이 연구는 비타민 C 결핍이 guinea pig에서의 실험적 치아이동속도와 치조골 개조에 미치는 영향을 알아보고자 시행되었다 이를 위하여 웅성 guinea pig 30마리를 대상으로 정상량의 비타민 C (5 mg/day) 를 투여한 군(정상군)과 결핍량(0.2mg/day)을 투여한 군(결핍군)으로 나누고 치아이동 실험을 시행하였다. 초기 교정력 75gm으로 상악의 좌우 중절치를 이개시키는 치아이동을 시행하고, 순차적으로 실험 경과기간이 지나면 치아이동양을 계측하고 희생시켜 조직 소견을 관찰하였다. 실험 결과. 결핍군에서 치조골과 치주인대의 교원섬유 함량은 현저한 감소와 불규칙한 배열을 보였으며 인대세포의 수적 감소 및 출혈이 관찰되었고 치조골에서 골형성의 감소와 파골세포의 출현 및 골소강의 크기증가와 골소강내의 다수의 파골세포가 관찰되었다. 정상군의 인장측 치조골은 치아이동 시간경과에 따라 조골세포와 골형성이 지속적인 증가를 보였으나, 결핍군에서는 조골세포가 감소하고 골형성은 미약한 양상을 보였다. 치아 이동양은 실험 초기 1일, 3일, 5일, 7일 결핍군의 치아이동양이 정상군보다 많게 나타났다 (p<0.05) 이상의 결과에서 비타민 C 결핍은 치주조직의 교원질의 합성을 억제하여 치조골의 형성을 감소시키고 흡수를 증가시키는 골개조를 초래하며, 치아이동중 인장측 치조골 형성을 억제하고 압박측 치조골 흡수를 촉진하여 치아이동 초기에는 빠른 치아이동을 가져오는 것을 시사한다.
한국응용약물학회 2003년도 Annual Meeting of KSAP : International Symposium on Pharmaceutical and Biomedical Sciences on Obesity
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pp.80-80
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2003
Insulin-dependent or Type 1 diabetes mellitus (IDDM) has been associated with an increased severity of periodontal disease. Since periodontal ligament (PDL) cells play a significant role in maintenance and regeneration of mineralized tissue, the success of procedures, such as guided tissue regeneration, is directly related to the ability of these cells to augment mineralized tissue. In this study, we investigated the time- and dose-dependent effect of high glucose on the proliferation and collagen synthesis of human periodontal ligament (PDL) cells. PDL cells were treated with high glucose (22mM, 33mM, 44mM) for 1 or 2 days. High glucose significantly inhibited proliferation of PDL cells as a time- and dose-dependent manner as evidenced by MTT assay. PDL cells were cultured in high glucose media (22mM, 33mM, 44mM) for 24 h. The ratio of collagen content to total protein was evaluated, and the gene expression of type I collagen was assessed by RT - PCR. The high concentration of glucose inhibited collagen synthesis, a marker of bone formation activity. This study indicated high glucose concentration could alter the metabolism of periodontal ligament cell, leading to alveolar bone destruction.
The native connective tissue attachment of the periodontium is known to be a complex consisting of gingival fibroblasts, periodontal ligament cells, gingival epithelial cells, cementum, alveolar bone and extensive extracellular matrix (collagen, glycoprotein and proteoglycans). The purpose of this study was to evaluate the effects of natural extracts on DNA, collagen and protein synthesis and inhibition of cytokine production in the gingival and periodontal ligament fibroblasts and gingival epithelial cells. Healthy gingival tissue was obtained from orthodontic treatment patients, and gingival epithelial cells, gingival fibroblasts and periodontal ligament cells were isolated and cultured from the samples. After treated with Ginseng protein, Pluronic F-68, Scutellariae Radix, centella asiatica, PDGF, IGF, DNA synthesis, total protein and collagen synthesis, and cytokine production of gingival epithelial cell, gingival fibroblast and periodontal ligamentcells were measured. MTT method for DNA synthesis, Peterkofsky and Dingerman method for total protein and collagen synthesis, and IL-1 ELISA kit for cytokine production were used. The proliferation of epithelial cells was enhanced in Centella asiatica, Ginseng protein, Pluronic F-68 and Scutellariae Radix. The activities of PDL cells were increased in PDGF, IGF, and Pluronic F-68. Higher collagen synthesis was observed in Scutellariae Radix and total protein synthesis was increased in Scutellariae Radix and PDGF. The inhibitory effects on IL-1, IL-6, $TNF-{\alpha}$ were observed in all exrracts.
본 연구는 치주인대 세포에 지속적이고 점진적 인장력을 가하여 치아 이동 시 형성되는 인장부위의 기계적 자극에 대한 생화학적 전달과 치조골 흡수와 생성 조절 기전을 이해하고자 하였다 치주인대 세포가 배양된 유연한 성장 표면을 가진 배지에 지속적이고 점진적인 인장력을 가하고 골흡수 인자인 $PGE_2$와 골형성 인자인 ALP의 생성량을 1 3 5. 12시간 후에 측정하여 정량비교하였고 파골세포 분화기전을 조절하는 OPG RANKL의 인자들과 matrix metalloproteinase(MMP)-1, -8, -9, -13, tissue inhibitor of matrix metalloproteinase(TIMP)-1의 인자들을 역전사 중합효소 연쇄반응 검사하여 m-RNA 발현을 비교한 결과 치주인대 세포에 인장력을 가한 경우 대조 군보다 $PGE_2$의 농도가 적었고 (p<0.05) ALP의 농도 변화는 없었으며 OPG의 mRNA 발현이 증가하였으나, RANKL의 mRNA 발현은 감소하였다 그리고 TIMP-1과 MMP-1 -8 -9, -13의 mRNA 발현이 대조군과 차이가 없었다. 이상의 연구에서 사람의 치주인대 세포는 점진적이고 지속적인 인장력에 대한 반응으로 $PGE_2$의 생성과 RANKL의 mRNA 발현은 감소하고 OPG의 mRNA 발현은 증가하여 골흡수를 억제하는 효과를 보이는 것으로 나타났다.
Platelet-rich fibrin (PRF) is a strong but flexible fibrin including a enrich platelet which contain growth factors and cytokines. PRF can be made very simply and requires no artificial additives unlike platelet-rich plasma. While PRF is remodeled and released in the tissue, this induces cell growth, vascularization, collagen synthesis, osteoblast differentiation and an anti-inflammatory reaction. Taking advantage of these functions, PRF can stimulate regeneration of bone and soft tissue in a diverse number of ways during the course of hemostasis, wound coverage, preservation, and reconstruction of alveolar bone. Moreover, the use of PRF to improve bone regeneration has become a recent technique in implantology. In this study, through a literature review of PRF's existing clinical applications, we classified a range of potential PRF oral and maxillofacial surgery applications including preservation of extraction sockets, guided bone graft, sinus lift, dressing and periodontal treatment. This trial gave us chance to confirm the usefulness of PRF. Recently, updated clinical studies results concerning skin and tendon wound healing have become available. These results suggest that the usage of RPF will gradually expand.
교정력이 치아에 가해지면 치주인대의 재생과 치조골의 개조가 일어난다. 치주인대 섬유아세포는 collagenase와 TIMP-1을 분비하여 치주조직의 교원질의 분해와 합성을 담당한다. 본 연구에서는 치주인대 섬유아세포예 기계적 자극과 interleukin-$1{\beta}$를 가해 collagenase와 TIMP-1의 발현을 RT-PCR과 면역조직화학 염색을 사용하여 알아보았다. 4명의 10대 남자 교정환자에게서 아무런 병소가 없는 제1소구치를 발치후 치주인대 섬유아세포를 배양하여 4-6세대의 세포를 사용하였다. 대조군, $Petriperm dish^{\circledR}$ 바닥의 표면적을 $5\%$ 증가시킨 기계적 자극을 가한 군, interleukin-$1{\beta}$를 1.0 ng/ml를 가한 군과 기계적 자극과 interleukin-$1{\beta}$를 같이 가한 군으로 나누어 4명의 환자에서 얻은 세포군을 각 군별로 2, 4, 8시간 후 RT-PCR을 시행하여 그 산물을 반정량하여 대조군에 대한 각 실험군의 상대적인 증감을 나타내었고, 24시간후 면역조직화학 염색을 시행하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 광학 현미경으로 세포의 형태를 관찰한 결과 대조군에서는 전형적인 별모양과 길쭉한 모양을 함께 보였으나 기계적 자극과 interleukin-$1{\beta}$를 각각 혹은 동시에 준 군들에서는 별모양의 세포가 사라지고 모양이 더욱 길어졌다. 2. collagenase는 대조군에 비해 기계적 자극과 interleukin-$1{\beta}$를 각각 혹은 동시에 준 군들에서 증가하였고, 실험 8시간 후에서는 interleukin-$1{\beta}$를 준 군, 기계적 자극과 interleukin-$1{\beta}$를 동시에 준 군에서 뚜렷한 증가를 보였다. 3. TIMP-1은 세포 자극 2, 4시간 후에는 대조군에 비해 기계적 자극과 interleukin-$1{\beta}$를 각각 혹은 동시에 준 군들에서 감소하였지만, 실험 8시간 후에서는 증가를 보였다. 4. 면역조직화학 염색을 통해 collagenase와 TIMP-1이 대조군에 비해 기계적 자극과 interleukin-$1{\beta}$를 각각 혹은 동시에 준 군들에서 더욱 강한 염색상을 나타내었다. 본 실험의 결과 섬유아세포는 외부 자극이 가해지면 collagenase와 TIMP-1의 발현 조절을 통해 치주인대 재생과 치조골의 개조에 영향을 미쳐 항상성을 유지하려고 함을 알 수 있었다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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