunogold probes were selectively attached to secondary cell walls of spruce wood. The most intense labelling was frequently observed in the S2 layer. In contrast, gold labelling in the lignin-rich regions, such as middle lamella and cell corner was not found. The immuno-TEM provides an indication that spruce MWL originates from the S2 layer.

• Parasites, Hosts and Diseases
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• 제24권2호
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• pp.145-158
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• 1986

이 연구는 특이 단세포군항체를 이용하여 친화 크로마토그래피를 실시함으로써 유구낭미충의 낭액에 특이한 항원을 순수분리하고 분리한 항원의 진단용 항원으로서의 특성을 관찰하고자 실시하였다. 유구낭미충 낭액을 BALB/c 마우스에 면역시켜 얻은 비장세포와 마우스 형질세포종을 융합하여 얻은 하이브리도마세포가 분비하는 항체의 항원 결합특이성을 면역효소측정 법으로 먼저 관찰하였다. 하이브리도마 세포는 대부분(54.9%) 유구낭미충 낭액에만 반응하는 항체를 생산하였다. 그러나 낭액항원과 기타 기생충항원에 같이 반응하는 항체 또는 기타 기생충항원 한가지에만 반응하는 항체등을 분비하는 하이브리도마세포 집락도 있었다. 무한대 희석법으로 하이브리도마세포를 희석 분주하여 단세포배양을 하였다. 이 경우에도 배양액에 분비한 단세포군 항체는 낭액항원에만 반응하는 경우에 대부분이었으나 기타 기생충 항원에 반응하는 단세포군 항체도 얻을 수 있었다. 따라서 유구낭미충 낭액에는 낭액에 특이한 항원결정기 이외에 유구낭미충의 두절 및 낭벽항원, 무구조충 및 간흡충등과 같은 항원결정기도 갖고 있음을 알 수 있었다. 단세포군 항체중 낭액항원과 가장 높은 항원항체 반응을 일으키며 두절 및 낭벽항원에도 약한 반응을 보였던 단세포군 항체를 선택하고 이를 이용하여 친화 크로마토그래피를 시행하였다. 낭액항원은 순수분리항원(A-Ag) 및 단세포군 항체와 결합하지 않았던 단백질의 총합(U-Ag)으로 분리하였다. 폴리아크릴아마이드 젤 전기영동법으로 낭액항원, A-Ag 및 U-Ag의 단백질 조성을 관찰한 바 낭액항원과 U-Ag는 6개의 band로 되어 있었으나 A-Ag은 band A 및 band C 두가지로 구성되어 있고 그중 대부분은 band C이었다. 순수분리한 A-Ag의 진단용 항원으로서의 가치를 면역효소측정법으로 관찰하였다. 낭액항원을 이용하여 혈청 및 뇌척수액내 IgG 항체가가 양성이었던 뇌유구낭미충증 환자에 대하여 A-Ag(같은 단백질함량)를 항원으로 면역효소측정법을 실시한 바 민감도는 낭액 항원이나 U-Ag에 비하여 70%로 낮아졌다. 그러나 낭액항원 및 U-Ag이 무구조충 감염자, 스파르가눔증 환자 및 체흡충증 환자에 대해 나타내는 교차반응이 A-Ag를 항원으로 사용하였을 때에는 모두 사라졌다. 이와같은 결과에서 단세포군 항체를 친화 크로마토그래피의 반응고리로 사용하여 순수분리한 항원은 유구낭미충 낭액항원중 특이한 항원결정기를 갖는 단백질로 구성되어 있음을 알 수 있었다. 그러나 순수분리항원은 유구낭미충증 환자의 혈청 및 뇌척수액에 존재하는 다세포기원 항체증 A-Ag의 특이항원결정기에만 반응하는 단세포군 항체 하나 또는 몇가지와만 반응하게 함으로써 특이성은 높아지나 혈청학적 민감도는 저하하였다고 판단하였다.

• 생명과학회지
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• 제29권7호
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• pp.824-835
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• 2019

최근 수십 년 간 종양 용해성 바이러스(Oncolytic viruses; OV)는 암 치료제로서의 잠재성에 의해 광범위하게 연구되어왔다. 종양 용해성 바이러스는 두 가지의 독특한 장점을 가지고 있는데, 첫째로 암세포만을 특이적으로 감염시키고 사멸시킬 수 있다는 것이고, 두 번째로는 암이 진행되는 초기 단계에 숨어서 인식되지 않는 상태인 종양 관련 항원들을 인식하는 특정한 적응 면역을 활성화 시키는 것이다. 2015년에는 유전자 변형 종양 용해성 바이러스인 Talminogene laherparepvec (T-VEC)이 미국 식약청(FDA)의 승인을 받았으며, 현재는 다양한 종양 용해성 바이러스들이 단일로 사용되거나 기존의 암 치료 방법인 면역 치료법, 방사선 치료법, 화학 치료법과 함께 사용되어 임상 시험에서 활성이 연구되고 있다. 종양 용해성 바이러스 치료법의 효능은 항 종양 면역 활성과 항바이러스 반응의 균형이 어느 정도인가에 의해 조절되기 때문에, 획기적인 성과에도 불구하고 암 치료를 위한 종양 용해성 바이러스의 개발은 전달 방법, 바이러스를 인식하는 신체 내 항체 및 종양의 복잡성, 가변성, 반응성에 따른 항바이러스의 면역 유도와 같은 다양한 장애물을 극복하여야 하는 문제가 있다. 종양 내에 직접 종양 용해성 바이러스를 투여하는 방법은 눈에 띄는 부작용이 없이 고형 종양을 줄이는 것에 성공하였으나, 아쉽게도 뇌종양 같은 일부 종양에는 사용할 수 없고 전신 투여가 필요한 단점이 존재한다. 이러한 장애물들을 극복하기 위해서 종양 용해성 바이러스의 효능을 높이기 위한 형질 전환 유전자의 삽입 혹은 면역 조절 물질과 바이러스를 조합하는 등의 다양한 전략들이 개발되고 있다.

• 대한세포병리학회지
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• 제16권1호
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• pp.47-51
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• 2005

Plasmablastic lymphoma (PBL) is a recently described aggressive B-cell neoplasm, which usually manifests as a localized disease of the oral mucosa in individuals infected with human immunodeficiency virus (HIV). Recently we encountered a case of plasmablastic lymphoma manifesting in the left maxillary sinus and cervical lymph node of a previously healthy HIV-negative man, 48 years of age. we conducted a fine-needle aspiration smear of the cervical lymph node, and this was found to be highly cellular with numerous large cells exhibiting eccentrically positioned nuclei, prominent nucleoli, and moderate quantities of basophilic cytoplasm. A biopsy of the mass in the maxillary sinus evidenced diffuse growth of similar plasmablastic cells. These tumor cells were negative for the leukocyte common antigens, CD20, CD3, CD30, and EMA. However, the cells tested positive for CD79a and CD138/syndecan-1. The tumor cells also exhibited L-light-chain restriction. The Ki-67 proliferation index was measured at almost 100%. The patient was diagnosed with plasmablastic lymphoma. After three cycles of combination chemotherapy and radiotherapy, the patient went into complete remission, and currently remains in this state.

• Asian Pacific Journal of Cancer Prevention
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• 제13권7호
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• pp.3053-3059
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• 2012

Human epidermal growth factor receptor 2 (HER2) is a member of the epidermal growth factor receptor family of receptor tyrosine kinases that plays important roles in all processes of cell development. Their overexpression is related to many cancers, including examples in the breast, ovaries and stomach. Anticancer therapies targeting the HER2 receptor have shown promise, and monoclonal antibodies against subdomains II and IV of the HER2 extra-cellular domain (ECD), Pertuzumab and Herceptin, are currently used in treatments for some types of breast cancers. Since anti HER2 antibodies targeting distinct epitopes have different biological effects on cancer cells; in this research linear and conformational B cell epitopes of HER2 ECD, subdomain III, were identified by bioinformatics analyses using a combination of linear B cell epitope prediction web servers such as ABCpred, BCPREDs, Bepired, Bcepred and Elliprro. Then, Discotope, CBtope and SUPERFICIAL software tools were employed for conformational B cell epitope prediction. In contrast to previously reported epitopes of HER2 ECD we predicted conformational B cell epitopes $P1_C$: 378-393 (PESFDGDPASNTAPLQ) and $P2_C$: 500-510 (PEDECVGEGLA) by the integrated strategy and P4: PESFDGD-X-TAPLQ; P5: PESFDGDP X TAPLQ; P6: ESFDGDP X NTAPLQP; P7: PESFDGDP-X-NTAPLQ; P8: ESFDG-XX-TAPLQPEQL and P9: ESFDGDP-X-NTAPLQP by SUPERFICIAL software. These epitopes could be further used as peptide antigens to actively immune mice for development of new monoclonal antibodies and peptide cancer vaccines that target different epitopes or structural domains of HER2 ECD.

• 대한수의학회지
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• 제33권2호
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• pp.217-225
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• 1993

조류 로타바이러스 감염 음성인 1일령, 7일령, 14일령 그리고 21일령된 칠면조에 조류 로타바이러스를 인공감염시킨 후 소장에서의 바이러스의 분포, 배출 그리고 소장의 흡수기능을 조사하였다. 1일령, 7일령 그리고 14일령의 칠면조는 조류 로타바이러스에 대한 혈중모체이행항체의 존재에도 불구하고 로타바이러스 감염에 민감하였다. 인공감염된 칠면조는 경미한 임상증상을 보였으며 십이지장, 공장 그리고 회장의 성숙된 용모상피세포에서 바이러스가 검색되었다. 병리조직학적인 소견으로서는 상피세포에 공포가 형성되었으며 호중구의 침윤이 관찰되었다. 조류 로타바이러스에 인공감염된 14일령 칠면조에서 감염후 1일과 3일에 D-xylose흡수기능은 대조군과 비교하였을 때 유의성이 인정되었다.

• 한국임상수의학회지
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• 제28권3호
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• pp.297-302
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• 2011

조류병원성 대장균 (APEC)은 가금에서 많은 장관외 질병을 야기한다. 병원성 인자 중 하나인 P-fimbriae 또한 질병과 밀접하게 관련되어 있다. 이번 연구에서 마우스에 P-fimbriae의 subunit 들인 PapA와 PapG를 발현하는 재조합 약독화 Salmonella Typhimurium 백신균주 접종 후 APEC 방어에 필요한 면역반응 유도 여부를 알아보기 위한 실험을 수행하였다. 각 백신 균주로 경구 접종 후 각 항원에 대한 serum IgG 항체 역가는 접종 후 4주째부터 대조군에 비해 항체 역가가 높게 유도되기 시작하여 실험이 끝날 때까지 높은 항체 역가가 계속 유지 되었다. 한번 접종 된 경우보다 추가 접종 된 군에서 보다 높은 항체 역가가 관찰되었다. 더불어 각 항원에 대한 mucosal IgA 역가 또한 높게 유도되었다. 두 균주를 혼합하여 접종 하였을 경우에는 각 백신 균주를 접종하였을 경우보다 높은 serum IgG와 mucosal IgA의 역가가 관찰되었다. 이 결과는 이들 백신 균주가 면역원성이 있음을 확인하는 결과였다. 또한 helper T cells type을 알아보기 위해 IgG1과 IgG2a의 항체 역가를 측정하여 본 결과 각 백신 균주를 접종하였을 경우에는 IgG2a의 항체 역가가 IgG1의 항체 역가 보다 월등히 높은 이들 백신 균주를 접종 하였을 경우에는 Th1-type의 면역 반응이 유도되지만 두 백신 균주를 혼합 접종하였을 경우에는 Th1-과 Th2-type 모두를 유도하는 것으로 관찰되었다. 이 결과를 통해서 이들 두 백신 균주를 혼합 접종 하였을 경우에는 세포성 면역뿐만 아니라 체액성 면역 모두를 유도할 수 있음을 확인할 수 있었다.

• 동의생리병리학회지
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• 제20권1호
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• pp.163-170
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• 2006

Nardostachyos Rhizoma (N. Rhizoma) belonging to the family Valerianaceae has been anti-arrhythmic effect, and sedation to the central nerve and a smooth muscle. We reported that the water extract of N. Rhizoma induced apoptotic cell death and differentiation in human promyelocytic leukemia (HL-60) cells. Cytotoxicity of N. Rhizoma was detected only in HL-60 cells (IC50 is about 200 ${\mu}g/ml$). The cytotoxic activity of N. Rhizoma in HL-60 cells was increased in a dose-dependent manner. We used several measures of apoptosis to determine whether these processes were involved in N. Rhizoma-induced apoptotic cell death. The high-dose (200 ${\mu}g/ml$) treatment of N. Rhizoma to HL-60 cells showed cell shrinkage, cell membrane blobbing, apoptotic bodies, and the fragmentation of DNA, suggesting that these cells underwent apoptosis. Treatment of HL-60 cells with N. Rhizoma time-dependently induced activation of caspase-3, caspase-8, and caspase-9 and proteolytic cleavage of poly(ADP-ribose) polymerase. Also, we investigated the effect of N. Rhizoma on cellular differentiation and proliferation in HL-60 cells. Differentiation and proliferation of HL-60 cells was determined through expression of CD11b and CD14 surface antigens using flow cytometry and nitroblue tetrazolium (NBT) assay, and through analysis of cell cycle using propidium iodide assay, respectively. N. Rhizoma induced the differentiation of HL-60 at the low-dose (100 ${\mu}g/ml$) treatment, as shown by increased expression of differentiation surface antigen CD11b, but not CDl4 and increased reducing activity of NBT. When HL-60 cells were treated with N. Rhizoma at concentration of $50{\mu}g/ml\;and\;100{\mu}g/ml$, NBT-reducing activities induced approximately 1.5-fold and 20.0-fold as compared with the control. In contrast, HL-60 cells treated with the N. Rhizoma-ATRA combination showed markedly elevated levels of 26.3-fold at $50{\mu}g/ml$ N. Rhizoma-0.1 ${\mu}M$ ATRA combination and 27.5-fold at 50 ${\mu}g/ml$ N. Rhizoma-0.2 ${\mu}M$ ATRA combination than when treated with N. Rhizoma alone or ATRA alone. It may be that N. Rhizoma plays important roles in synergy with ATRA during differentiation of HL-60 cells. DNA flow-cytometry indicated that N. Rhizoma markedly induced a G1 phase arrest of HL-60 cells. N. Rhizoma-treated HL-60 cells increased the cell population in G1 phase from 32.71% to 42.26%, whereas cell population in G2/M and S phases decreased from 23.61% to 10.33% and from 37.78% to 33.98%, respectively. We examined the change in the $p21^{WAF1/Cip1}\;and\;p27^{Kip1}$ proteins, which are the CKIs related with the G1 phase arrest. The expression of the CDK inhibitor $p27^{Kip1},\;but\;not\;p21^{WAF1/Cip1}$ were markedly increased by N. Rhizoma. Taken together, these results demonstrated that N. Rhizoma induces apoptotic cell death through activation of caspase-3, and potently inhibits the proliferation of HL-60 cells via the G1 phase cell cycle arrest in association with $p27^{Kip1}$ and granulocytic differentiation induction .

• Advances in Traditional Medicine
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• 제5권3호
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• pp.216-230
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• 2005

Although the field of study in immune enhancing compounds is relatively new, natural products from plants represent a rich and promising source of novel molecules with immunomodulating properties, Microglial cells, the main immune effector cells of the brain, usually display a ramified morphology and low expression levels of immunologically relevant antigens such as MHC class I and class II. Since any compound which participates in activation of phagocytic cells contributes to the production of potentially toxic factors, the search for convenient in vitro test-systems and study of mechanisms of action of these agents are of great interest. Human blood polymorphonuclear (PMN) cells and primary microglial cells isolated from Sprague-Dawley rats were used as cellular screening tests for study of phagocytosis-stimulating action of immunomodulating agents. Numbers of phagocytic activity were evaluated by the phagocyte ingestion of yeast cells and NO-synthase activity, nitrite production, and nitroblue tetrazolium test were determined after phagocyte stimulation. It was possible to demonstrate that indexes of phagocytic activity can be used as quantitative indicators for measurement immunomodulating activity. As a positive control, Zymosan A-induced phagocytosis in both PMN cells and primary microglial cells was used. $IFN-{\gamma}$ (0.1 -1 U/ml) stimulated phagocytosis in PMN cells 1.2 times after 2 - 3 h incubation, although at higher concentrations (10 - 100 U/ml) it strongly inhibited phagocytosis. In a similar way, at higher concentrations, $IFN-{\gamma}$ (100 - 500 U/ml) suppressed phagocytosis in zymosan-A stimulated microglial cells. When Polypodium leucotomus, cambricum and vulgare extracts were tested alone, increased levels of phagocytosis were observed in PMN. In addition, microglial cells showed both increased phagocytosis and MHC class-II antigen expressions. Surprisingly, when PMN and microglia were treated with a combination of Polypodium and $IFN-{\gamma}$, phagocytosis was not inhibited. We did not find changes in NO-synthase activity and nitrite production in both microglia and PMN cells activated by different immunomodulating agents. These results indicate that primary microglial cell cultures as well as human PMN cells can provide reproducible quantitative results in screening phagocytic activity of different immunoactive compounds. Furthermore, both inhibitory or activation mechanisms might be studied using these in vitro experimental approaches.