Coagulase-negative Staphylococcus sp #39, isolated from raw-milk showed reduced susceptibility to vancomycin. The minimun inhibitory concentration for strain #39 was at 8$\mu\textrm{g}$ of vancomycin per ml. Transmitting electron microscopy displayed that this strain had a 2.5-3.5 times thicker cell wall than a vancomucin sensitive strain of Staphylococcus sp. The strain #39 also had an increased cell volume. These data indicate that the reduced susceptibility may be due to the thickness of the cell wall of the test strain.
A total of 251 clinical isolates (human origin, 43 strains and bovine udder origin 208 strains) of the Staphylococcus that fermented mannitol aerobically were tested for their ability to produce coagulase, DNase, and thermostable nuclease. Of these, 158 isolates coagulated human or bovine plasma, produced DNase, and thermostable, nuclease and were identified as St. aureous, 146 of which produced a 1+ to 3+ clot. The remaining 12 isolated produced a -clot in citrate treated plasma but produced 1+ to 3+ clot in ethylenedi-aminetetraacetic acid (EDTA) treated plasma. It was found that 7 coagulase positive isolates failed to produced thermostable nuclease. In these organisms, we found out of the clot formation is not by coagulase activity but utilization of citrate, because EDTA treated plasma is not coagulated. Among 93 isolates which did not coagulate citrate-or EDTA treated plasma and thermostable nuclease negative, 28 strains produced DNase were identified as St. epidermidis, and other strains were not identification further. It was found that thermostable nuclese production appears to be a consistent property of St. aureus and the test is easy to perform, is rapid became quite distinct within 2 to 4 hour, and is not influenced by as many factors and variations as the coagulase test.
We evaluated the performance of a novel screening test, PBP2a MRSA rapid kit (Dinona Inc., Iksan, Korea), for methicillin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA) based on a immunochromatographic assay. The test is able to detect penicillin-binding protein 2a (PBP2a) using the nasal specimens from health care workers. The nasal specimens were obtained from 69 healthcare workers and were incubated in enrichment broth followed eight hours incubatin in BHI with cefoxitin $4{\mu}g/mL$. These broth were tested by PBP2a Rapid Kit. The enrichment broths were also directly tested for tube coagulase using the conventional identification method. 19 of 22 MRSA showed positive results by PBP2a rapid test and direct coagulase test (the sensitivity for detection of MRSA, 86.36%). While, 8 of 47 non-MRSA showed false positive results for the two tests. All of the 8 non-MRSA which showed false positive were co-colonizing isolates with MRCNS and MSSA. In addition, 46 of 49 methicillin-resistant staphylococci (MRS) showed positive results for PBP2a MRSA rapid kit (the sensitivity for detection of MRS, 93.8%), and all of 20 non-MRS showed negative results (specificity, 100%). The combination of PBP2a MRSA rapid kit and direct coagulase test showed the good sensitivity for detection of MRSA from anterior nares but frequently showed false positive results from the co-colonizing carrier with MRCNS and MSSA.
A total of 129 clinical isolates of Staphylococcus species was characterized by the tests of coagulase production, haemagglutination, mannitol fermentation, DNase production and hemolysis. Ninety-nine out of them showed positive reactions to the tests, therefore they were identified as Staphylococcus aureus. The isolates showing positive reaction in haemagglutination test also showed 100% of tube coagulase positive reaction. The haemagglutination test was a reliable method for identifying Staphylococcus aureus in the clinical laboratory. S. aureus produced stronger hemolysis with human blood agar than with sheep blood agar. Antibiotic resistant S. aureus isolates(S-46, S-112, S-126) had 4 to 6 p]asmid DNA elements. The S-112 strain had 6 plasmid DNA elements(1.8, 2.2, 3.7, $26.3{\sim}50$, and 70 Mdaltons), the S-126 had 4 elements(2.6, 4.2, $4.6{\sim}60Md$), and the S-46 had 1 element(${\sim}100Md$). PPSA strain had 4 plasmid DNA elements(2.5, 4.2, $4.6{\sim}60Md$) and S. aureurs(ATCC) strain contained 9.4, 26.3 and ${\sim}50Md$ plasmid DNA elements.
황색포도상구균은 사람과 동물에서 화농성 질환과 위장관계 질환을 일으키는 세균으로 자연계에 널리 상재하며 식품으로의 감염이 일어날 수 있어 식중독의 원인이 된다. 이에 신속하고 정확한 황색포도상구균의 검출이 요구되는 실정이다. 본 연구에서는 상재균의 오염도가 다른 다양한 축산 가공식품과 비가공식품에서 황색포도상구균의 검출을 위해 표준 시험법인 배지법과 자체 개발한 real-time PCR법의 검출도를 비교하였고 황색포도상구균 coagulase 확인시험과 real-time PCR법을 활용한 colony PCR 확인 시험을 비교하여 균 동정 능력을 비교하였다. 상재균 수가 적은 식품인 우유와 소시지 그리고 상대적으로 상재균수가 많은 생 돼지고기와 야채 샐러드를 샘플로 선정하여 인위적으로 500 g 혹은 mL의 샘플을 25 g씩 20개의 시료샘플로 나누어 실험하였을 때에 최소한 한 개 이상 양성 결과가 나오도록 황색포도상구균을 접종하여 배지법과 realtime PCR법을 시행하여 검출능력을 비교하였다. 배지법에서 획득한 의심 집락의 확인 동정은 coagulase 시험과 realtime PCR법을 활용한 colony PCR 확인시험을 병행하여 비교하였으며 각각의 결과를 real-time PCR법으로 신속 검출한 결과와 비교하였다. 식품 내 상재균 수가 적은 축산 가공식품인 우유나 소시지 등에서 황색포도상구균을 검출할 경우에는 배지법의 coagulase 확인시험과 colony PCR 확인시험과의 유의차가 없었으며 colony PCR 확인시험을 이용한 확인동정 결과와 real-time PCR법을 사용한 24시간 신속 검출 결과 사이에도 역시 유의차가 없었다. 반면에 상대적으로 상재균수가 많은 비가공식품인 생 돼지고기나 야채 샘플에서는 coagulase 시험법을 사용한 황색포도상구균의 확인동정은 유효성이 매우 떨어졌으며 colony PCR 확인시험 결과와 유의적인 차이를 보였다. Real-time PCR법을 사용한 24시간 신속 검출법은 배지법의 coagulase 시험법의 양성 수보다 낮은 검출률을 보였으나 colony PCR 확인시험보다 높은 검출률을 보여 상재균 수가 높은 샘플에서도 배지법을 대체해서 사용할 수 있는 효율적인 방법임을 보여주었다. 이러한 결과를 종합해 볼 때 본 연구에서 개발한 realtime PCR법은 기존 배지법을 대체하여 24시간 이내에 신속하게 황색포도상구균을 검출할 수 있고 coagulase 확인 시험을 대체할 수 있는 방법으로 여겨진다.
본 연구는 기관절개술을 받은 환자의 기관절개부위에서 발견되는 포도상구균에 대해 povidon의 살균효과와 소독제 사용 횟수, 경과일수에 따른 변화를 관찰하는 것을 목표로 하고 있다. 연구대상은 2001년 1월 16일부터 2001년 2월 26일까지 D시내에 소재한 2개 종합병원의 신경외과 중환자실에 입원한 35명의 기관절개환자였으며, 수집된 자료는 SAS를 이용하여 백분율, t-test로 분석하였다. 연구결과는 다음과 같다. 포도상구균에 대한 povidone의 살균효과는 농도와 시간에 관계없이 강하게 나타났다. 1일 1회 소독 후 3일째부터 Staphylococcus aureus균이 검출되었고, 6일째에 가장 많이 검출되었다. Coagulase negative Staphylococcus균은 1일부터 3일까지는 거의 검출되지 않았으나, 4일째에 가장 많이 검출되었다. 소독횟수에 따른 균집락화 양상은 1일 1회 소독할 때보다 2회 소독시 황색포도상구균이 현저히 감소하였다. 항생제에 대한 Staphylococcus aureus와 Coagulase negative Staphylococcus의 내성검사를 한결과 Staphylococcus aureus는 Methicillin에서 72.7%, Imipenem에서 63.6%가 내성을 나타냈으며, Coagulase negative Staphylococcus는 Methicillin에서 37.5%, Imipenem에서 12.5%가 내성을 나타내었고, Vancomycin에는 모두 내성을 나타내지 않았다. 이상의 본 연구결과로써 기관절개환자의 절개부위에 대한 철저한 소독을 통해 병원감염을 예방할 수 있는 기초자료가 될 수 있는 것으로 사료되며, 다음과 같은 제언을 하고자 한다. 앞으로 더 많은 소독제와 다양한 균종과의 관계에 대한 연구가 시행되어야 할 것이며, 모든 의료인은 철저한 병원감염예방에 힘써야 할 것이다. 또한, 병원감염 예방과 간호 발전을 위한 소독전문인력을 양성하여 활성화시키는 것이 필요할 것으로 사료된다.
Wildlife is a bio-indicator of environmental pollution by antimicrobial resistant bacteria or genes, however, there is no information on antimicrobial resistance in wildlife-origin bacteria. This study aimed to investigate the normal microbiota of staphylococci and their antimicrobial resistance in wildlife that did not take any antimicrobials. After sampling and bacterial isolation/identification, antimicrobial resistance profiles were examined by broth microdilution test, Kirby-Bauer disc diffusion test and mecA genetargeted PCR. Of 90 isolates from wildlife, 83 were coagulase-negative staphylococci while only 7 were coagulase-positive staphylococci. Methicillin-resistance was found in 63 (70%) isolates and 35 of 90 (38.9%) isolates were multidrug-resistant staphylococci. When considering that all of the animals did not take any medication or contacted any medical device before the sampling, the results indicate significantly high prevalence of antimicrobial resistance in wild environments. Further study would be necessary to investigate the transmission route of antimicrobial resistance.
Milk samples were collected from a total of 418 quarters of 214 Holstein cows. Of these, samples which were positive on California Mastitis Test (CMT) and above 200,000 cells/ml by somatic cell counts were subjected to bacteriological examination and antimicrobial susceptibility test. Major pathogens responsible for mastitis included coagulase-negative staphylococci (34.3%), coagulase-positive staphylococci (21.5%), gran-negative rod (coliforms and noncoliforms: 12.6%) and Streptococcus spp. (8.4%). These strains were tested with 13 antimicrobial agents by the Kirby and Bauer standardized disc diffusion method. The isolated pathogens were mostly susceptible to amoxicillin and cephalothin, but were resistant to erythromycin.
인의학에서 메티실린 내성 포도상균주는 병원감염의 주요 원인균으로 보고되고 있지만 소동물에서 이에 대한 연구는 거의 없다. 본 연구에서는 2002년 8월부터 2003년 7월까지 개와 고양이에서 분리된 136개의 포도상구균 분리주 (coagulase 양성 87주, coagulase 음성 49주)에 대하여 항생제 감수성 검사와 이들 분리주에서 메티실린 내성 유전자인 mecA 분포상황을 조사하였다. 136개 분리주중 43주 (31.6%)가 mecA 유전자를 가지고 있었고, 유전자의 분포율은 균주에 따라 상당한 차이를 보였다. 43주의 mecA 양성균주 중 31주 (72.1%)가 oxacillin 내성을 보여 mecA 양성균주가 반드시 oxacillin 내성과 일치하는 것은 아님을 시사하였다. 그러나 mecA 양성균주일수록 oxacillin 내성율이 높았는데 S. intermedius의 71.4% (p<0.001), coagulase 음성균주의 경우 72.4%가 내성을 보였다 (p<0.001). 분리주의 94주(69%) 적어도 하나 이상의 항생제에 내성을 보였고 특히 31주(22.8%)는 4가지 이상의 항생제에 동시에 내성을 보였다. Penicillin 항생제에 내성율이 71.7%로 가장 높았다. 본 연구는 국내 소동물에서 mcA 양성균주가 존재하며, 이러한 균에 의해 유도된 감염증을 치료할 때 다제내성의 특성 때문에 항생제 선택의 폭이 매우 제한될 수 있음을 시사한다.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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