Purpose: To investigate the effects of simultaneous soft and hard tissue augmentation and the addition of polydeoxyribonucleotide (PDRN) on regenerative outcomes. Materials and Methods: In five mongrel dogs, chronic ridge defects were established in both mandibles. Six implants were placed in the mandible, producing buccal dehiscence defects. The implants were randomly allocated to one of the following groups: 1) control: no treatment; 2) GBR: guided bone regeneration (GBR) only; 3) GBR/PDRN: GBR+PDRN application to bone substitute particles; 4) GBR/CTG: GBR+connective tissue grafting (CTG); 5) GBR/VCMX: GBR+soft tissue augmentation using volume stable collagen matrix (VCMX); and 6) group GBR/VCMX/PDRN: GBR+VCMX soaked with PDRN. The healing abutments were connected to the implants to provide additional room for tissue regeneration. Submerged healing was achieved. The animals were euthanized after four months. Histological and histomorphometric analyses were then performed. Results: Healing abutments were gradually exposed during the healing period. Histologically, minimal new bone formation was observed in the dehiscence defects. No specific differences were found between the groups regarding collagen fiber orientation and density in the augmented area. No traces of CTG or VCMX were detected. Histomorphometrically, the mean tissue thickness was greater in the control group than in the other groups above the implant shoulder (IS). Below the IS level, the CTG and PDRN groups exhibited more favorable tissue thickness than the other groups. Conclusion: Failure of submerged healing after tissue augmentation deteriorated the tissue contour. PDRN appears to have a positive effect on soft tissues.
급속정중구개확장 후 봉합부에서의 골조직 변화를 관찰하기 위해 유성견 4마리중 1마리는 대조군으로, 3마리는 실험군으로 사용하여 상악골에 급속정중이개장치를 장착한 후 매일 아침, 저녁으로 2회전($180^{\circ}$)씩 활성화시켜 8일간 정중이개를 시킨 직후, 보정 14일후, 보정 28일후에 각각 희생시켜 정중구개봉합부를 절취하여 각각 통법에 따라 H-E 염색, Villanueva 염색, 염기성 인산분해효소 염색, tartrate저항성 산성분해효소 염색을 시행하여 봉합부를 광학현미경으로 관찰하곤 다음과 같은 결과를 얻었다. 1. 정중구개봉합 확장 직후, 교원섬유 다발은 신장되었고 조골세포는 비활성화된 양상으로 소수 관찰되었으며 소수의 골양조직도 관찰되었다. 또한 수평절단 표본에서는 TRAP 염색에 양성반응을 보이는 세포가 소수 관찰되었으나 전두절단 표본에서는 구개골의 성장방향에 따라 비강에 인접한 부위에서 TRAP 염색에 양성반응을 보이는 파골세포들이 다수 관찰되었다. 2. 정중구개봉합 확장 14일후, 교원섬유다발은 신장되었고 ALP 염색에 양성반응을 보이는 조골세포가 소수 관찰되었으며, 수평절단 표본에서는 TRAP 염색에 양성반응을 보이는 세포가 거의 관찰되지 않았으나 전두절단 표본에서는 구개골의 성장방향에 따라 비강에 인접한 부위에서 TRAP 염색에 양성반응을 보이는 파골세포들이 다수 관찰되었다. 3. 정중구개봉합 확장 28일후, 교원섬유다발은 대조군과 유사한 양상으로 배열되었고 ALP 염색에 양성반응을 보이는 조골세포가 다수 관찰되었으며 많은 양의 미성숙골이 형성되었고, 수평절단 표본에서는 TRAP 염색에 양성반응을 보이는 세포가 거의 관찰되지 않았으나 전두절단 표본에서는 구개골의 성장방향에 따라 비강에 인접한 부위에서 TRAP 염색에 양성반응을 보이는 파골세포들이 다수 관찰되었다. 이상의 결과를 종합해볼 때, 정중구개봉합부를 급속확장시킨 후 신생골 형성은 보정 14일이 지난 후부터 관찰되기 시작하였으며, 보정 28일이 지난 후에는 신생골형성이 훨씬 왕성하게 진행되었음을 관찰할 수 있었다.
Ursolic acid (UA) and Oleanolic acid (ONA), known as urson, micromerol and malol, are pentacyclic triterpenoid compounds which naturally occur in a large number of vegetarian foods, medicinal herbs, and plants. They may occur in their free acid form or as aglycones for triterpenoid saponins, which are comprised of a triterpenoid aglycone, linked to one or more sugar moieties. Therefore UA and ONA are similar in pharmacological activity. Lately scientific research, which led to the identification of UA and ONA, revealed that several pharmacological effects, such as antitumor, hepato-protective, anti-inflammatory, anticarcinogenic, antimicrobial, and anti-hyperlipidemic could be attributed to UA and ONA. Here, we introduced the effect of UA and ONA on acutely barrier disrupted and normal hairless mouse skin. To evaluate the effects of UA and ONA on epidermal permeability barrier recovery, both flanks of 8-12 week-old hairless mice were topically treated with either 0.01-0.1 mg/ml UA or 0.1-1 mg/ml ONA after tape stripping, and TEWL (Transepidermal water loss) was measured . The recovery rate increased in those UA or ONA treated groups (0.1 mg/ml UA and 0.5 mg/ml ONA) at 6 h more than $20\%$ compared to vehicle treated group (p<0.05). Here, we introduced the effects of UA and ONA on acute barrier disruption and normal epidermal permeability barrier function. For verifying the effects of UA and ONA on normal epidermal barrier, hydration and TEWL were measured for 1 and 3 weeks after UA and ONA applications (2mg/ml per day). We also investigated the features of epidermis and dermis using electron microscopy (EM) and light microscopy (LM). Both samples increased hydration compared to vehicle group from f week without TEWL alteration (p<0.005). EM examination using RuO4 and OsO4 fixation revealed that secretion and numbers of lamellar bodies and complete formation of lipid bilayers were most prominent $(ONA{\geq}UA>Vehicle)$. LM finding showed that thickness of stratum corneum (SC) was slightly increased and especially epidermal thickening and flattening was observed (UA>ONA>Veh). We also observed that UA and ONA stimulate epidermal keratinocyte differentiation via $PPAR\;\alpha$. Protein expression of involucrin, loricrin, and filaggrin increased at least 2 and 3 fold in HaCaT cells treated with either $ONA\;(10{\mu}M)$ or UA $(10{\mu}M)$ for 24h respectively. This result suggested that the UA and ONA can improve epidermal permeability barrier function and induce the epidermal keratinocyte differentiation via $PPAR\;{\alpha}$. Using Masson-trichrome and elastic fiber staining, we observed collagen thickening and elastic fiber elongation by UA and ONA treatments. In vitro results of collagen and elastin synthesis and elastase inhibitory activity measurements were also confirmed in vivo findings. These data suggested that the effects of UA and ONA related to not only epidermal permeability barrier functions but also dermal collagen and elastic fiber synthesis. Taken together, UA and ONA can be relevant candidates to improve epidermal and dermal functions and pertinent agents for cosmeseutical applications.
A new method of limb sparing by resection, extracorporeal irradiation and reimplantation has several theoretical advantages. This method preserves the mobility of a joint and avoids the problem of loosening or breakage of tumor prosthesis. This study involved using extracorporeal irradiated autogenous joint transplantation for reconstruction after en bloc resection, and observed the periods of functional union and histological changes in irradiated tissue of the knee joint. This study also aimed to clarify whether the degeneration of articular cartilage is induced in rabbits by a single 50Gy dose of irradiation at the knee joint. Twenty New Zealand rabbits about three kilograms were randomized into two groups of 10 rabbits each. In group 1, as control, we resected the knee joint followed by reimplantation without irradiation. Group 2 received extracorporeal irradiation on the resected knee joint followed by reimplantation. Following are the results of these observations. The osteotomy site showed external callus formation in the roentgenographic finding eight weeks after reimplantation. There was marked degenerative changes in the collagen fiber of the irradiated anterior cruciate ligament and meniscus during the fourth week, but new blood-vessel formation was observed in the vicinity. There was degenerative changes in the collagen fiber of articular cartilage treated extracorporeal irradiation at four and eight weeks in the scanning electron micrographic findings. These findings was in contrast to those of subchondral bone which showed decreased cellularity and empty lacuna at four and eight weeks. Autoradiography demonstrated active [$^3H$]uridine incorporation by irradiated chondrocyte at eight weeks after reimplantation. These results indicate that when destruction of the articular cartilage and soft tissue of the knee joint is not severe, extracorporeal irradiation and reimplantation can be used with several advantage in maintaining movement of the joint while avoiding problems of tumor prosthesis and rejection, and therefore extracorporeal irradiated autogenous joint transplantation can be used as a limb-sparing procedure for temporary biological spacer in the childhood bone tumor around the knee.
In order to observe metabolic effects of an oral conceptive, Norinyle, on female Guinea pig, the changes of ascorbic acid amount and alkaline phosphatase activity in the liver and serum were determined, and histochemical changes of the uterus were observed by microscopic and electronmicroscopic methods by administration of Norinyle with or without ascorbic acid. The results obtained are summerized as follows: 1) The metabolic changes were clearly influenced by the administration of Norinyle alone, but the changes were diminshed by administration of Norinyle with ascorbic acid. 2) The adimnistration of Norinyle influenced to increases the requirment of ascorbic acid in the liver. 3) The uterus weight of the Norinyle administered group was much increased, while the weight was less increased in the group of administered Norinyle with ascorbic acid than the control. 4) The Norinyle administration was brought about an atrophy of endometrium, of uterus especially, functional layer, that the formation of glands were inadequately and the fromation of basal layer and stroma were diminished. 5) An acute infarction on the all layers of the uterus was developed at 9th and 25th days of Norinyle administration and 20th day of Norinyle with ascorbic acid administration. 6) A hypertrophy of stromal and endovascular cells were observed on the groups administered of Norinyle alone(group II ) or Norinyle with ascorbic acid(group IV). 7) It was observed that amount of collagen fiber in the basal and muscular layeres of uterus were diminished under a microscopical observation by the special stained specimen on the Norinyle administered group, but the amount and distribution of reticulin fiber were not changed significantly. 8) The fille structure of outer functional layer of the uterus were significantly changed by administration of Norinyle which were shown irregurarity of nuclear membrane, poor development ana significant expansion of enaoplasmic reticulum, decreases of the amount of ribosome due to slip off, increases of the number of dense bodies, obvious formation of vaccule, an4 decreases the amount of collagen in inner and outer layer of the stroma. 9) The amount of ascorbic acid in the serum did not much changed but the amount in the liver was much decreased by the administration of Norinyle, And the administration of Norinyle with ascorbic acid induced for a significant diminishing on the changes of uterus which might be able to developed by the administration of Norinyle alone.
Nam, Jinhae;Choi, Sun-Young;Sung, Si-Chan;Lim, Hong-Gook;Park, Seong-Sik;Kim, Soo-Hwan;Kim, Yong Jin
Journal of Chest Surgery
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제45권6호
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pp.380-389
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2012
Background: Bovine pericardium is one of the most widely used materials in bioprosthetic heart valves. Immunologic responses have been implicated as potential causes of limited durability of xenogenic valves. This study aimed to determine the effectiveness of decellularization and ${\alpha}$-galactosidase (${\alpha}$-gal) to remove major xenoreactive antigens from xenogenic tissues. Materials and Methods: Recombinant Bacteroides thetaiotaomicron (B. thetaiotaomicron) ${\alpha}$-gal or decellularization, or both were used to remove ${\alpha}$-gal from bovine pericardium. It was confirmed by ${\alpha}$-gal-bovine serum albumin-based enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), high-performance anion exchange chromatography, flow cytometry, 3,3'-diaminobenzidine-staining, and lectin-based ELISA. The mechanical properties of bovine pericardium after decellularization or ${\alpha}$-gal treatment were investigated by tests of tensile-strength, permeability, and compliance. Collagen fiber rearrangement was also evaluated by a 20,000${\times}$ transmission electron microscope (TEM). Results: Recombinant B. thetaiotaomicron ${\alpha}$-gal could effectively remove ${\alpha}$-gal from bovine pericardium B. thetaiotaomicron (0.1 U/mL, pH 7.2) while recombinant human ${\alpha}$-gal removed it recombinant human ${\alpha}$-gal (10 U/mL, pH 5.0). There was no difference in the mechanical properties of fresh and recombinant ${\alpha}$-gal-treated bovine pericardium. Furthermore, the TEM findings demonstrated that recombinant ${\alpha}$-gal made no difference in the arrangement of collagen fiber bundles with decellularization. Conclusion: Recombinant B. thetaiotaomicron ${\alpha}$-gal effectively removed ${\alpha}$-gal from bovine pericardium with a small amount under physiological conditions compared to human recombinant ${\alpha}$-gal, which may alleviate the harmful xenoreactive immunologic responses of ${\alpha}$-gal. Recombinant ${\alpha}$-gal treatment had no adverse effects on the mechanical properties of bovine pericardium.
Lee, Ki Mo;Bang, Jihye;Lee, In Sun;Heo, Eun Jung;Kim, Bu Yeo;Kang, Hyung Won;Lyu, Yeoung Su;Jeon, Won Kyung
대한한의학회지
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제34권2호
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pp.20-28
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2013
Objectives: This study examined the effects of 8 types of herbal prescriptions prescribed to alleviate dementia symptoms in a rat model of arterial thrombosis induced by ferric chloride ($FeCl_3$). Methods: Thirty minutes before 35% $FeCl_3$ treatment, SD rats were intraperitoneally injected with the 8 types of herbal prescriptions, respectively. We tested the effects of the herbal prescriptions on time to occlusion (TTO) in an arterial thrombosis model using a laser Doppler flow meter. In addition, thrombus weight (TW) and collagen fiber damages were evaluated in the same condition. Results: Herbal prescriptions showed the following rank-order based on their TTO: Chong-myung-tang (CMT) > modified Jangwonhan 02 (LMK02) > Toki-shakuyaku-san (TSS) ${\geq}$ Oren-gedoku-to (OGT) ${\geq}$ Yokukansan (YKS). In particular, CMT (100 mg/kg, i.p.) and LMK02 (100 mg/kg, i.p.) delayed the TTO the most ($14.83{\pm}0.98$ and $13.67{\pm}1.03$ min, respectively) compared with the vehicle group ($7.95{\pm}0.78$ min, P<0.001). In addition, CMT, LMK02, and OGT treatment ($0.63{\pm}0.01$, $0.66{\pm}0.02$ and $0.67{\pm}0.01$ mg/mm, respectively) significantly reduced thrombus weight compared with the vehicle treatment ($0.78{\pm}0.03$, P<0.001) and also alleviated collagen fiber damage (CMT; $28.40{\pm}2.22$%, LMK02; $30.79 {\pm} 4.07$%, OGT; $26.20{\pm}1.48$%) in the vessels injured by $FeCl_3$. Therefore, CMT and LMK02 showed the greatest preventive activity in rat model of arterial thrombosis induced by $FeCl_3$. Conclusions: These results provide experimental evidence for traditional use of herbal prescriptions, suggesting that CMT and LMK02 extracts could be used to prevent vascular injury and thrombosis in the early stages of dementia.
Bang, Jihye;Lee, Ki Mo;Kim, Bu-Yeo;Lee, Jeong-Hwa;Lee, In Sun;Jeon, Won Kyung
대한한의학회지
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제34권2호
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pp.51-58
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2013
Objectives: The aim of this study was to examine the antithrombotic effects of the four herbal ingredients (Mume Fructus, MF; Santali Albi Lignum, SAL; Amomi Tsao-Ko Fructus, ATF; and Amomi Fructus, AF) of modified Jeho-tang (MJHT) in a ferric chloride ($FeCl_3$)-induced carotid arterial thrombosis model. Methods: Thirty minutes prior to a 35% $FeCl_3$ application, Sprague-Dawley (SD) rats were injected with saline, MF, SAL, ATF or AF (100 mg/kg, intraperitoneal injection), respectively. The effect of the MJHT ingredients was examined for time to occlusion (TTO) and thrombus weight (TW) in a $FeCl_3$-induced thrombosis model. Histological analysis was performed to examine the effect of the MJHT ingredients on collagen fiber damage using hematoxylin & eosin and Masson's trichrome staining. Results: Compared with vehicle treatment, MF, SAL and ATF treatment delayed TTO (vehicle, $8.11{\pm}0.60$ min; MF, $16.67{\pm}1.03$ min; SAL, $17.50{\pm}1.52$ min and ATF, $13.33{\pm}1.21$ min; P < 0.001) and inhibited thrombus formation (vehicle, $0.79{\pm}0.03$ mg/mm; MF, $0.61{\pm}0.07$ mg/mm; SAL, $0.57{\pm}0.03$ mg/mm and ATF, $0.72{\pm}0.02$ mg/mm; P < 0.001). In addition, each herbal ingredient of MJHT except for AF prevented the collagen fiber damage induced by a 35% $FeCl_3$ application. These results indicate that the MJHT ingredients MF ${\geq}$ SAL ${\geq}$ ATF ${\geq}$ AF possess antithrombotic activity in a $FeCl_3$-induced carotid arterial thrombosis. Conclusions: Altogether, these results are the first evidence that the MJHT ingredients MF, SAL and ATF have the ability to prevent vascular damage and thrombus formation in $FeCl_3$-induced carotid arterial thrombosis.
Shaving dust는 천연 피혁 제조 공정 중 두께 조절을 위해 발생하는 피혁 폐기물인 콜라겐 섬유로 크롬을 함유하고 있어 매립 시 환경오염 문제를 야기시킨다. 현재 유럽을 중심으로 다양한 국가에서 피혁 폐기물인 Shaving dust를 활용한 다양한 연구가 진행되고 있으며, 그 중 재생피혁(Bonded leather)은 천연 피혁 대체가능한 소재로 주목받고 있다. 재생 피혁은 바인더로 라텍스를 사용하여 다른 합성 피혁에 비해 내부 조직이 치밀하여 중량감이 높고 통기성이 저하되는 단점이 있어 열팽창성 Microsphere를 도입하여 내부 조직을 완화시켜 통기성 및 경량성 등 기능성을 개선하고자 하였다. 본 연구에서는 Shaving dust를 활용한 경량 재생피혁 제조에 관한 연구로, 열팽창성 Microsphere를 적용한 후 콜라겐 섬유의 내열성을 감안하여 100~120℃에서 발포시켜 그 경향성을 분석한 결과 120℃에서 8분간 처리하였을 때 가장 우수한 발포율을 나타내었고, 재생 피혁 단면의 SEM 분석을 통해 발포에 따른 내부 조직의 변화를 관찰하였다.
후천적진주종의 형성에 있어서 고막의 Shrapnell부분과 외이도후상부 상피의 상고 실내 침입 및 고막 중심성천공의 margin으로부터 상피가 침입하는 이른바 immigration설과 이밖에 metaplasia설이 있다. 임상적으로 진주종이 상고실에 형성된다는 사실은 알려져 왔으나 그 발생기전에 대한 해명은 충분하지 않는 실정이다. 연자 등은 최근에 중이수술을 시행한 진주종 170례에 대하여 검토를 가하였다. 수술소견에 있어서 진주종의 primary focus가 상고실에 있을 때 Shrapnell부위의 marginal 및 central perforation 2가지 형의 천공이 관찰되었으며 Prussak's space안으로 retraction 및 Rivinus notch의 골벽결손 등을 볼 수 있었고 진주종이 있었던 36례중 Shrapnell부위의 중심성천공을 동반한 경우 5례, Rivinus notch의 골벽이 결손된 경우와 Shrapnell부위의 후상부 marginal perforation이 있고 진주종을 형성한 경우 21례, 그중 Shrapnell부위의 중심성천공을 동반한 경우 3례였다. 결론적으로 상고실 진주종이 잘 생기는 이유는 1) 상고실은 염증성분필물을 배설하는 구씨관입구와의 거리가 있고 2) 고막 Shrapnell부위의 고유층은 collagen fiber가 긴장부에 비해서 엷고 탄력성섬유가 많기 때문에 표피층의 각화증식을 일으킬 경우 Prussak's space내로 retraction을 일으키기 쉽다. 3) Shrapnell부위의 상부에 위치한 Rivinus notch에 부착한 epidermis는 각화증식에 의하여 Rivinus notch margin과 여기에 부착하고 있는 고막연의 margin사이를 파괴하여 상고실로 상피가 침입하게 된다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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