고추 갈색점무늬병(Cercospor capsici)병원균의 균사특성과 포자형성 방법 조사하였다. C. capsici 병원균의 균사생장 적온은 $25^{\circ}C$이였고 $5^{\circ}C$ 이하와 $35^{\circ}C$ 이상에서는 균사생장이 일어나지 않았다. pH 4.0~pH 8.0의 넓은 범위에서 균사생장에 차이가 없었고 일장도 균사생장에는 영향을 주지 않는 것으로 나타났다. 분생포자 다량 형성 시키기는 배지로는 0.5% 고추잎배지가 가장 좋았으며 배지 상에서 포자를 다량으로 형성시키는 방법은 고추잎배지에 균사현탁액을 도말 한 후 2,3일간 $20^{\circ}C$에서 배양한 후 1ml/접시 살균수를 첨가하여 배지표면을 긁어 자극을 준 후 2, 3일정도 배양을 하면 포자형성이 양호하였다.
고추재배에서 갈색점무늬병에 의한 반점 황화 조기낙엽 등의 피해로 수량감소를 일으키고 있어, 이 병해에 대한 저항성 육종을 위해서 병원균의 인위접종에 의한 발병조건을 확립하고자 한다. 본 실험 결과, 발병온도는 접종 후 야간 15~$20^{\circ}C$/주간 20~$25^{\circ}C$에서 습실을 경과하는 것이 발병이 가장 양호하였다. 접종묘령은 접종 후 병반 형성수가 많으면서 낙엽이 적게되는 30~40일 유묘가 발병이 가장 좋았다. 고추 유묘에 포자현탁액으로 접종할 경우 3.4 ${\times}$$10^5$ conidia/ml 농도가 적당하며 접종 후 병반수로 저항성 정도를 조사할 때 20일까지 적당하였다.
진주지방 vinyl house에서 자란 고추잎에 생긴 병반(病斑)을 채집하여 병원균(病原菌)을 분리(分離)하였다. 분리(分離)된 병원균(病原菌)의 분생자종(分生子種)의 길이 $40{\sim}150\;{\mu}m$ 폭은 $4.5{\sim}7\;{\mu}m$이고 $3{\sim}15$개가 총생으로 형성(形成)하며 분생포자(分生胞子)의 길이는 $40{\sim}185{\mu}m$이고 폭(幅)은 $4{\sim}5{\mu}m$이었다. 이 병원균(病原菌)은 PDA에서 늦게 자라고 포자(胞子)가 잘 형성(形成)되지 않으며 잎에 형성(形成)된 병반(病斑)을 습실처리하면 분생포자(分生胞子)가 잘 형성(形成)한다. 병원성검정(病原性檢定)을 위하여 만점에 생긴 분생포자(分生胞子)를 가지고 포자현탁액을 가지고 접종(接種)하였더니 고추의 잎과 엽병에 채집된 병징과 같은 개구리눈 모양을 한 병반(病班)이보였다. 고추에서 분리(分離)된 병원균(病原菌)은 분생자종(分生子種)의 모양과 크기 분생포자(分生胞子)의 길이와 병원성(病原性)에 의(依)하여 Cercospora capsici Heald et. Wolf 로 동정(同定)되었다.
본 연구는 1990년부터 국내에서 채집하여 고려대학교 농생물학과 진균표본보관소(SMK)에 보존하고 있는 Cercospora 및 관련 속의 진균을 대상으로 분류학적 연구를 실시한 결과의 네 번째 보고이다. 이번에는 Cercospora 3종, Phacellium 1종 Pseudocercospora 2종, Pseudocercosporella 1종 및 Ramularia 3종에 대한 균학적 특징을 기재, 묘사하였다. 고추에서 Cercospora capsici, 꽃황새냉이에서 C. cardaminae, 느러진장대와 장대나물에서 C. nasturtii, 쇠별꽃과 별꽃에서 Phacellium episphaerium, 구기자나무에서 Pseudocercospora chengtuensis, 고욤나무에서 P. diospyri-morrisianae, 배추와 유채 및 냉이에서 Pseudocercosporella capsellae, 나도냉이에서 Ramularia armoraciae, 익모초에서 R. lamii var. lamii, 수영 및 소리쟁이에서 R. pratensis var. pratensis를 각각 동정하였다.
The actinomycete strain A 11 was antagonistic to plant pathogenic fungi Phytophthora capsid and Magnaporthe grisea. Based on the diaminopimelic acid (DAP) type and morphological characteristics examined by scanning electron microscopy, the strain A 11 was confirmed to belong to the genus Streptomyces. Based on Willcox probability and similarity level, the strain A 11 was numerically identified as Streptomyces flaveus using TAXON program of Ward and Goodfellow. Antibiotic production of S. flaveus strain A 11 was most favorable when cultured on glycerol yeast extract peptone (GYP) agar for 20 days at $28^{\circ}C$. The crude antibiotics from solid GYP agar cultures of the strain A 11 were most effective against Phytophthora capsici and Sclerotinia sclerotiorum among the fungi tested. Antifungal activity of the antibiotics against Alternaria solani, Botryosphaeria dothidea, Cercospora capsici, Magnaporthe grisea, and Rhizoctonia solani was somewhat high, whereas Colletotrichum gloeosporioides and Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum were rarely inhibited even at high concentrations.
Sixteen seed samples of nine vegetable crops imported from Japan were tested for plant quarantine by routine methods of seed health testing. Nineteen species of fungi including Alternara alternata were identified from the seed samples. Some species were very frequently detected in the seeds. In this experiment, Verticillium albo-atrum, V. dahliae and Macrophomina sp. from the seeds of spinach, and Cercospora capsici, Drechslera hawaiiensis and V. albo-atrum from the seeds of sweet pepper were detected for the first time, respectively. It has been reported that they had a pathogenicity on some vegetable crops in Japan and other countries. The data suggest that an epidemic damage may be occurred if the infected seeds are sown and cultivated in Korea.
About 300 actinomycetes were isolated from two forest and one sea-shore soil and tested for inhibitory effects on mycelial growth of six plant pathogenic fungi Magnaporthe grisea, Alternaria mali, Colletotrichum gloeosporioides, Phytophthora capsici, Fusarium oxysporum f. sp. cucumerinum, and Rhizoctonia solani. Among 300 actinomycetes tested, only 16 actinomycetes showed the antifungal activity against the test fungi. Isolate NH 50 was selected for production and purification of antifungal antibiotic substances. Actinomycete isolate NH 50 displayed the broad antifungal spectra against 11 plant pathogenic fungi. To identify actinomycete isolate NH 50, cultural characteristics on various agar media, diaminopimelic acid type, and morphological characteristics by scanning electron microscopy were examined. As a result, actinomycete isolate NH 50 was classified as a rare actinomycete that had LL-DAP type and did not produce spores. After incubation of isolate NH 50 in yeast extract-malt extract-dextrose broth, antifungal compound NH-B1 that inhibited mycelial growth of some plant pathogenic fungi was purified from the methanol eluates of XAD-16 resins by a series of purification procedures, i.e., silica gel flash chromatography, C18 flash chromatography, Sephadex LH-20 column chromatography, silica gel medium pressure liquid chromatography (MPLC), C18 MPLC, and high pressure liquid chromatography (HPLC). UV spectrum and 1HNMR spectrum of antifungal compound NH-B1 dissolved in methanol were examined. The antibiotic NH-B1 showed the major peaks at 230 and 271.2nm. Based on the data of 1H-NMR spectrum, NH-B1 was confirmed to be an extremely complex polymer of sugars called polysaccharides. The antibiotic NH-B1 showed strong antifungal activity against Alternaria solani and Cercospora kikuchi, but weak activity against M. grisea.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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