• 제목/요약/키워드: Cellulose Acetate Membrane Electrophoresis

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Study on Extraction of Mucopolysaccharide-protein Containing Chondroitin Sulfate from Chicken Keel Cartilage

  • Shin, S.C.;You, S.J.;An, B.K.;Kang, C.W.
    • Asian-Australasian Journal of Animal Sciences
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    • 제19권4호
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    • pp.601-604
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    • 2006
  • The objective of this study was to investigate technical methods for extraction of mucopolysachharide-protein containing chondroitin sulfate from keel cartilage of chickens. The chemical composition of chicken keel cartilage was determined. For the preparation of mucopolysaccharide-protein from lyophilized chicken keel cartilage, hot water extraction and alcalase hydrolysis methods were examined. Results showed that the optimum condition of hot water extraction was incubation for 120 min with a yield of 40.09% and chondroitin sulfate content of 28.46%. For alcalase hydrolysis, the most effective condition was 2% alcalase in 10 volumes of distilled water for 120 min. The yield of hydrolysate was 75.87%, and chondroitin sulfate content was 26.61%. For further separation of chondroitin sulfate from the alcalase hydrolysate, which has a higher yield than that of hot water, 60% ethanol precipitation was performed. The yield of the ethanol precipitate was 21.41% and its chondroitin sulfate content was 46.31%. The hot water extract, alcalase hydrolysate and ethanol precipitate showed similar electrophoretic migration with standard chondroitin sulfate (chondroitin sulfate A), using cellulose acetate membrane electrophoresis. These results indicated that a significant amount of mucopolysaccharide-protein containing chondroitin sulfate could be acquired form chicken keel cartilage. Therefore, keel cartilage in chicken may provide an inexpensive source of chondroitin sulfate for commercial purposes.

Cellulose Acetate막(膜) 전기영동법(電氣泳動法)에 의한 종모우(種牡牛)의 혈청단백분획(血淸蛋白分劃)에 관한 조사(調査) (Cellulose Acetate Membrane Electrophoresis of Bull Serum Protein)

  • 이창우
    • 대한수의학회지
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    • 제22권2호
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    • pp.115-119
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    • 1982
  • Total protein levels of 60 bovine bull sera were treasured with refractometer and the strum proteins were fractionated by cellulose acetate membrane electorphoresis and the relative amount of each fraction was measured with automatic scanning densitometer. The sixty bovine bulls consisted of 17 Charolais bulls, 28 Holstein bulls and 15 Korean bulls. Mean total serum protein level of the total bulls was $7.50{\pm}0.50(Mean{\pm}SD)$, with the mean of Charolais $7.04{\pm}0.37g/dl$, the mean of Holstein $7.62{\pm}0.40g/dl$ and the mean of Korean $7.81{\pm}0.43g/dl$. As barbital-calcium buffer was used in fractionating the bovine serum protein with cellulose acetate membrane, electric current of 0.4 mA per centimeter width of the membrane for an hour resulted in more clear separation between ${\alpha}_1$-globulin and ${\alpha}_2$-globulin than electric current of 0.6 or 1.0 mA for an hour. However ${\alpha}_1$-globulin and ${\alpha}_2$-globulin could not be measured separately with automatic scanning densitometer. Mean serum albumin level of total bulls was $3.54{\pm}0.42g/dl$, with the mean of Charolais $3.42{\pm}0.26g/dl$, the mean of Holstein $3.69{\pm}0.38g/dl$ and the mean of Korean $3.39{\pm}0.55g/dl$. Mean serum ${\alpha}$-globulin level of the total bulls was $0.62{\pm}0.14g/dl$, with the mean of Charolais $0.61{\pm}0.07g/dl$, the mean of Holstein $0.60{\pm}0.11g/dl$ and the mean of Korean $0.67{\pm}0.23g/dl$. Mean ${\beta}$-globulin level of the total bulls was $0.85{\pm}0.21g/dl$, with the mean of Charolais $0.74{\pm}0.11g/dl$, the mean of Holstein $0.83{\pm}0.14g/dl$ and the mean of Korean $1.02{\pm}0.30g/dl$. Mean serum ${\gamma}$-globulin level of the total bulls was $2.48{\pm}0.45g/dl$ with the mean of Charolais $2.27{\pm}0.37g/dl$, the mean of Holstein $2.48{\pm}0.44g/dl$ and the mean of Korean $2.72{\pm}0.47g/dl$.

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Comparison of Protein Electrophoresis Fractions in the Leptospirosis Patient Serum

  • Kim Chong Ho;Park Seung-Taeck;Oh Geum-Ga
    • 대한의생명과학회지
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    • 제10권3호
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    • pp.253-257
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    • 2004
  • The mechanisms by which leptospires caused disease are not well understood. A number of putative virulence factors have been suggested, but with few exceptions their role in pathogenesis remains unclear. In these days, many cases of leptospirosis are diagnosed by serological immunoassay. Leptospirosis is characterized by the histopathology of liver, kidney, heart, and lung, but the electrophoresis fractions of serum protein are not compared. We analyzed total protein, albumin, aspartic aminotranferase (AST), alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase (ALP), creatinine and urea nitrogen (UN) in sera of patients diagnosed leptospirosis. Total protein and albumin were decreased in 18.5% and 31.2% of patients, respectively. AST, ALT, ALP, UN and creatinine were increased in 90.4%, 66.9%, 28.0%, 15.9% and 10.8% of patients, respectively. We performed cellulose acetate membrane electrophoresis (EP) on sera of patients increased both of AST and ALT, and of patients increased both of creatinine and UN. In patients increased both of AST and ALT, and in patients increased both of AST and ALT, the relative percentage of albumin to total protein in patient serum was dcreased in 89.1 % of patients. α₁-globulin, α₂-globulin, β-globulin and γ-globulin were increased in 85.1 %, 75.2%, 33.6% and 98.0% of patients, respectively. In patients increased both of creatinine and UN, the relative percentage of albumin to total protein in patient serum was dcreased in 93.8% of patients. α₁-globulin, α₂-globulin, β-globulin and γ-globulin were increased in 87.5%, 100%, 31.2% and 93.8% of patients, respectively. These data indicate that infection of Leptospira causes severe liver damage to most of leptospirosis patients, but doesn't cause renal damage to most of them. The relative rate of serum protein electrophoresis fractions to total protein are not identical with them of typical hepatitis patient.

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일측폐장절제가 잔류폐, 간 및 신장의 대상성 증식과 혈청전기영동상에 미치는 영향 (Effect of Unilatromral Pneumonectomy on the Compensatory Growth of the Residual Lung, Liver, and Kidney, ana Serum Electrophoresis Pattern)

  • 이영만;이석강;주영은
    • The Korean Journal of Physiology
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    • 제17권2호
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    • pp.177-182
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    • 1983
  • In order to clarify the effect of the unilateral pneumonectomy on the compensatory growth of the residual lung, liver and kidney, and serum electrophoresis pattern, right lung pneumonectomy was performed on rabbits under general anesthesia with pentobarbital sodium. On the fifth day after the surgery, the weight of the residual lung, liver and bilateral kidneys was measured and organ weight-body weight ratio was calculated. And in an attempt to know whether the cells in the liver and the kidney were proliferated by unilateral pneumonectomy, DNA content was determined. The quantity(g/100 ml) of serum protein was determined also and serum electrophoresis was performed on cellulose acetate membrane. The results obtained are summarized as following. The weight of the residual lung and lung weight-body weight ratio was significantly increased respectively. The weight of the liver and organ weight-body weight ratio were not changed but the DNA content of the liver and kidney tissue increased significantly, illustrating that unilateral pneumonectomy caused cellular hyperplasia in the liver and in the kidney as well as in the residual lung. The quantity(g/100 ml) of serum protein was significantly increased and in the analysis of the electrophoregram, there was significant difference between the normal and pneumonectomy group. Taken together, these results indicate that unilateral pneumonectomy caused the compensatory hyperplasia of the liver, the kidney and the residual lung as well as the change of electro-phoretic pattern. And it also suggests that a humoral factor, which proliferates the cells in the residual lung, the liver and the kidney, existed in the pneumonectomized rabbits.

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脊椎動物 腦와 網膜에 있어서 Lactate Dehydrogenase Isozyme Pattern의 比較 (A Comparison of the Lactate Dehydrogenase (LDH) Isozyme Patterns in Vertebrate Cerebrum and Retina)

  • 김순옥;박상윤
    • 한국동물학회지
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    • 제22권1호
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    • pp.1-10
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    • 1979
  • 脊椎動物 網膜과 腦에 있어서 LDH isozyme pattern을 系統的으로 밝히기 위하여 cellulose acetate 電氣泳動法을 이용하여 실험한 결과 다음과 같은 結論을 얻었다. 1. 붕어와 잉어의 網膜과 腦의 LDH isozyme은 $LDH_1$$LDH_2$에 해당되는 부위에 彌滿된 단일 band가 觀察되었다. 잉어의 心臟, 胞筋, 肝臟, 胃의 LDH isozyme도 모두 다같이 퍼진 단일 band로 나타났다. 2. 도룡농과 개구리의 腦에 있어서 LDH isozyme pattern은 다르게 觀察되었다. 도룡뇽에서는 음극으로 移動된 단일 band가, 개구리에서는 $LDH_5$$LDH_4$ 두 개의 band가 검출되었다. 3. 유혈목이의 網膜과 腦에서는 다같이 하나의 band로 觀察되나 자라에서는 網膜과 腦의 isozyme이 다르다. 卽 자라의 網膜에서는 5個의 isozyme band가 觀察되었는데 그 농도는 $LDH_5, LDH_4, LDH_3, LDH_2$$LDH_1$의 순으로 낮아 졌다. 4. 닭과 사랑새의 網膜과 腦에 있어 LDH isozyme은 다같이 단일 band로 나타났다. 5. 집토끼, 개. 돼지, 소의 網膜에서도 포유류의 特徵的인 5個의 isozyme band가 검출되었고 mouse, albino rat, 관박쥐의 腦에서도 5個의 band가 검출되었다. 이러한 사실들로 미루어 보아 網膜과 腦의 LDH는 그 電氣泳動 이 대체로 비슷하여 두 器官은 유사한 pyruvate 代謝가 이루어지고 있는 것으로 추측된다.

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자유유동 전기이동법에 의한 대두단백질 분리 (Separation of Soybean Protein by Free-flow Electrophoresis)

  • 한재갑;류화원
    • KSBB Journal
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    • 제10권1호
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    • pp.63-70
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    • 1995
  • 실험실에서 자체 제작한 자유유통 전기이동 장치 에서 등전집속법을 이용한 대두 단백질의 분리를 통 해 운전 조건들이 분리에 미치는 영향을 조사하였 다. 매 실험마다 pH, 전기전도도, uv 흉광도 (280nm) 등을 측정하였고 시료의 순도는 SDS­P PAGE 분석을 통해 점검하였다. Tris와 boric acid로 처리한 대두단백질 추출액에 g glutamic acid, histidine, argmme, glycine 등 아 미노산 각 ImM과 dipeptide로 glycyl-glycine 2mM, 배경 전해액으로서 KCI ImM로 구성된 시료 의 완충액을 혼합하여 시료로 사용하였다. 분리막을 셀룰로오스 아세테이트를 사용할 경우 pH는 양극쪽에서 3, 음극쪽에서 8 정도의 값을 보였으며 2개의 변곡점을 나타내었다. 가해준 전압은 3 300V에서 lOOOV의 범위였으며 전압이 높을수록 더 나은 분리도를 얻었으나 전압을 더 높일 경우 과도한 Joule열의 발생으로 인해 한계가 있었다. 시간이 지남에 따라 단백질들은 분리조 중앙 부근에서 집속이 일어났으며 pH와 전기전도도의 변화로부터 분리 조내의 이온들이 막을 통해 전극쪽으로 이통해 가고 있음을 알 수 있었다. 완충용액의 농도를 5배로 증 가시킬 경우 300V에서 좋은 집속을 얻었으냐 10배 이상으로 농도를 높일 경우에는 분리조 입구와 출구 의 유체 온도차가 $25^{\circ}C$ 이상이 되어 단백질의 변성 이 일어날 수 있어 더 높일 수 없었다. 이온교환막을 사용할 경우 이온의 분극화현상을 일으켜 U자 형태 의 전기전도도 분포를 나타내었다. 아미노산 혼합물 대신 상용의 ampholyte를 사용하더라도 분리도에 있어 큰 차이가 없었다.

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Antithrombin Active Polysaccharide Isolated from the Alkaline Extract of Red Ginseng

  • Kim Dong Chung;In Man-Jin;Lee Ji Young;Hwang Yoon Kyung;Lee Sung Dong
    • Journal of Ginseng Research
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    • 제23권4호
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    • pp.217-221
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    • 1999
  • 홍삼으로부터 염기성 수웅액 추출, 음이온교환 크로마토그래피 및 겔여과 크로마토그래피를 순차적으로 수행하여 항트롬빈 활성을 보이는 다당체를 분리하였다. 이 다당체는 셀룰로스 아세테이트막을 사용한 전기영동에서 하나의 띠로 나타나 비교적 순수하게 정제되었음을 알 수 있었고, 겔여과 크로마토그래피에서 결정된 평균 분자량은 약 177kDa이었다. $40.2\%$의 유론산, $9.2\%$의 황산기 및 $1.5\%$의 단백질을 포함하는 산성다당체였고, 구성 중성당으로 rhamnose, mannose, galactose, arabinose, glucose, fucose, xylose를 1.00 : 0.88 :0.86 : 0.78 : 0.70 : 0.33 : 0.22의 비율로 포함하고 있었다. 이 다당체는 트롬빈에 의한 피브리노겐의 응고를 농도에 비례하여 저해하였고, 혈장을 사용한 실험에서 내인성 경로를 통해 혈액응고를 저해하는 것으로 나타났다.

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한국산 주요패류에 대한 독의 분포, 특성 및 제독에 관한 연구 2. 진주담치에서 추출한 PSP의 분리, 정제 및 특성에 관하여 (Studies on Distribution, Characterization and Detoxification of Paralytic Shellfish Poison (PSP) in Korea 2. Purification and Characterization of PSP Extracted from Cultured Sea Mussel, Mytilus edulis)

  • 장동석;신일식;조학래;박미연;변재형;박영호
    • 한국수산과학회지
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    • 제21권3호
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    • pp.161-168
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    • 1988
  • 한국 남해안에서 생산되는 주요 패류중에서 PSP 함량이 비교적 높은 진주담치를 시료로 택하여 추출한 독소에 대한 pH변화와 가열처리하였을때의 독소의 안정성을 검계하고, 추출된 독소를 활성탄소처리, Bio-Gel P-2 및 Bio-Rex 70의 각 column chromatography로 분리정제하여 electrophoresis, TLC 및 HPLC로 분석한 결과는 다음과 같다. 1. 추출된 PSP의 pH는 3.0부근이었으며 이 PSP를 $121^{\circ}C$ 15분과 $100^{\circ}C$로 2시간 처리하였을때 약 $20\%$가 파괴되었다. 2. PSP는 $121^{\circ}C$에서 15분 처리하였을 때 pH $2.0\~4.0$ 범위에서는 안정하였으나 pH 4.5이상에서는 불안정하였으며 pH 6.0에서는 $80\%$가 불활성화되었다. 3. 충무일원에서 생산되는 양식 진주담치에서 분리된 PSP는 주로 GTX 1, 2, 3, 4이었으며, STX군 독소는 GTX군의 약 1/40에 불과하였다.

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진주담치의 마비성독에 관한 연구 -1986년 부산 감천만 중독사고를 중심으로- (A Study on Paralytic Shellfish Poison of Sea Mussel, Mytilus edulis -Food Poisoning Accident in Gamchun Bay, Pusan, Korea, 1986-)

  • 장동석;신일식;변재형;박영호
    • 한국수산과학회지
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    • 제20권4호
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    • pp.293-299
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    • 1987
  • 우리나라산 주요 패류에 대한 독의 분포특성 등에 대한 연구의 일환으로 우선 1986년 3월 부산시 사하구 구평동 지선에 소재하는 모회사(폐선을 해체하여 고철로 활용)의 작업인부들이 먹고 식중독 사고를 일으킨 원인식품인 진주담치를 시료로 하여 biassay를 통한 마비성 패류독의 독성을 조사하고 독소를 분리하여 electrophoresis, TLC, HPLC로 분석한 결과를 요약하면 다음과 같다. 1. 식중독사고의 원인이 된 진주담치의 마비성 패류독 함량은 $132\~295MU/g$, 또는 $26.4\~58.9{\mu}g/g$ 였다. 2. 독화된 진주담치의 중장선부위에는 독성이 $439\~979MU/g$나 되어 육질부위의 약 9배에 달하였으며 전체 독성의 $70\%$ 정도가 중장선부위에 축적되어 있었다. 3. 마비성 패류독을 분리하여 전기영동, TLC, HPLC로 분석한 결과 주성분은 $Gonyautoxin_{1\~4}$ 였으며, Saxitofin 군은 아주 미량검출되었다. 이상의 결과로서 본 마비성 패류독에 의한 식중독 사고의 원인물질은 Saxitoxin이 아니고 Gonyautoxin 임을 알 수 있었다.

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