In order to examine the effect of testosterone of the cell growth, using a primary rabbit kidney proximal tubule cell culture system, we observed the effect of 3 growth factors and testosterone supplementation on the growth of primary rabbit kidney proximal tubule cells in the serum-free medium. 1 nM of testosterone showed a potentiation of the effect on the growth of the proximal tubule cell in serum-free medium, but higher concentration (>10 nM) of testosterone indeed inhibited the growth. In the absence of hydrocortisone as a growth supplement in serum-free medium, testosterone caused to potentiate the growth of the cell. In the presence of hydrocortisone, testosterone also potentiated the grwoth of the proximal tubule cells. According to the Northern analysis, testosterone increased significantly the level of ${\beta}-actin$ mRNA in proximal tubular cells of rabbit kidney. Consequently we may suggest that growth stimulatory effect of testosterone on the primary rabbit kidney proximal tubule cell in serum-free and hormonally defined media ascribed to increase the synthesis of ${\beta}-actin$, which is an important protein consisting of cellular microfilament.
We found that bufalln, one of the prominent components of the bufadlenolides in the Chinese medicine chan'su, has the potent inhibitory effects on growth and proliferation of the cultured bovine aortlc endothelial (BAE) and human umbilical vein endothelial (HUVE) cells. All naturally-occuring bufadienolides used in this study inhibited the cell growth in a dose-dependent manner. Particularly, bufalin among the bufadienolides showed the strongest inhibitory activity for the cell growth. The order of growth inhibition by bufadienolides on BAE cells was as follows: bufalin > gamabufotalln > bufotalln > cinobufagin > cinobufotalin > resibufogenin. The $IC_50$ values (50% inhibition of cell growth) of bufalin as determined by XTT assay were the range of 1-10 nM in BAE and HUVE cells. Bufalin exhibited a higher sensitivity towards cultured bovine aortic endothelial cells than human umbilical vein endothelial cells.
Han Won-Jeong;Heo Min-Suk;Lee Sam-Sun;Choi Soon-Chul;Park Tae-Won
Imaging Science in Dentistry
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v.30
no.1
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pp.71-79
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2000
Purpose : This study was aimed to evaluate the cell cycle arrest and apoptosis induction after irradiation and epidermal growth factor (EGF) treatment in three human epithelial tumor cell lines (A431, Siha, KB). Materials and Methods: Single irradiation of 2, 5 and 10 Gy was done on three cell lines with 5.38 Gy/min dose rate using Cs-137 irradiator at room temperature. Also, EGF of 10 ng/ml was added immediately after 10 Gy irradiation. Cell growth was evaluated by counting the living cell number using a hemocytometer at 1 day, 2 days, 3 days, 4 days and 5 days after irradiation. Cell cycle arrest and apoptosis induction were assayed with the flow cytometry at 8 hours, 12 hours, 1 day, 2 days, 3 days, 4 days and 5 days after irradiation. Results : Growth of irradiated three cell lines were inhibited in proportion to radiation dose. EGF treatment after irradiation showed various results according to cell lines. On all cell lines, G2 arrest was detected after 8 hours and maximized after 12 hours or 1 day. Amount of G2 arrest was positively dose dependent. However, EGF showed no significant change on G2 arrest. G2 arrest was recovered with time at 2 Gy and 5 Gy irradiation. However, at 10 Gy irradiation, G2 arrest was continued. Apoptosis was detected at 10 Gy irradiation. On EGF treated group after irradiation, A431 and Siha cell lines showed slightly increased apoptosis but there was no statistically significant difference. KB cell line showed no marked change of apoptosis induction. Conclusion : Irradiation effects on cell cycle arrest and apoptosis induction in three human epithelial tumor cell lines, however epidermal growth factor doesn't effect on.
We have established in culture a spontaneously immortalized bovine embryonic fibroblast (BEF) cell line that has lost p53 and $p16^{INK4a}$ functions. MyoD is a muscle-specific regulator capable of inducing myogenesis in a number of cell types. When the BEF cells were transduced with MyoD they differentiated efficiently to desmin-positive myofibers in the presence of 2% horse serum and 1.7 nM insulin. The myogenic differentiation of this cell line was more rapid and obvious than that of C2C12 cells, as judged by morphological changes and expression of various muscle regulatory factors. To confirm that lack of the p53 and $p16^{INK4a}$ pathway does not prevent MyoD-mediated myogenesis, we established a cell line transformed with SV40LT (BEFV) and introduced MyoD into it. In the presence of 2% horse serum and 1.7 nM insulin, the MyoD-transduced BEFV cells differentiated like the MyoD-transduced BEFS cells, and displayed a similar pattern of expression of muscle regulatory proteins. Taken together, our results indicate that MyoD overexpression overcomes the defect in muscle differentiation associated with immortalization and cell transformation caused by the loss of p53 and Rb functions.
Adherence of probiotic bacteria to intestinal epithelium is found to be the most principal characteristics among the various physiological functionality. This study was conducted to investigate the effect of bifidobacterial growth properties and condition on the Caco-2 cell adherence and to construct a basic data on adherence-related research. Among 20 strains of bifidobacteris tested, when measured by cell surface hydrophobicity(CSH) and cell agglutination(CA), Bifidobacterium bifidum ATCC29521, Bif. adolescentis K8, and Bif. infantis K9 were selected. Using these strains, variations of Caso-2 cell adherence depending upon experimental condition were analyzed. The results obtained are as follows : Even though Bif. bifidum ATCC29521, Bif. adolescentis K8, and Bif. infantis K9 reached more 85% cell surface hydrophobicity there was no significant difference in cell agglutination, when reached 31.54$\pm$0.54mg/ml. By direct count method for adherence, viable cell count of M3, K1, K2, K8, K9 and K10 reached more 100 counts per 100 Caco-2 cells. When Bif. bifidum ATCC29521, Bif. adolescentistis K8, and Bif. infantis K9 were used to compare the adherence depending upon viable cell counts, reaction time, and growth phase, the more viable cell count, and the more adhered cell counts, the less adherence percentage. In addition, there was no difference in adherence percentage of bifidobacteria when bifidobacteria was incubated from 1 to 8 hrs after Caco-2 cells already formed monolayer. Considering of the effect of growth phase of bifidobacteria on adherence variation, all strains showed the highest adherence during the early stage of stationary phase. In conclusion, adherence of bifidobacteria was affected by strain specificity, viable cell count, and growth activity.
Up to now, 10% Fetal Bovine Serum(FBS(V/V)) was added to basal medium for the cultivation of hybridoma. For the cultivation of hybridoma cell line, CH07E02, against colon cancer, serum concentration was reduced to 3% FBS without influence on cell growth and maximum cell concentration. By the addition of cell growth promoting substances-insulin (I), pyruvate (P), oxaloacetate(O), Pluronic F-68(P) and 2-mercaptoethanol(2-ME)-to 1% FBS medium, a cell density higher than that with 1% FBS medium alone was achieved. FBS 3% medium was replaced by very cheap 2% Calf Serum (CS) medium without influence on cell growth rate and concentration. Cells grew vigorously in 0.5% CS+IPOP medium. This composition was used during suspension culture and exhibited good viability and high specific growth rate.
Journal of the Korean Society for Precision Engineering
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v.27
no.2
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pp.153-159
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2010
Recently, it has been reported that mechanical stimulation takes a role in improving cell growth. Also, became generally known that skeletal system as bone or cartilage tissues take influence of compression loading. In this study, we fabricated a custom-made bioreactor and analyzed that conditions of compressive loading would influence cell growth. To compare the effect of intermittent compressive loading on cell-encapsulated agarose scaffold, we cultured preosteoblast cell (MC3T3-E1 cells) statically and dynamically. And dynamic culture conditions were produced by changing parameters such as the iteration time and interval delay time. Also, cellencapsulated agarose scaffold were subjected to 10 % dynamic compressive strain at 1㎐ frequency for 7 days. After cell culture, cell proliferation was assessed with PI stain assay for fluorescence images and flow cytometry (FACS).
The purpose of the present study was to establish culture conditions for the in vitro study of the neonatal piglet Sertoli cell. Isolation for the culture of Sertoli cell was established using collagenase and pancreatin digestion of testicular tissues. The effects of various culture media, fetal bovine serum(FBS), follicular stimulating hormone(FSH), epidermal growth factor(EGF) and insulin-transferrin-sodium selenite(ITS) on growth of neonatal piglet Sertoli cells were investigated. The mitogenic effects of Dulbecco's modified Eagle's medium+Ham's F-12 medium was higher than other media used in this experiment. The addition of 1% FBS in cultures was necessary for attachment of Sertoli cell clusters. However, except FBS and EGF, FSH and ITS did not stimulate Sertoli cell proliferation. When Sertoli cells isolated from neonatal piglets were cultured in Dulbecco's modified Eagle's medium+Ham's F-12 medium supplemented with 1% FBS, FSH EGF and ITS, the yield and plating efficiency of Sertoli cells were largely increased. Confluency of Sertoli cells was reached as early as 4 days of culture. The method described here reduces or eliminates many of the drawbacks of the conventional procedures used to isolate and culture of Sertoli cells, thus providing a useful tool in studies of growth kinetics and regulation of cell proliferation in vitro.
Temperature and medium composition were changed with the aim of increasing growth and erythropoietin (EPO) production in EPO-producing Chinese hamster ovary (CHO) cells. We used the CHO cell line, IBE, and its derivative, CO5, which over-expresses the first two enzymes of the urea cycle, carbamoyl phosphate synthetase I (CPS I) and ornithine transcar-bamoylase (OTC). When supplements were added to the medium at $33\;^{\circ}C$, the growth of IBE and CO5 cells increased by $27\%\;and;26\%$, respectively and the maximum yield of EPO was increased by $40\%$ in both cell lines. The absolute EPO concentration in the CO5 cells was always $55{\sim}60\%$ higher than in the IBE cells. In addition, when the two cell lines were continuously cultured with supplements at $33\;^{\circ}C$ until their growth rates approached those at $37\;^{\circ}C$, the growth rates of both IBE and CO5 cells increased by $54\%$ and their maximum EPO levels increased by up to $73\%\;and\;56\%$, respectively. Therefore, the growth and EPO expression levels of CO5 cells increased 2.2-fold and 2.6-fold, respectively, compared to those of the IBE cells. These results indicate that adaptation to lower temperature as well as medium supplementation could be important for improving cell growth and EPO production.
Park, Sang-Ho;Chung, Joo-Ho;Ko, Kye-Chang;Jung, Jee-Chang
The Korean Journal of Pharmacology
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v.29
no.1
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pp.73-83
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1993
In order to examine the effect of ${\beta}-estradiol$ on the cell growth, using a primary rabbit kidney poximal tubule cell culture system. We investigated the effect of ${\beta}-estradiol$ on alpha 1 (IV) collagen and ${\beta}-actin$ mRNA levels from primary rabbit kidney cell cultures, and also the effects of 3 growth factors and ${\beta}-estradiol$ supplementation on the growth of primary rabbit kidney proximal tubule cells in the serum-free medium. 1 nM of ${\beta}-estradiol$ showed a sizable potentiation effect on the growth of the proximal tubule cell in serum-free medium, but higher concentration (> 10 nM) of estradiol indeed inhibited the growth. In the absence of hydrocortisone as a growth supplement in serum-free medium, ${\beta}-estradiol$ caused to potentiate the growth of the cell. In the presence of hydrocortisone, ${\beta}-estradiol$ also potentiated the growth of the proximal tubule cells. According to the Northern analysis, ${\beta}-estradiol$ increased the level of ${\beta}-actin$ mRNA, although mRNA level of the alpha I(IV) collagen was not changed significantly.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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