Cell behavior of the transformed cells is known to affect by interaction with extracellular matrix (ECM) proteins and integrin. To investigate the alterations of both integrin expression and cell-matrix interaction during neoplastic conversion of human oral kerationcytes, we studied expression levels of integrin subunits by flow cytometry and cellular responses to the ECM proteins in normal human oral keratinocytes (NHOKs), HPV-immortalized HOK-16B line, and three oral cancer cell lines established from HOK-16B line, CTHOK-16B-BaP, CTHOK-16B-DMBA, and CTHOK-16B-Dexa lines. The expression levels of ${\alpha}\;and\;{\beta}$ integrin subunits were shown decreased tendency in human oral keratinocytes undergoing immortalization and tumorigenic transformation except CTHOK-16B-DMBA line tested. Although ${\alpha}v{\beta}6$ integrin is known to be highly expressed in squamous cell carcinomas, and the altered integrin expression is suspected to be associated with cellular carcinogenesis, ${\alpha}v$ integrin subunit and ${\alpha}v{\beta}6$ integrin did not express in oral cancer cell lines tested. Cell behavior to the ECM proteins in HOK-16B line was generally similar to that of exponentially proliferating NHOKs. The adhesion activity profiles of type I collagen were very similar to that of its laminin counterparts, but fibronectin showed minimal adhesion activity under our conditions compared to the BSA control. The ability of the CTHOK-16B-BaP line to spread upon type I collagen and laminin markedly decreased, but migration was notably increased on type I collagen. In contrast, CTHOK-16B-DMBA and CTHOK-16B-Dexa lines spread less but migrated more upon type I collagen than immortalized HOK-16B line. These data indicate that downregulation of integrin subunits causes the changes of cellular responses to the ECM proteins during neoplastic conversion of human oral keratinocytes, and that cellular responses to the ECM proteins in oral cancer cell lines established by exposing different carcinogens are variable according to chemical carcinogens treatment.
Fluoride is one of the most potent stimulators of bone formation in vivo. But its direct effects on osteoblast is not yet clear This study was to investigate the effects of Sodium fluoride on alkaline phosphatase(ALP) activity, cAMP formation responsive to parathormone(PTH) and type I $\alpha$ 2 collagen ribonucleic acid (mRNA) level in Murin osteoblast-like (MC3T3-E1) cells. The cells were cultured in $\alpha-Minimal$ essential medium $(\alpha-MEM)$ supplemente with $10\%$ fetal bovine serum (FBS) and then changed to $0.1\%$ FBS with various concentration of Sodium fluoride. The ALP activity was assayed by the method of Lowry with disodium phenyl phosphated as substrate. cAMP formation was measured by Radioimmuno Assay(RIA). Type I $\alpha$ 2 collagen ribonucleic acid(mRNA) expression was studied by Nothern blot analysis. The results were as follows: 1. cAMP level was increased by PTH in MC3T3-E1 cells. 2. Sodium fluoride showed the tendency of inhibitory effects on cAMP responsiveness to PTH in MC3T3-E1 cells. 3. Sodium fluoride increased ALP activity at cocentration of $2{\mu}M,\;4{\mu}M,\;and\;10{\mu}M$ significantly different from control at the 0.001 level. ALP activity revealed maximum value at $10{\mu}M$ in this study. 4. Nothern blot analysis of Sodium fluoride treated cells, using Type I $\alpha$ 2 collagen prove, revealed significant increase at $10{\mu}M$ in MC3T3-E1 cells.
Park, Seung-Yong;Jung, Eun-Kyung;Joo, Nami;Shin, Hyun-Soo;Shin, Ji-Sun;Myoung, Da-Bin;Lee, Kyung-Tae
Journal of Dairy Science and Biotechnology
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제37권2호
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pp.136-153
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2019
The present study aimed to investigate the effects of skin care foods on the synthesis of pro-collagen type I C peptide and suppression of matrix metalloproteinase (MMP)-1 secretion through an in vitro study using fibroblasts (Hs68 cells) and keratinocytes (HaCaT cells). Among the three skin care foods developed in this study, three beans cookie and avocado yoghurt influenced the production of pro-collagen type I C peptide and suppressed MMP-1 secretion; however, tiger nut Galsu drink did not exhibit these effects. All skin care foods, including three beans cookie and plain yoghurt ($50{\mu}g/mL$, p<0.001) influenced the suppression of MMP-1 in addition to other commercially available breast milk production support foods examined, such as Heath Heather ($50{\mu}g/mL$, p<0.001), Happy Mama ($50{\mu}g/mL$, p<0.01), BioLys ($50{\mu}g/mL$, p<0.001), Enfamama ($25{\mu}g/mL$, p<0.0001), and Pregnagen ($25{\mu}g/mL$, p<0.001). Avocado fruit yoghurt ($25{\mu}g/mL$, p<0.05), avocado fruit jam yoghurt ($50{\mu}g/mL$, p<0.01), Enfamama ($100{\mu}g/mL$, p<0.05), and Pregnagen ($100{\mu}g/mL$, p<0.05) influenced the production of pro-collagen type I C peptide and suppressed MMP-1 secretion. This result indicates that only avocado jam yoghurt significantly influenced both the prevention of skin keratinization and acceleration of recovery of skin fibrous structure. Therefore, avocado is a favorable ingredient for nutrition-balanced dietary foods or an essential ingredient in products for revitalization of human skin.
It has been established that a graft of fibroblasts is able to improve wound healing. However, there has been no research on the effect of a graft of bone marrow stromal cells on wound healing. The wound healing process requires cell proliferation and production of extracellular matrix and various growth factors. The purpose of this study was to compare the abilities of human fibroblasts and bone marrow stromal cells, which contains mesenchymal stem cells, to proliferate and to produce collagen. Human bone marrow stromal cells and fibroblasts were isolated from bone marrow and dermis of the same patients and grown in culture respectively. Cell proliferation and production of type I collagen by human bone marrow stromal cells and dermal fibroblasts were examined by MTT method and by ELISA of cell culture media on day 1, 3, and 5 days post-incubating. The human bone marrow stromal cells showed 11-17% higher cell proliferation than fibroblasts at each time interval. The levels of type I collagen in the human bone marrow stromal cell group was also significantly higher than those in the fibroblast group. The results indicate that the grafts of human bone marrow stromal cells can show more promising effect than that of fibroblasts for healing of chronic wounds.
It has been known that adenine is a very important material in living cells. Because, adenine is a member of nucleotide base, so it takes part in DNA, RNA and ATP synthesis. There are many reports that adenine participated in ingredients, especially DNA, RNA, NADH and ATP, affect on the cell. As well adenosine, conjugated adenine to glycoside, was known to anti-wrinkle compound. But there is no report whether adenine shows a good effect on the skin, especially anti-wrinkle. So, in this study, we tested whether adenine affects cell proliferation, collagen synthesis, collagenase synthesis inhibition in human dermal fibroblasts. In addition, we performed clinical study with adenine cream. Cell proliferation effect was tested by MTT assay. Collagen and collagenase synthesis were measured by Immunoassay with ELISA kit. Clinical study was performed by IECK according to KFDA Functional Cosmetic method. The results of cell proliferation show that 10$^{-6}$ ~10$^{-8}$ % of adenine increases cell proliferation about 50 % compare with non-treated control. At 10$^{-7}$ ~10$^{-10}$ %, adenine increases type I collagen synthesis about 50%, decreases type I collagenase about 22% compare with non-treated control. The results of clinical study show that 0.05% adenine treated group reduces wrinkle significantly compare with placebo treated group. Therefore adenine may be a new anti-wrinkle candidate, through increases cell proliferation and collagen synthesis dramatically. And it decreases collagenase synthesis. So adenine could be used as a new anti-wrinkle agent.
성대결절, 폴립, 부종 등은 성대의 남용이나 과용등의 성대손상이 그 공통된 주된 원인으로 거론되고 있다. 하지만 음성치료를 비롯한 보존적 치료에 대한 반응이 서로 상이하며, H&E 염색을 이용한 병리조직학적인 감별이 곤란하여 진단에 혼돈이 있으며, 치료의 방침을 결정하거나 예후를 예측함에 있어서도 어려움이 있다. 양성성대질환은 기저막부 위와 세포외 간질에 주된 변화가 발생함이 알려져 있고, collagen type IV의 발현양상이 성대결절과 폴립에서 서로 다름에 대하여는 보고된 바 있으나 기타 점막하층의 골격유지를 주기능으로 하는 대표적 세포외간질인 collagen subtype에 대하여는 아직 보고된 바가 없는 실정이다. Collagen 발현의 차이를 연구하는 것은 상기질환의 병인을 이해하고 질환분류의 guideline을 제시하며 나아가 적절한 치료방범을 제시하는 데에 큰 의미가 있을 것으로 기대된다. Paraffin에 고정되어 있는 5례 이상씩의 성대결절과 성대폴립, 육아 종 및 라인케씨 부종 조직을 collagen type I부터 VII에 대하여 peroxidase kit를 사용하여 염색한 후 각 군간에 collagen 분포양상과 발현정도에 차이가 있는가 비교하였다.
Background: In an effort to find alternative therapeutic agents to prevent excessive fibrosis as a sequela to complicated parapneumonic effusion or empyema, we examined the effect of tissue plasminogen activator (tPA) as a fibrinolytic agent combined with talc or transforming growth factor (TGF)-${\beta}1$ in a human pleural mesothelial cell line, MeT-5A. Methods: MeT-5A cells were stimulated with various doses of talc, doxycycline or TGF-${\beta}1$ for 24 h and then were treated with tPA for an additional 24 h. Cell viability was measured by MTT assay. The production of interleukin (IL)-8 and vascular endothelial growth factor (VEGF) in the culture supernatants was measured by ELISA. Real-time PCR was carried out for measurement of type I collagen mRNA. Results: MeT-5A cells treated with talc showed a dose-dependent increase in production of IL-8. Talc also increased production of type I collagen mRNA at low doses, but talc did not influence the induction of VEGF. Addition of tPA to talc-stimulated cells showed further increases in the production of IL-8, but tPA did not influence the production of VEGF or type I collagen mRNA. TGF-${\beta}1$ increased the production of both VEGF and collagen type I mRNA, both of which were effectively inhibited by additional tPA treatment in MeT-5A cells. Conclusion: TGF-${\beta}1$ is a potent inducer of collagen synthesis without induction of IL-8 in MeT-5A cells. Addition of tPA after TGF-${\beta}1$ stimulation inhibited further fibrosis by direct inhibition of collagen mRNA synthesis as well as by inhibition of VEGF production.
본 연구는 우리나라의 수산가공율의 증가에 따라 부수적으로 증가되고 있는 수산부산물 내지는 폐기물을 효율적으로 이용하려는 연구의 일환으로서 어류의 비늘에 대한 성분을 분석하고 아울러 해산어와 담수어 유래의 비늘 사이에 서식환경에 따른 함유성분의 차이가 있는지에 관하여 검토하였다. 해산어와 담수어의 두 어종간에 있어서 함유하고 있는 성분의 차이는 거의 없이 대부분 일치하였으나 함량의 차이는 다소 다르게 나타났다. 숭어비늘의 일반성분 함량은 회분과 단백질이 거의 50%로 같은 비율로 분포하고 있는데 반하여 잉어비늘에서는 회분이 약 20% 그리고 단백질이 약 80%로서 단백질의 함량이 회분보다 약 4배 가량 높았다. 비늘에서 추출한 단백질은 그 아미노산 조성 및 전기영동패턴에 의해 콜라겐으로 확인되었으며, 또한 비늘 콜라겐의 $\alpha$1 a 및 $\alpha$2 사슬의 전기이동패턴은 대조구로 사용된 소껍질의 Type I 콜라겐의 그것들과 거의 똑같은 것으로 보아 비늘 콜라겐도 Type I으로 추측되었다. 그리고 숭어비늘의 경우에는 함유하고 있는 대부분의 단백질이 콜라겐인데 비하여 잉어비늘은 전체 단백질 중 약 53%만을 차지하고 있었다. 비늘로부터 추출한 조회분에 대한 원소분석 및 X-ray 회절분석에서는 그 주성분 hydroxyapatite로 확인되었으며, 시료간의 차이는 전혀 없이 거의 완전하게 일치하였다.
Objectives : Polygoni Multiflori Radix (PMR), the roots of Polygonum multiflorum Thunberg, is used to nourish the blood and yin and used for preventing premature greying of the hair. There are some articles on its preventing effects on the melanogenesis. However, there is no report about its effects on the collagen and elastin. The present study was designed to investigate its effects on collagen metabolism and elastase activity. Methods : The effects of PMR on type I procollagen production and collagenase activity in human normal fibroblasts Hs68 after UVB (312 nm) irradiation were measured by ELISA method. Cells were pretreated with the PMR for 24 hours prior to UVB irradiation. After UVB irradiation, cells were retreated with the sample and incubated for additional 24 hours. The amount of collagen type I was measured with a procollagen type I C-peptide assay kit. The activity of collagenase was measured with a MMP-1 human biotrak ELISA system. The elastase activities after treatment of PMR were measured as well. Results : In the present study, the collagen production was not increased. However, the increased collagenase activity after UVB damage was significantly recovered to $50.2{\pm}14.5%$, $8.2{\pm}3.1%$, and $10.0{\pm}3.3%$ (10, 30, and $100{\mu}g/ml$). The elastase activities (10, 100, and $1000{\mu}g/ml$) significantly reduced to $75.2{\pm}5.2%$, $40.3{\pm}1.2%$, and $27.0{\pm}1.9%$, respectively. Conclusion : PMR showed the inhibitory effects on collagenase and elastase activity. These results suggest that PMR may have potential as an anti-aging ingredient in cosmetic herbal treatment.
한국고분자학회 2006년도 IUPAC International Symposium on Advanced Polymers for Emerging Technologies
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pp.50-51
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2006
The nanofibrous scaffolds were obtained by co-electrospinning PHBV and collagen Type I in HIFP. The resulting fiber diameters were in the range between 300 and 600 nm. The nanofiber surfaces were characterized by ATR-FTIR, ESCA and AFM. The PHBV and collagen components of the PHBV-Col nanofibrous scaffold were biodegraded by PHB depolymerase and a collagenase Type I aqueous solution, respectively. It was found, from the cell-culture experiment, that the PHBV-Col nanofibrous scaffold accelerated the adhesion of the NIH 3T3 cell compared to the PHBV nanofibrous scaffold, thus showing a good tissue engineering scaffold.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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