Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.19
no.1
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pp.87-91
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2005
Dental plaque is a film of microorganisms on the tooth surface that plays an important part in the development of caries and periodontal diseases. Streptococcus mutans (S. mutans) is present in almost all types of dental plaque. Teeth and their supporting structure, the gums (gingiva) are subjected to infection by S. mutans that causes cavities and pyorrhea which, if left untreated, can eventually lead to gingivitis. Various chemical agents have been evaluated over the years with respect to their antimicrobial effects in the oral cavity; however, all are associated with side effects that prohibit regular long-term use. The present study was designed to investigate the effect of Aralia continentalis (Araliaceae) extracts on the growth, acid production, adhesion, and insoluble glucan synthesis of S. mutans. The methanol extract of A. continentalis showed concentration dependent inhibitory activity against the growth and acid production of S. mutans, and produced significant inhibition at the concentration of 0.25, 0.5, 1, 2 and 4 mg/ml compared to the control group. The extracts markedly inhibited S. mutans adherence to HA treated with saliva, and cell adherence was repressed by more than 60% at the concentration of 0.25 mg/ml and complete inhibition was observed at the concentration of 4 mg/ml. On the activity of glucosyltransferase which synthesizes water insoluble glucan from sucrose, methanol extract of A. continentalis showed more than 10% inhibition over the concentration of 0.25 mg/ml. The synthesis of insoluble glucan was decreased in the presence of 0.25 - 4 mg/ml of the methanol extract of A. continentalis. Hence, we conclude that A. continentalis might be a candidate of anticaries agent.
The non-ionic surfactant (NIS) Tween 80 was evaluated for its ability to influence invitro cumulative gas production, dry matter digestibility, cellulolytic enzyme activities, anaerobic microbial growth rates, and adhesion to substrates by mixed rumen microorganisms on rice straw, alfalfa hay, cellulose filter paper and tall fescue hay. The addition of NIS Tween 80 at a level of 0.05% increased significantly (P<0.05) in vitro DM digestibility, cumulative gas production, microbial growth rate and cellulolytic enzyme activity from all of substrates used in this study. In vitro cumulative gas production from the NIS-treated substrates; rice straw, alfalfa hay, filter paper and tall fescue hay was significantly (P<0.05) improved by 274.8, 235.2, 231.1 and 719.5% compared with the control, when substrates were incubated for 48 hr in vitro. The addition of 0.05% NIS Tween 80 to cultures growing on alfalfa hay resulted in a significant increase in CMCase (38.1%), xylanase (121.4%), Avicelase (not changed) and amylase (38.2%) activities after 36 h incubation. These results indicated that the addition of 0.05% Tween 80 could greatly stimulate the release of some kinds of cellulolytic enzymes without decreasing cell growth rate in contrast to trends reported with aerobic microorganism. Our SEM observation showed that NIS Tween. 80 did not influence the microbial adhesion to substrates used in the study. Present data clearly show that improved gas production, DM digestibility and cellulolytic enzyme activity by Tween 80 is not due to increased bacterial adhesion on the substrates.
Calreticulin (CALR), a multifunctional protein thoroughly researched in mammals, comprises N-, P-, and C-domain and has roles in calcium homeostasis, chaperoning, clearance of apoptotic cells, cell adhesion, and also angiogenesis. In this study, the spatial and temporal expression patterns of the Opisthorchis viverrini CALR gene were analyzed, and calcium-binding and chaperoning properties of recombinant O. viverrini CALR (OvCALR) investigated. OvCALR mRNA was detected from the newly excysted juvenile to the mature parasite by RT-PCR while specific antibodies showed a wide distribution of the protein. OvCALR was localized in tegumental cell bodies, testes, ovary, eggs, Mehlis' gland, prostate gland, and vitelline cells of the mature parasite. Recombinant OvCALR showed an in vitro suppressive effect on the thermal aggregation of citrate synthase. The recombinant OvCALR C-domain showed a mobility shift in native gel electrophoresis in the presence of calcium. The results imply that OvCALR has comparable function to the mammalian homolog as a calcium-binding molecular chaperone. Inferred from the observed strong immunostaining of the reproductive tissues, OvCALR should be important for reproduction and might be an interesting target to disrupt parasite fecundity. Transacetylase activity of OvCALR as reported for calreticulin of Haemonchus contortus could not be observed.
The mechanism of cytotoxicity of doxifluridine, a prodrug fluorouracil (5-FU), has been ascribed to the misincorporation of fluoropyrimidine into RNA and DNA and to the inhibition of the nucleotide synthetic enzyme thymidylate synthase. Increased understanding of the mechanism of 5-FU has led to the development of strategies that increases its anticancer activity or predicts its sensitivity to patients. Using GeneChip?? Rhesus Macaque Genome arrays, we analyzed gene expression profiles of doxifluridine after two weeks repeated administration in cynomolgus monkey. Kegg pathway analysis suggested that cytoskeletal rearrangement and cell adhesion remodeling were commonly occurred in colon, jejunum, and liver. However, expression of genes encoding extracellular matrix was distinguished colon from others. In colon, COL6A2, COL18A1, ELN, and LAMA5 were over-expressed. In contrast, genes included in same category were down-regulated in jejunum and liver. Interestingly, MMP7 and TIMP1, the key enzymes responsible for ECM regulation, were overexpressed in colon. Several studies were reported that both gene reduced cell sensitivity to chemotherapy-induced apoptosis. Therefore, we suggest they have potential as target for modulation of 5-FU action. In addition, the expression of genes which have been previously known to involve in 5-FU pathway, were examined in three organs. Particularly, there were more remarkable changes in colon than in others. In colon, ECGF1, DYPD, TYMS, DHFR, FPGS, DUT, BCL2, BAX, and BAK1 except CAD were expressed in the direction that was good response to doxifluridine. These results may provide that colon is a prominent target of doxifluridine and transcriptional profiling is useful to find new targets affecting the response to the drug.
Shin, Jung-Hae;Kwon, Hyuk-Woo;Irfan, Muhammad;Rhee, Man Hee;Lee, Dong-Ha
Journal of Ginseng Research
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v.45
no.4
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pp.490-497
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2021
Background and objective: Synthetic ginsenoside compounds G-Rp (1,3, and 4) and natural ginsenosides in Panax ginseng 20(S)-Rg3, Rg6, F4 and Ro have inhibitory actions on human platelets. However, the inhibitory mechanism of ginsenoside Rk1 (G-Rk1) is still unclear thus, we initiated investigation of the anti-platelet mechanism by G-Rk1 from Panax ginseng. Methodology: Our study focused to investigate the action of G-Rk1 on agonist-stimulated human platelet aggregation, inhibition of platelet signaling molecules such as fibrinogen binding with integrin αIIbβ3 using flow cytometry, intracellular calcium mobilization, fibronectin adhesion, dense granule secretion, and thromboxane B2 secretion. Thrombin-induced clot retraction was also observed in human platelets. Key Results: Collagen, thrombin, and U46619-stimulated human platelet aggregation were dose-dependently inhibited by G-Rk1, while it demonstrated a more effective suppression on collagen-stimulated platelet aggregation using human platelets. Moreover, G-Rk1 suppressed collagen-induced elevation of Ca2+ release from endoplasmic reticulum, granule release, and αIIbβ3 activity without any cytotoxicity. Conclusions and implications: These results indicate that G-Rk1 possess strong anti-platelet effect, proposing a new drug candidate for treatment and prevention of platelet-mediated thrombosis in cardiovascular disease.
BACKGROUND/OBJECTIVES: As peanuts germinate, the content of the components beneficial to health, such as resveratrol, increases within the peanut sprout. This study examined whether the ethanol extract of peanut sprout tea (PSTE) inhibits breast cancer growth and metastasis. MATERIALS/METHODS: After orthotopically injecting 4T1 cells into BALB/c mice to induce breast cancer, 0, 30, or 60 mg/kg body weight/day of PSTE was administered orally. Angiogenesis-related protein expression in the tumors and the degree of metastasis were analyzed. 4T1 and RAW 264.7 cells were co-cultured, and reverse transcription polymerase chain reaction was performed to measure the crosstalk between breast cancer cells and macrophages. RESULTS: PSTE reduced tumor growth and lung metastasis. In particular, PSTE decreased matrix metalloproteinase-9, platelet endothelial cell adhesion molecule-1, vascular endothelial growth factor-A, F4/80, CD11c, macrophage mannose receptor, macrophage colony-stimulating factor, and monocyte chemoattractant protein 1 expression in the tumors. Moreover, PSTE prevented 4T1 cell migration, invasion, and macrophage activity in RAW 264.7 cells. PSTE inhibited the crosstalk between 4T1 cells and RAW 264.7 cells and promoted the macrophage M1 subtype while inhibiting the M2 subtype. CONCLUSIONS: These results suggest that PSTE blocks breast cancer growth and metastasis to the lungs. This may be because the PSTE treatment inhibits the crosstalk between mammary cancer cells and macrophages and inhibits the differentiation of macrophages into the M2 subtype.
This study aims to provide basic data on useful functional ingredients in red ginseng by studying the anti-inflammatory and anti-cancer effects of convergence of ginsenoside Rh2(Rh2) and compound K(CK) isolated from amplified red ginseng. Therefore we examined cytotoxicity in Hep3B, activity of IL-6 induced STAT3 luciferase and survival concentration of cells in B16F10 and HaCa T. According to the experimental results, when the Rh2 and CK mixture were 10 ug/ml, there was no cytotoxicity in Hep3B cells and the anti-inflammatory effect of IL-6 reduction ratio was 102%. In addition, Rh2 and CK mixture were observed to be toxic in melanoma cell line B16F10 and HaCa T (human keratinocyte) at 50 uM. FACS(fluorescence activated cell sorting) analysis showed that annexin V was not expressed and melanoma cells and keratinocyte were desorbed and killed. It can be assumed that the mechanism of killing through this phenomenon is due to the cell death of anoikis-type, and it is necessary to study the changes of cell adhesion proteins in the future in order to clarify the cell death signal system.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.21
no.5
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pp.1148-1153
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2007
Streptococcus mutans is considered one of the primary etiologic agents of dental caries. we studied the effect of the ethanol extracts of Tribuli fructus (T. fructus) on the growth, biofilm formation, acid production, adhesion and insoluble glucan synthesis of S. mutans. The ethanol extracts of T. fructus showed concentration dependent inhibitory activity against the growth and acid production of S. mutans, and produced significant inhibition at the concentration of 0.025, 0.05, 0.1, 0.2, 0.3, 0.5 mg/ml compared to the control group. In the biofilm assay, the ethanol extracts of T. fructus inhibited formation of biofilm synthesized by S. mutans at the concentration of 0.05 mg/ml. The extracts markedly inhibited S. mutans adherence to HA treated with saliva, and cell adherence was repressed by more than 50% at the concentration 0.05 mg/ml. On the activity of glucosyltransferase which synthesizes water insoluble glucan form sucrose, ethanol extract of T. fructus showed more than 10% inhibition over the concentration of 0.025 mg/ml. Hence, we conclude that T. fructus might be a candidate of anticaries agent. Further studies are necessary to clarify the active constituents of T. fructus responsible for such biomolecular activities.
Journal of Physiology & Pathology in Korean Medicine
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v.21
no.3
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pp.647-651
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2007
It has been well established that S. mutans is the major etiological agent in dental caries, one of the most common oral diseases worldwide. The present study was designed to investigate the effect of Saururus chinensis (S. chinensis) ethanol extracts on the growth, acid production, biofilm formation, adhesion, and insoluble glucan synthesis of S. mutans. The ethanol extracts of S. chinensis showed concentration dependent inhibitory activity against the growth and acid production of S. mutans, and produced significant inhibition at the concentration of 0.025, 0.05, 0.1, 0.2 and 0.4 mg/ml compared to the control group. The extracts markedly inhibited S. mutans adherence to HA treated with saliva, and cell adherence was repressed by more than 80% at the concentration of 0.05 mg/ml and complete inhibition was observed at the concentration of 0.4 mg/ml. On the activity of glucosyltransferase which synthesizes water insoluble glucan form sucrose, ethanol extract of S. chinensis showed more than 10% inhibition over the concentration of 0.025 mg/ml. The synthesis of insoluble glucan was decreased in the presence of 0.025 ${\sim}$ 0.4 mg/ml of the ethanol extract of S. chinensis. Our research strongly suggested S. chinensis was a promising natural product for the prevention of dental caries.
Lee Seung-Ho;Seo Mi Jung;Choi Seul Min;Sohn Yong Sung;Kang Kyung Koo;Ahn Byoung Ok;Kwon Jong Won;Yoo Moohi
Archives of Pharmacal Research
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v.28
no.12
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pp.1350-1357
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2005
Nuclear factor kappa B (NF-$\kappa$B) regulates the expression of multiple cytokines, chemokines, and cell adhesion molecules that are involved in the pathogenesis of asthma. We investigated the anti-asthmatic effects and the mechanism of action of DA-9201, an extract of the black rice, in a mouse model of asthma. Mice immunized with ovalbumin (OVA) were administered with DA-9201 (30, 100 or 300 mg/kg) or dexamethasone (DEXA, 3 mg/kg) for 2 weeks and challenged with aerosolized OVA during the last 3 days. Anti-asthmatic effects were assessed by means of enhanced pauses, level of total lgE and Th2 cytokines in plasma or bronchoalveolar lavage fluid (BALF), the percentage of eosinophils in BALF, and histopathological examination. The expression of NF-$\kappa$B in nuclear and cytoplasmic fraction and its DNA-binding activity in lung tissues were analyzed by means of Western blotting and electrophoretic gel mobility shift assay (EMSA), respectively. DA-9201 significantly reduced airway hyperrespon-siveness (AHR), total lgE level in plasma and BALF, IL-4, IL-5, and IL-13 levels in BALF, and the percentage of eosinophils in BALF. Tissue inflammation was significantly improved by DA9201 treatment. In addition, DA-9201 dramatically suppressed the expression of NF-$\kappa$B and its DNA-binding activity. These results suggest that DA-9201 may be useful for the treatment of asthma and its efficacy is related to suppression of NF-$\kappa$B pathway.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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