Contents of nucleic acid metabolites, such as uracil, uridine and hypoxanthine in the unossified pilose antler of Cervus nippon Temminck var. mantchuricus Swinhoe and the frozen and dried meat of Theragra chalcogramma (Thallas) were determined by high-performance liquid chromatography. The amount of hypoxanthine in the water extract of the meat (39.2 mg %) was higher than that of the antler (24.6 mg %).
본 실험에서는 녹용 약침액의 항 골재흡수 속성을 조사하였다. PTH, $1,25(OH)_2D_3$와 IL-1을 각각 골재흡수 인자로 사용하여 생쥐의 두개골에서 osteoblast 세포를 격리, 배양, 그리고 자극시켰을 때 collagenolysis의 증가를 보였다. 두 가지를 동시에 사용한 결과, IL-1은 골재흡수성을 촉진시키고 재 흡수력을 생산하였다. In vitro에서의 세포독성 결과는 $1-200{\mu}g/ml$의 녹용 약침액 농도 분포에서 무세포독성을 보였다. 또한 녹용 약침액은 생쥐의 두개골 골아세포 내에서 PTH (2 unit/ml), IL-$1{\alpha}$ (1 ng/ml), $1,25(OH)_2D_3$ (10 ng/ml), IL-$1{\alpha}$ 및 IL-$1{\beta}$로 인해 유발된 collagenolysis에 대해서 대항하는 보호활동성을 나타내었다. 녹용약침액은 IL-$1{\alpha}$ 와 IL-$1{\beta}$로 인해 유발된 collagenolysis에 대항하는 보호활동성을 지녔다. DAS는 IL-$1{\alpha}$와 IL-$1{\beta}$로 인해 촉진된 골재 흡수력을 억제하는 효과를 보였다. 이와 같은 결과는 녹용약침액이 골다공증과 연관된 질환에 대해서 매우 안정적인 임상적 사용이 가능한 것을 관찰할 수 있으므로 추후 이와 관련한 지속적인 연구가 필요할 것으로 사료되었다.
Kim, Joo-Kyung;Lee, Seung-Deok;Jeong, Yong-Rae;Kim, Kap-Sung
Journal of Acupuncture Research
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제23권2호
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pp.73-90
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2006
Objectives : The effects of water extract of deer antler herbal-acupunture solution(DHS), prepared from the pilose antler of Cervus korea TEMMINCK var. mantchuricus Swinhoe (Nokyong), a traditional immunosuppressive and immune-activating Korean herbal- acupuncture, on collagen-induced arthritis(CIA:RA model) in mice was studied. Destruction of cartilage and bone are hallmarks of human rheumatoid arthritis, and controlling these erosive processes is the most challenging objective in the treatment of RA. Methods : We investigated the tissue protective effects of deer antler treatment using established murine collagen-induced arthritis(CIA) as a model. Potential synergy of low dosages of anti-inflammatory glucocorticosteroids and deer antler was also evaluated. Results : Treatment of established murine CIA with deer antler herbal-acupunture solution(DHS) $(10-50{\mu}g/day)$ suppressed disease activity and protected against cartilage and bone destruction. Although $10-50{\mu}g/day$ DHS had only a moderate effect on the inflammatory component of the disease activity, it strongly reduced cartilage pathology, as determined by histological examination. Serum cartilage oligomeric matrix protein(COMP) levels were significantly reduced, confirming decreased cartilage involvement. Histological analysis showed that bone destruction was prevented. DHS administration increased serum IL-1Ra levels and reduced anticollagen type II antibody levels. Treatment with low-dose $DHS(1{\mu}g/day)$ was ineffective in suppressing disease score, serum COMP or joint destruction. Synergistic suppression of both arthritis oseverity and COMP levels was noted when low-dose DHS was combined with prednisolone(0.05mg/kg/day), however, which in itself was not effective. Conclusion : DHS was shown to have the inhibiting effects against $IL-1{\alpha}-$ and $IL-1{\beta}-stimulated$ bone resorption. These results indicated that the DAS is not only highly stable and applicable to clinical uses in bone resorption, but also it will be served as a potent anti-inflammatory and anti-arthritic agents for treatment of human RA.
Objectives : The effect of water extract of the pilose antler of Cervus korean TEMMINCK var. mantchuricus Swinhoe (Nokyong), a traditional immuno-suppressive and immuno-activating Korean oriental medicine, on collagen-induced arthritis (CIA) mice model was studied. Identification of common Nokyong capable of affording protection or modulating the onset and severity of arthritis may have important human health implications. Methods : Nokyong has shown to possess anti-inflammatory and anticarcinogenic properties in experimental animals. In this study we determined the effect of DAE on collagen-induced arthritis in mice. Results : In three independent experiments mice given DAE in water exhibited significantly reduced incidence of arthritis (33% to 50%) as compared with mice given no DAE in water (84% to 100%). The arthritis index also was significantly lower in DAE-fed animals. Western blot analysis showed a marked reduction in the expression of inflammatory mediators such as cyclooxygenase 2 (Cox-2), $Interferon-{\gamma}\;(INF-{\gamma})$, and tumor necrosis factor ${\alpha}\;(TNF-{\alpha})$ in arthritic joints of DAE-fed mice. The neutral endopeptidase (NEP) activity was approximately 6-fold higher in arthritic joints of non-DAE-fed mice in comparison to nonarthritic joints of nonimmunized mice whereas it was only 2-fold higher in the arthritic joints of DAE-fed mice. Additionally, total IgG and type II collagen-specific IgG levels were lower in the arthritic joints of DAE-fed mice. Conclusion : Taken together our studies suggest that DAE may be useful in the prevention of onset and severity of arthritis.
Kim, Moo-Jin;Lee, Seung-Deok;Kim, Kyung-Ho;Byun, Hyuk;Kim, Kap-Sung
Journal of Acupuncture Research
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제23권2호
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pp.103-111
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2006
Objectives : Deer antler Water Extract(DAE), prepared from the pilose antler of Cervus korean TEMMINCK var. mantchuricus Swinhoe (Nokyong), a traditional immuno-suppressive and immuno-activating Korean herbal-acupuncture, is thought to play an important role in human bone remodeling. Methods : To determine whether DAE can induce the differentiation of resting zone chondrocytes(RC) or not, confluent cell cultures were pretreated for 24, 36, 48, 72, and 120hrs with DAE. At the end of pretreatment, the media were replaced with new media containing $10^{-10}{\sim}10^{-8}M\;1,25-(OH)_2D_3$ and the cells incubated for an additional 24hrs. Results : This second treatment was chosen because prior studies had shown that only the more mature growth zone chondrocytes(GC) respond to this vitamin $D_3$ metabolite. The effect of DAE pretreatment on cell maturation was confirmed by measuring alkaline phosphatase (ALPase)-specific activity. Changes in matrix protein synthesis were examined by measuring collagen synthesis, as well as $^{35}SO_4$ incorporation into proteoglycans. When RC cells were pretreated for 120h with DAE, treatment with $1,25-(OH)_2D_3$ caused a dose-dependent increase in ALPase-specific activity and collagen synthesis, however, the proteoglycan production was not affected. RC cells pretreated with $1,25-(OH)_2D_3$ responded like RC cells that had not received any pretreatment. Conclusion : These results indicate that DAE directly regulates the maturation of RC chondrocytes into GC chondrocytes. Therefore it was indicated that DAE may play a significant role in regulating chondrocyte maturation during endochondral ossification.
면역억제와 면역항진의 작용을 지닌 녹용(鹿茸)약침의 실험쥐에서의 type II collagen(CII)으로 유발된 관절염(CIA)에 대한 효과를 연구하였다. 본 실험에서 녹용(鹿茸)약침군과 생리식염수군을 대조군으로 하여 실험쥐에게 약침시술을 하였다. 녹용(鹿茸)약침이 CII에 작용하는 세포반응에 대한 효과를 검정하였는데, 대조군에서는 CII 유발주사 후 24일에 관절염이 관찰되었고, CIA의 정도가 점차적으로 심해졌다. 생리식염수 처리군과 비교해 24일 동안 하루에 한번 $50{\mu}g/kg$ 이상 용량의 녹용(鹿茸)약침은 CII 처리 T cell의 interleukin 2(IL-2)와 interferon-${\gamma}$($IFN-{\gamma}$) 생산능력을 억제했다. 또한 녹용(鹿茸)약침은 CII처리 임파절과 대식세포의 tumor necrosis facter ${\alpha}$($TNF-{\alpha}$)의 생산을 억제했다. 한편 CIA에 대한 약침효능의 지표는 녹용(鹿茸)약침을 14일간 하루에 한번씩 처리하면서, 소의 CII로 3주 간격으로 2번 유발접종을 실시하여 검정하였다. 첫 CII 유발접종과 동시에 일일 투여량 $100{\mu}g/kg$으로 14일간의 녹용(鹿茸)약침이 항체형성과 CII에 대한 지연형 과민성 뿐만 아니라 관절염의 증가도 막아주었다. 녹용(鹿茸)약침을 관절염 유발성 CII의 2차 접종과 동시에 시술한 결과, 관절염과 CII에 대한 면역반응을 억제하였다. 이에 저자는 CII로 유발된 관절염에 대한 녹용(鹿茸)약침의 억제효과에 대하여 보고하는 바이다.
Objective : Dear antler (Cervus korean TEMMINCK var. mantchuricus Swinhoe) used for traditional immunosuppressive and immuno-activating action. The effect of deer antler herbal-acupuncture(DAH) solution, prepared by water extract method, on cathepsin activities in bone tissues (cartilage and synovial) cells from mouse rheumatoid arthritis (RA) model was studied. The cysteine endoprotease cathepsin mediates degradation of the MHC class II invariant chain (Ii) in human and mouse antigen-presenting cells. The studies described here examine the functional significance of cathepsin inhibition on autoantigen presentation and organ-specific autoimmune diseases in a murine model for RA. Methods : An animal model for RA in BALB/c mice thymectomized 3 days after birth (3d-Tx) was constructed All 3d-Tx BALB/c mice developed autoimmune lesions in the bone tissue cells, starting at 3 weeks of age, and the disease mediated by CD4+ T cells was chronic and progressive. Significant inhibitory effects of DAH solution on cathepsin S and L were observed in each organ in a dose-dependent manner. Moreover, we confirmed that cathepsin S and L activity in each organ were clearly inhibited by DAB solution. When we examined the inhibitory effects of DAH solution against autoantigen-specific T cell responses in vitro, in regional lymph node cells, but not in spleens, from model mice, a significant inhibitory effect of DAB solution was observed in a dose-dependent manner. DAH solution do not block T cell proliferation to Con A, indicated that the dose of DAB solution 10 to $20\;{\mu}g/m{\ell}$ was sufficient to inactivate the autoantigen-specific T cell responses in vitro. In vivo therapeutic effects of DAB solution were examined in a murine model for RA, autoantigen-specific (C-II-specific) T cell response were significantly inhibited in LNCs from DAH solution-treated mice. Results : Iinhibition of cathepsin S and L in vivo alters autoantigen presentation and development of organ-specific autoimmunity in RA model. Conclusion : These data identify selective inhibition of cysteine protease cathepsin S and L as a potential therapeutic strategy for autoimmune disease process such RA. Thus, DAH solution will served as a potent anti-inflammatory and anti-arthritic agents for treatment of human RA.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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