• 한국동물학회지
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• 제32권1호
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• pp.40-47
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• 1989

계배 근원세포의 배양 배지에 calcium ionophore A23187이나 EGTA를 배양 24시간에 첨가함으로서 초래된 세포내 칼슘 농도의 변화는 근원세포의 분화과정에 상당한 영향을 미쳤다. 배양 24시간에 A23187이나 EGTA를 첨가한 후 배양 48시간, 72시간, 및 96시간에 각각 세포를 [35S]methionine으로 1시간 표지시킨 후 수확하여 2차원 전기영동법으로 단백질을 분리시켰을 때, 일부 단백질은 배양 조건에 따라 합성 양상을 달리함을 보였다. 배양 24시간에 처리한 A23187과 calcium-activated neutral protease는 대조군에 비해 세포융합을 촉진시켰으나 동일 시기에 처리된 phosphoprotein을 정량함으로써 조사하였을 때, A23187이 배양 초기에는 대조군에 비해 약간 이 효소의 활성도를 높이는 효과를 보였으나 세포융합이 완성된 시기인 96시간에는 대조군에 비해 활성도를 높이는 효과를 보였으나 세포융합이 완성된 시기인 96시간에는 대조군에 비해 활성도의 차이를 나타내지 않았다. A23187 및 calcium-activated neutral protease에 의한 세포융합의 촉진, 그리고 A23187에 의한 protein kinase C 활성도의 증가가 모두 근원세포의 융합이 활발히 진행되는 시기인 배양 48-72 시간에 관찰됨을 볼 때, 세포내 칼슘의 농도는 protein kinase C 및 calcium-activated neutral protease와 상호연관을 가지면서 세포분화에 관여하는 것으로 사료된다.

• 한국동물학회지
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• 제32권2호
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• pp.163-175
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• 1989

철 운반 단백질인 Transferrin (Tf)은 계배 근원세포의 분화에 필요한 요소임이 이미 알려져 있다. 따라서 Tf이 작용하는데 필요한 Tf 수용체의 양적 증감은 근원세포의 분화와 깊은 관계가 있을 것으로 생각된다. 본 연구에서는 배양 근원세포의 분화 과정에서 Tf 수용체가 어떠한 변화를 겪는지 알아 보았다. Tf 수용체의 양을 알아보기 위해 세포 표면에 결합되는 125I-Tf의 양을 측정한 결과, Tf 수용체는 근원세포의 분화과정의 하나인 세포융합이 일어나기 약 12시간 전까지 그 양이 증가하다가, 그 이후 근원세포의 분화가 더욱 진행됨에 따라 급격히 감소함을 알 수 있었다. 한편, 근원세포의 융합을 억제하는 여러가지 융합억제제들에 의해서도 그 양이 조절되는 것을 알 수 있었다. 이와 같은 결과들은 통해 근원세포의 분화는 근원세포 표면의 Tf 수용체의 양과 조절되는 것으로 미루어 보아, 생체내에서도 근원세포의 분화에 따라 Tf 수용체의 변화가 있는 것으로 추정되었다.

• 한국동물학회:학술대회논문집
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• 한국동물학회 1998년도 한국생물과학협회 학술발표대회
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• pp.228.2-228
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• 1998

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• 한국동물학회지
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• 제31권3호
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• pp.207-217
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• 1988

배양 계배 근원세포의 분화에 미치는 계배추출물의 영향을 조사하고, 이 추출물로부터 근워세포의 분화에 필수적인 myotrophic protein(MP)를 순수분리하였다. 그리고 이 MP는 철 운반 단백질인 trsnaferrin과 동일하거나 또는 대단히 유사한 단백질임을 알 수 있었다. 이 단백질은 철을 근원세포에 공급하고 이 철근이 근원세포의 융합에 필수적인 역할을 하는 것으로 보인다. 또 계배추출물속에는 이 MP이외에 근원세포의 융합을 억제하는, 그리고 열에 비교적 안정한 단백질이 존재하다고 생각된다. 이 MP의 수용체(receptor)분석을 한 결과, 수용체의 수는 근원세포가 융합을 하고 나면 급속히 감소하는 것으로 나타났다. 그리고 근원세포의 내로의 철과 MP의 수송에는 약 10분이 소요되는 것으로 나타났다.

• 한국동물학회지
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• 제35권1호
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• pp.29-36
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• 1992

The present study describes the production of monoclonal antibodies against cultured chick myoblast to pursue critical proteins in muscle cell fusion. Among a panel of monoclonal antibodies, three, Mll-3H 13, Mll-3Hl8 and Mll-3H35 were inhibited movblast fusion. A single 101-kDa antigen reactive with monoclonal antibody Mll-3H35 was detected by radioimmu-noprecipitation or by immunoblotting. During the course of myogenesis, the level of the protein remarkably decreased as the cells there differentiated. These results suggest that the protein platys a direct role in the process of myoblast fusion mechanism.

• 한국동물학회지
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• 제27권3호
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• pp.151-164
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• 1984

근원세포의 융합에 관여하는 융합유도물질의 존재를 구명하기 위하여 계배의 근세포를 배양하면서, muscle-conditioned medium (MCM) 이 근원세포의 융합에 미치는 영향을 조사하고, 근원세포로부터 배양액 내로 방출되는 단백질을 분석하여 다음과 같은 결과를 얻었다. (1) MCM은 뚜렷한 융합촉진 효과를 나타냈으며, 이러한 효과는 첨가된 MCM의 농도가 층가함에 따라 증가하였다. (2) MCM의 융합촉진 효과는 주로 근원세포로부터 방출되는 융합유도물질에 의하여 일어나는 것으로 판단된다. (3) 배양근원세포로부터 분비되는 45,000달톤과 65,000달톤의 단백질이 융합 유도물질일 가능성이 높다.

• Molecules and Cells
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• 제21권2호
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• pp.294-301
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• 2006

We have previously reported that phosphorylation of eukaryotic elongation factor 2 (eEF2) is related to the differentiation of chick embryonic muscle cells in culture. In the present study, we found that eEF2 phosphorylation declined shortly after induction of differentiation of L6 myoblasts, when the cells prepare for terminal differentiation by withdrawing from the cell cycle. This decrease in phosphorylation was prevented by inhibitors of phosphoinositide 3-kinase (PI3-kinase) that strongly inhibit myoblast differentiation. We hypothesized that PI3-kinase plays an important role in myoblast differentiation by regulating eEF2 phosphorylation in the early stages of differentiation. To test this hypothesis, myoblasts were synchronized at in $G_2/M$ and cultured in fresh differentiation medium (DM) or growth medium (GM). In DM the released cells accumulated in $G_0$/$G_1$ while in GM they progressed to S phase. In addition, cyclin D1 was more rapidly degraded in DM than in GM, and eEF2 phosphorylation decreased more. Inhibitors of PI3-kinase increased eEF2 phosphorylation, but PI3-kinase became more activated when eEF2 phosphorylation declined. These results suggest that the regulation of L6 myoblast differentiation by PI3-kinase is related to eEF2 phosphorylation.

• 한국동물학회지
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• 제27권2호
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• pp.73-84
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• 1984

근원세포가 분화하는 과정에서 신경전달물질의 영향을 연구하기 위하여 배양한 근세포에 dopamine과 epinephrine을 처리하여 근원세포의 융합과 세포내 cAMP의 농도에 미치는 효과를 조사하였다. Dopamine $(3\\times10^{-5}M)$과 epinephrine $(3\\times10^{-5}M)$을 세포배양후 34시간에 처리했을 때 근원세포의 융합이 크게 억제되었으며, 특히 dopamine의 효과가 epinephrine보다 현저하게 나타났다. 한편, 세포내 cAMP농도는 dopamine과 epinephrine을 처리해도 거의 변화가 없었다. 근원세포의 분화에 cAMP가 관계하는지를 조사하기 위해 dbcAMP, $PGE_1$ 및 aspirin을 처리하였는데, dbcAMP $(1\\times10^{-4}M)$는 근원세포의 융합을 억제한 반면, $PGE_1 (3\\times10^{-6}M)$은 오히려 융합을 촉진하였고, PG 합성효소의 억제물질인 aspirin은 융합 억제효과를 보였다. Dopamine과 epinephrine이 근원세포의 융합과정에 작용하는 가능성있는 기작에 대해서 고찰하였다.

• 한국동물학회:학술대회논문집
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• 한국동물학회 1997년도 한국생물과학협회 학술발표대회
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• pp.194.1-194
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• 1997

No Abstract, See Full Text

• 한국동물학회지
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• 제36권3호
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• pp.433-438
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• 1993

본 연구를 통해서 근세포 융합과정에서 신호 전달물질의 가능성이 제기되고 있는 세포내 cGMP peak가 guanylate cyclase activity의 변화와 관련이 있으며, guanylate cyclase는 L-arginine: NO synthase에 의해서 촉진될 것임을 입증할 수 있는 간접적 증거를 제시한다. 즉, SNP는 근세포의 융합과 guanylate cyclase activity를 아울러 증가시키며, L-arginine: NO synthase inhibitor인 L-NG-monomethyl arginine은 biochemical differentiation에는 영향을 주지 않고 근세포 융합만을 억제한다. 이러한 결과들과 muthylene blue가 근세포의 융합만을 억제하면서도 biochemical differentiation에는 영향을 주지 않으며 guanylate cyclase activity를 억제하는 사실들을 종합해서 생각할 때, 근세포 융합에서 cGMP peak가 guanylate cyclase activity의 활성화와 관련이 있으며, L-arginine: NO synthase가 $Ca^2$+ influx와 guanylate cyclase 사이를 매개할 가능성을 암시한다.