The family of ClpB protein is a molecular chaperone which protects cellular proteins from being aggregated upon exposure to severe environmental stresses in association with DnaK/DanJ/GrpE in the ATP-dependent manner. In a psychrophilic bacterium which survives at a subzero temperature, any functional role of cold-active ClpB protein can be rather crucial. In order to identify a ClpB encoding gene from a cold-adapted bacterium whose genome sequence has not been fully discovered, we have employed a series of PCR technologies, including a gradient PCR with homologous primers, an inverse PCR and a cassette PCR. The full sequence of PaclpB gene was successfully identified and compared with those of other psychrophilic species. We have further cloned the gene in E.coli expression systems and were able to induce PaClpB protein expression by IPTG, which help us understand a molecular mechanism for survival against extremely cold environments.
본 논문은 파일럿 심볼을 이용하여 WATM 시스템에 적합한 페이딩 보상기법을 제안한 것이다. WATM 시스템에 있어 이 보상기법의 성능을 분석하기 위해 비트오율(BER) 및 셀손실(CLP)을 시뮬레이션하였다. 그 결과로서 HEC 만에 의해 보상을 할 경우, 잡음환경하에서는 성능이 3 dB 이상 개선되나, 페이딩환경하에서는 전혀 이루어지지 않았다. 이에 반해, 제안된 보상기법을 도입함으로서 잡음환경에서는 I dB 이하의 미소한 성능열화를 가져오나, 페이딩하에서는 WATM의 BER 및 CLP 성능이 상당히 개선되어 K = 10 dB Rician 페이딩하 에서 CLP 성능을 만족하였다. 또한, 본 페이딩 보상기법은 HEC 또는 FEC와 함께 이용되면, 코드율의 개선과 함께 코덱의 하드웨어 규모를 효과적으로 줄일수 있을 것이다.
Kim, So-Jin;Park, Jin-Sook;Lee, Do-Won;Lee, Sun-Mee
Biomolecules & Therapeutics
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제24권4호
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pp.387-394
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2016
Sepsis, a serious clinical problem, is characterized by a systemic inflammatory response to infection and leads to organ failure. Toll-like receptor (TLR) signaling is intimately implicated in hyper-inflammatory responses and tissue injury during sepsis. Histone deacetylase (HDAC) inhibitors have been reported to exhibit anti-inflammatory properties. The aim of this study was to investigate the hepatoprotective mechanisms of trichostatin A (TSA), a HDAC inhibitor, associated with TLR signaling pathway during sepsis. The anti-inflammatory properties of TSA were assayed in lipopolysaccharide (LPS)-stimulated RAW264.7 cells. Polymicrobial sepsis was induced in mice by cecal ligation and puncture (CLP), a clinically relevant model of sepsis. The mice were intraperitoneally received TSA (1, 2 or 5 mg/kg) 30 min before CLP. The serum and liver samples were collected 6 and 24-h after CLP. TSA inhibited the increased production of tumor necrosis factor (TNF)-${\alpha}$ and interleukin (IL)-6 in LPS-stimulated RAW264.7 cells. TSA improved sepsis-induced mortality, attenuated liver injury and decreased serum TNF-${\alpha}$ and IL-6 levels. CLP increased the levels of TLR4, TLR2 and myeloid differentiation primary response protein 88 (MyD88) protein expression and association of MyD88 with TLR4 and TLR2, which were attenuated by TSA. CLP increased nuclear translocation of nuclear factor kappa B and decreased cytosolic inhibitor of kappa B ($I{\kappa}B$) protein expression, which were attenuated by TSA. Moreover, CLP decreased acetylation of $I{\kappa}B$ kinase (IKK) and increased association of IKK with $I{\kappa}B$ and TSA attenuated these alterations. Our findings suggest that TSA attenuates liver injury by inhibiting TLR-mediated inflammatory response during sepsis.
Park, Moo-Hyun;Kwon, Hyog-Young;Jung, Seung-Ha;Pyo, Suhk-Neung;Rhee, Dong-Kwon
대한약학회:학술대회논문집
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대한약학회 2002년도 Proceedings of the Convention of the Pharmaceutical Society of Korea Vol.2
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pp.336.1-336.1
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2002
HSP100/Clp family functions as molecular chaperone and ATP dependent protease. The Streptococcus pneumoniae ClpL. a homologue of bacterial ClpB and yeast cytosolic HSP 104. is one of major heat shock proteins but its biochemical properties are unknown. In this study. ClpL in Streptococcus pneumoniaewas characterized using histidine tagged recombinant ClpL. When ATP hydrolysis activity was compared in the presence or absence of a variety of nucleotides or divalent ions. either ATP or Mn$2^+$ ion was found to increase significantly the rate of ATP hydrolysis. Furthermore. glutaraldehyde cross-linking and subsequent native-PAGE analfysis showed that ClpL forms dimer. but in the presence of 4 mM concentration of $Mn^{2+}$ion as a cofactor for ATP hydrolysis and oligormerization in vitro.
많은 세균들은 환경적 스트레스에 대항하기 위해 세균 생존에 유용한 특정 유전자들의 전사를 유도하는 대체시그마 인자 RpoS를 활용한다. 세포 내 RpoS 단백질의 농도는 주로 ClpXP 단백질 분해효소의 조절을 통해 결정된다. RpoS를 ClpXP로 전달하기 위해서는 adaptor 단백질 RssB가 반드시 필요하다. Two-component-type response regulator RssB는 RpoS와 지속적으로 상호작용을 하지만, 다양한 환경변화에 의해 RssB-RpoS 상호작용이 억제되어 세균에서 RpoS 양을 증가시킨다. 본 총설에서는 최근까지 연구 된 RssB-RpoS 상호작용에 관여하는 RssB의 anti-adaptor 단백질 IraD, IraM, IraP 등의 조절인자들과 RssB의 N-terminal 수용체 도메인의 인산화에 대해 설명하고 요약하였다. 이러한 RssB의 정교한 활성을 통한 RpoS 분해조절 과정은 외부환경 스트레스로부터 보다 효율적으로 세균을 보호할 수 있다.
Cyclic AMP receptor-like protein (Clp), is known to be a global transcriptional regulator for the expression of virulence factors in Xanthomonas campestris pv. campestris (Xcc). Sequence analysis showed that Xanthomonas oryzae pv. oryzae (Xoo) contains a gene that is strongly homologous to the Xcc clp. In order to determine the role of the Clp homolog in Xoo, a marker exchange mutant of $clp_{xoo4158}$ was generated. Virulence and virulence factors, such as the production of cellulase, xylanase, and extracellular polysaccharides (EPS) and swarming motility were significantly decreased in the $clp_{xoo4158}$ mutant. Moreover, the mutation caused the strain to be more sensitive to hydrogen peroxide and to over-produce siderophores. Complementation of the mutant restored the mutation-related phenotypes. Expression of $clp_{xoo4158}$, assessed by reverse-transcription realtime PCR and clp promoter activity, was significantly reduced in the rpfB, rpfF, rpfC, and rpfG mutants. These results suggest that the clp homolog, $clp_{xoo4158}$, is involved in the control of virulence and resistance against oxidative stress, and that expression of the gene is controlled by RpfC and RpfG through a diffusible signal factor (DSF) signal in Xanthomonas oryzae pv. oryzae KACC10859.
Trolox is a hydrophilic analogue of vitamin E. The aim of this study was to investigate its effects on hepatic injury, especially alteration in cytochrome P450 (CYP)-dependent drug metabolism during polymicrobial sepsis. Rats were subjected to polymicrobial sepsis by cecal ligation and puncture (CLP). The rats were treated intravenously with Trolox (2.5 mg/kg) or vehicle, immediately after CLP. Serum aminotransferases and lipid peroxidation levels were markedly increased 24 h after CLP. This increase was attenuated by Trolox. Total CYP content and NADPH-P450 reductase activity decreased significantly 24 h after CLP. This decrease in CYP content was attenuated by Trolox. At 24 h after CLP, there was a significant decrease in the activity of these CYP isozymes: CYP1A1, 1A2, 2B1, and 2E1. However, Trolox differentially inhibited the decrease in CYP isozyme activity. Trolox had little effect on the decrease in CYP1A1 activity but Trolox significantly attenuated decreases in CYP1A2 and 2E1 activities. In fact, Trolox restored CYP2B1 activity to the level of activity found in control rats. Our findings suggest that Trolox reduces hepatocellular damage as indicated by abnormalities in hepatic drug-metabolizing function during sepsis. Our data also indicates that this protection is, in part, caused by decreased lipid peroxidation.
The purpose of this study was to investigate the quality characteristics and antioxidative effect of cookies prepared with Curcuma longa L. powder (0, 1, 2, 3, 4%) substituted for flour. The pH of cookie dough decreased significantly in response to the addition of all levels of Curcuma longa L. powder (CLP). However, there were no significant differences in dough values among the test groups. Furthermore, when the spread factor values were compared among the groups, they were found to be inversely proportional to the CLP concentration. In addition, Hunter's color L value significantly decreased with increasing CLP content, whereas the a and b values increased. According to textural measurements, substitution of 1~4% for CLP resulted in increased hardness, cohesiveness, springiness, and brittleness when the samples were compared to the control. The results of sensory evaluation showed that the cookies containing 2% CLP had the highest scores. The acid value, peroxide value, and thiobarbituric acid value were all lower in cookies with 2% and 3% CLP than in cookies made with 4% CLP and control cookies.
울금가루를 새로운 식품소재로 활용하고자 하는 연구의 일환으로 울금가루 첨가량을 달리하여 국수를 제조하고 그 품질특성을 조사하였다. 밀가루와 울금가루 혼합분의 물결합력과 breakdown은 울금가루 8% 첨가구에서 가장 높았으나, setback은 울금가루 8% 첨가구에서 가장 낮았다. 울금가루 첨가 국수의 조리 특성에서 무게, 부피 및 인장강도는 울금가루 8% 첨가구에서 가장 낮았고, 대조구에서 가장 높았으나, 탁도는 울금가루 8% 첨가구에서 가장 높았으며, 울금가루 첨가량이 증가할수록 높았다. 국수의 조리 전과 조리 후의 색도 및 물성의 변화에서 L값은 조리 전 생국수가 조리된 국수보다 높았으나, 색도의 a값 및 b값과 물성에서는 조리 전 생국수보다 조리된 국수에서 높았다. 색도의 L값과 물성의 탄력성 및응집성은 울금가루 첨가량이 증가할수록 낮아졌고, 색도의 a값 및 b값과 물성의 경도, 점착성 및 씹힘성은 울금가루 첨가량이 증가할수록 높아졌다. 울금가루 첨가량에 따른 관능검사에서 울금가루 4% 첨가구의 기호도가 가장 높았고, 울금가루 2% 및 8% 첨가구는 대조구보다 낮은 기호도를 보였다.
한국응용약물학회 2003년도 Annual Meeting of KSAP : International Symposium on Pharmaceutical and Biomedical Sciences on Obesity
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pp.77-77
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2003
Sepsis remains common surgical problems with high morbidity and mortality despite improvement in the management for septic patient. Although hepatocellular dysfunction occurs during sepsis, the mechanism responsible for this remains unclear. In sepsis, a state of severe oxidative stress is encountered, with host endogenous antioxidant defenses overcome. Therefore, the aim of this study was to determine the effect of a-tocopherol (AT) vasoregulatory gene expression during polymicrobial sepsis. Rats were subjected to polymicrobial sepsis by cecal ligation and puncture (CLP). AT (15 mg/kg) was intraperitonealy injected for 3 days prior to CLP. Blood samples were taken 24 h after CLP for measurement of the extent of hepatocellular damage. Liver samples were taken for RT-PCR analysis of mRNA for genes of interest: endothelin-l (ET-l), its receptors $ET_{A}$ and $ET_{B}$, nitric oxide synthases (iNOS and eNOS), cyclooxygenase-2 (COX -2), heme oxygenase-l (HO-l), and tumor necrosis factor-$\alpha$ (TNF-$\alpha$). The activities of serum alanine aminotransferase and lipid peroxidation level were significantly increased; an increase which was prevented by AT pretreatment. CLP significantly increased the mRNA levels of ET-1 and $ET_{B}$; an increase that was prevented by AT pretreatment. However, the level of $ET_{A}$ mRNA significantly decreased after CLP; a decrease that was not prevented by AT pretreatment. There were significant increases in the mRNA expression of iNOS, HO-l and COX -2 in CLP groups. This increase was prevented by AT pretreatment. The expression of eNOS and TNF-$\alpha$ mRNA significantly increased in CLP, which was not prevented by AT pretreatment. Our findings suggest that there was an imbalanced vasoregulatory gene expression in sepsis, and AT ameliorates this change through its free radical scavenging activity.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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