Caenorhabditis elegans (C. elegans) utilizes two different cell-cycle modes, binucleations during the L1 larval stage and endoreduplications at four larval moltings, for its postembryonic intestinal development. Previous genetic studies indicated that CDC-25.2 is specifically required for binucleations at the L1 larval stage and is repressed before endoreduplications. Furthermore, LIN-23, the C. elegans ${\beta}$-TrCP ortholog, appears to function as a repressor of CDC-25.2 to prevent excess intestinal divisions. We previously reported that intestinal hyperplasia in lin-23(e1883) mutants was effectively suppressed by the RNAi depletion of cdc-25.2. Nevertheless, LIN-23 targeting CDC-25.2 for ubiquitination as a component of E3 ubiquitin ligase has not yet been tested. In this study, LIN-23 is shown to be the major E3 ubiquitin ligase component, recognizing CDC-25.2 to repress their activities for proper transition of cell-cycle modes during the C. elegans postembryonic intestinal development. In addition, for the first time that LIN-23 physically interacts with both CDC-25.1 and CDC-25.2 and facilitates ubiquitination for timely regulation of their activities during the intestinal development.
Cancer patients often suffer from local tumor recurrence after radiation therapy. Cell cycling, an intricate sequence of events which guarantees high genomic fidelity, has been suggested to affect DNA damage responses and eventual radioresistant characteristics of cancer cells. Here, we established a radioresistant lung cancer cell line, A549R, by exposing the parental A549 cells to repeated ${\gamma}$-ray irradiation with a total dose of 60 Gy. The radiosensitivity of A549 and A549R was confirmed using colony formation assays. We then focused on examination of the cell cycle distribution between A549 and A549R and found that the proportion of cells in the radioresistant S phase increased, whereas that in the radiosensitive G1 phase decreased. When A549 and A549R cells were exposed to 4 Gy irradiation the total differences in cell cycle redistribution suggested that G2-M cell cycle arrest plays a predominant role in mediating radioresistance. In order to further explore the possible mechanisms behind the cell cycle related radioresistance, we examined the expression of Cdc25 proteins which orchestrate cell cycle transitions. The results showed that expression of Cdc25c increased accompanied by the decrease of Cdc25a and we proposed that the quantity of Cdc25c, rather than activated Cdc25c or Cdc25a, determines the radioresistance of cells.
Kim, Jiyoung;Lee, Ah-Reum;Kawasaki, Ichiro;Strome, Susan;Shim, Yhong-Hee
Molecules and Cells
/
제28권1호
/
pp.43-48
/
2009
By screening C. elegans mutants for severe defects in germline proliferation, we isolated a new loss-of-function allele of cdc-25.1, bn115. bn115 and another previously identified loss-of-function allele nr2036 do not exhibit noticeable cell division defects in the somatic tissues but have reduced numbers of germ cells and are sterile, indicating that cdc-25.1 functions predominantly in the germ line during postembryonic development, and that cdc-25.1 activity is probably not required in somatic lineages during larval development. We analyzed cell division of germ cells and somatic tissues in bn115 homozygotes with germline-specific anti-PGL-1 immunofluorescence and GFP transgenes that express in intestinal cells, in distal tip cells, and in gonadal sheath cells, respectively. We also analyzed the expression pattern of cdc-25.1 with conventional and quantitative RT-PCR. In the presence of three other family members of cdc-25.1 in C. elegans, defects are observed only in the germ line but not in the somatic tissues in cdc-25.1 single mutants, and cdc-25.1 is expressed predominantly, if not exclusively, in the germ line during postembryonic stages. Our findings indicate that the function of cdc-25.1 is unique in the germ line but likely redundant with other members in the soma.
Wee1 is a kinase regulator of the M-phase promoting factor (MPF; a complex of cdc2 and cyclin B1). The present study was undertaken to determine the role(s) of wee1 in the early stages of mouse ovarian follicles. The expression of wee1 and the correlated cell-cycle components, namely cdc2, cyclin B1, and cdc25C, were evaluated by immunohistochemistry. In addition, the expression of Tyr15-phosphorylated cdc2 (cdc2-p) was also examined to determine whether wee1 kinase phosphorylates cdc2 existed. Each component except cdc25C was found cytoplasmic in the oocytes at all stages of follicles, while cdc25C was not detected in primordial follicles. It was found primarily in ovarian somatic cells and to a small extent in granulosa cells of the growing follicles. To further confirm the expression of cell-cycle components in the primordial follicular oocytes, day1 ovaries were enzymatically and mechanically dissociated, then oocytes were isolated from somatic including pre-granulosa cells, and we confirmed that cdc2-p was expressed in oocytes of primordial follicles. From the results of the present study, we concluded wee1, without the counteracting cdc25C, would cause meiotic arrest of oocytes by the inhibitory phosphorylation of cdc2. The expression of all these proteins in the granulosa cells of growing follicles may regulate their mitosis concurrently with the growth of oocytes and follicles.
The actin cytoskeleton plays a key role in the entry of mitosis as well as in cytokinesis. In a previous study, we showed that actin disruption delays mitotic entry at G2/M by sustained activation of extracellular signal-related kinase 1/2 (ERK1/2) in primary cells but not in transformed cancer cell lines. Here, we examined the mechanism of cell cycle delay at G2/M by actin dysfunction in IMR-90 normal human fibroblasts. We observed that de-polymerization of actin with cytochalasin D (CD) constitutively activated ribosomal S6 kinase (RSK) and induced inhibitory phosphorylation of Cdc2 (Tyr 15) in IMR-90 cells. In the presence of an actin defect in IMR-90 cells, activating phosphorylation of Wee1 kinase (Ser 642) and inhibitory phosphorylation of Cdc25C (Ser 216) was also maintained. However, when kinase-dead RSK (DN-RSK) was overexpressed, we observed sustained activation of ERK1/2, but no delay in the G2/M transition, demonstrating that RSK functions downstream of ERK in cell cycle delay by actin dysfunction. In DN-RSK overexpressing IMR-90 cells treated with CD, phosphorylation of Cdc25C (Ser 216) was blocked and phosphorylation of Cdc2 (Tyr 15) was decreased, but the phosphorylation of Wee1 (Ser 642) was maintained, demonstrating that RSK directly controls phosphorylation of Cdc25C (Ser 216), but not the activity of Wee1. These results strongly suggest that actin dysfunction in primary cells activates ERK1/2 to inhibit Cdc2, delaying the cell cycle at G2/M by activating downstream RSK, which phosphorylates and blocks Cdc25C, and by directly activating Wee1.
Kim, Koo-Seul;Kawasaki, Ichiro;Chong, Youhoon;Shim, Yhong-Hee
Molecules and Cells
/
제27권3호
/
pp.345-350
/
2009
We previously reported that flavone induces embryonic lethality in Caenorhabditis elegans, which appeared to be the result of cell cycle arrest during early embryogenesis. To test this possibility, here we examined whether flavone inhibits the activity of a key cell cycle regulator, CDC-25.1 in C. elegans. A gain-of-function cdc-25.1 mutant, rr31, which exhibits extra cell divisions in intestinal cells, was used to test the inhibitory effects of flavone on CDC-25 activity. Flavone inhibited the extra cell divisions of intestinal cells in rr31, and modifications of flavone reduced the inhibitory effects. The inhibitory effects of flavone on CDC-25.1 were partly, if not completely, due to transcriptional repression.
본 연구에서는 명아주과 수송나물속 솔장다리(Salsola collina Pall.) 추출물의 항산화 및 항암 활성을 분석하였다. 먼저 솔장다리의 에탄올 추출물의 DPPH radical scavenging activity를 분석한 결과, $IC_{50}$가 $4.82{\mu}g/ml$로 나타나 강한 항산화능을 보유하였음을 확인하였다. 또한 대장암 세포주(HT29), 폐암 세포주(A549), 간암 세포주(HepG2)를 사용하여 솔장다리 추출물의 암세포 사멸효과를 분석한 결과, $IC_{50}$가 각각 43.8, 64.1, $92.5{\mu}g/ml$로 강력한 세포사멸효과를 나타냈으며 특히 HT29에 대한 강한 사멸효과를 보였다. 솔장다리 추출물의 항암 활성 기전 분석을 위해 세포주기를 분석한 결과, 대장암세포인 HT29의 G2/M arrest를 유도하였으며 최고 농도인 $60{\mu}g/ml$까지 S기 세포수가 증가하였다. 세포주기관련 단백질의 발현 분석 결과, 솔장다리 추출물을 처리한 경우, G2기에서 M기로의 전이에 필수적인 단백질인 Cdc25C와 cyclin A의 발현이 감소되었고, 반면 Cdc25C와 Cdc2의 불활성화 형태인 p-Cdc25C, p-Cdc2는 증가하였다. 또한 p21과 Wee1의 발현도 증가되었다. 하지만 p53의 발현량은 변화가 없었다. 이러한 결과는 솔장다리 추출물을 처리한 경우, p53 비의존적으로 p21의 발현이 증가되어 cyclin A/Cdc2 complex의 활성이 조절되고, 이어서 G2/M phase의 check point에 작용하는 Wee1의 발현증가 및 Cdc25C, Cdc2의 인산화에 의한 불활성화를 통하여 G2/M arrest가 유도되는 것을 시사한다. 또한 솔장다리 추출물 처리에 의해 S기 진행을 조절하는 Cdk2의 발현량도 감소하여, cyclin A/Cdk2 complex가 감소되어 S기의 세포수가 증가한 것으로 보인다. 따라서 본 연구 결과를 통해 솔장다리 추출물이 높은 항산화 활성을 지니며 암세포의 세포주기를 조절하여 높은 항암 활성을 보유함을 확인하였다.
Park, Chang-Eun;Kim, Young-Hoon;Jeon, Eun-Hyun;Lee, Suman;Lee, Sook-Hwan;Lee, Kyung-Ah
한국발생생물학회:학술대회논문집
/
한국발생생물학회 2003년도 전기 한국발생생물학회 제16차 학술대회논문집
/
pp.21-23
/
2003
Mechanisms regulate the arrest and growth of the resting primordial follicles are very poorly understood. To elucidate genes involved in the early folliculogenesis, we conducted suppression subtractive hybridization using mRNA from day1 and day5 ovaries and selected weel for further analysis, since it was most frequent gene in the day1-subtracted cDNA library (1). Expression of weel and correlated components of the cell cycle machinery, such as cdc2, cyclin B1, cdc25C, and phosphorylated cdc2 was evaluated by immunohistochemistry. In primordial follicles, expression of weel, cdcw, and cyclin B1 was cytoplasmic in oocytes, but phosphorylated cdc2 was weakly expressed in oocytes. While cdc25C expression was in ovarian somatic and in some theca cells. None of components was expressed in the pre-granulosa cells of the primordial follicles, while weel weakly, and cdc2 and cyclin B1 was strongly expressed in the granulosa cells of the growing follicles. Results from the present study suggest that 1) the mejotic arrest of the oocytes may not due to of cell cycle machinery, and 2) the weel may arrest meiosis by sequestering cdc2 and cyclin B1 in the cytoplasm by protein-protein interactions and/or by inhibitory phosphorylation.
Purpose: Several studies have shown that the oral cavity is a secondary location for Helicobacter pylori colonization and that H. pylori is associated with the severity of periodontitis. This study investigated whether H. pylori had an effect on the periodontium. We established an invasion model of a standard strain of H. pylori in human periodontal ligament fibroblasts (hPDLFs), and evaluated the effects of H. pylori on cell proliferation and cell cycle progression. Methods: Different concentrations of H. pylori were used to infect hPDLFs, with 6 hours of co-culture. The multiplicity of infection in the low- and high-concentration groups was 10:1 and 100:1, respectively. The Cell Counting Kit-8 method and Ki-67 immunofluorescence were used to detect cell proliferation. Flow cytometry, quantitative real-time polymerase chain reaction, and western blots were used to detect cell cycle progression. In the high-concentration group, the invasion of H. pylori was observed by transmission electron microscopy. Results: It was found that H. pylori invaded the fibroblasts, with cytoplasmic localization. Analyses of cell proliferation and flow cytometry showed that H. pylori inhibited the proliferation of periodontal fibroblasts by causing G2 phase arrest. The inhibition of proliferation and G2 phase arrest were more obvious in the high-concentration group. In the low-concentration group, the G2 phase regulatory factors cyclin dependent kinase 1 (CDK1) and cell division cycle 25C (Cdc25C) were upregulated, while cyclin B1 was inhibited. However, in the high-concentration group, cyclin B1 was upregulated and CDK1 was inhibited. Furthermore, the deactivated states of tyrosine phosphorylation of CDK1 (CDK1-Y15) and serine phosphorylation of Cdc25C (Cdc25C-S216) were upregulated after H. pylori infection. Conclusions: In our model, H. pylori inhibited the proliferation of hPDLFs and exerted an invasive effect, causing G2 phase arrest via the Cdc25C/CDK1/cyclin B1 signaling cascade. Its inhibitory effect on proliferation was stronger in the high-concentration group.
Bufonis venenum (dried toad venom; Chinese name, Chan su) is a traditional Chinese medicine obtained from the skin venom gland of the toad. It has long been used in treating arrhythmia and other heart diseases in China and other Asian countries. Additionally, Bufonis venenum has been reported to selectively inhibit the growth of various lines of human cancer cells. In the present study, it was examined the effects of extract of Bufonis venenum (EBV) on the growth of human bladder carcinoma cell line T24 in order to investigate the anti-proliferative mechanism and induction of apoptosis by EBV. Treatment of T24 cells to EBV resulted in the growth inhibition, morphological change and induction of apoptotic cell death in a dose-dependent manner. Flow cytometric analysis revealed that EBV treatment caused G2/M phase arrest of the cell cycle and down-regulation of cyclin A, cyclin B1 and Cdc2, which was associated with a marked up-regulation of cyclin-dependent kinases (Cdks) inhibitor p21 (WAF1/CIP1) in a p53-independent manner. The Cdc25C expression was also significantly inhibited by EBV treatment, however Wee1 kinase expression was not affected. The induction of apoptotic cell death by EBV was connected with down-regulation of anti-apoptotic Bcl-XS/L expression without alteration pro-apoptotic Bax expression. Taken together, these findings suggest that EBV may be a potential chemotherapeutic agent for the control of human bladder carcinorma cells and further studies will be needed to identify the active compounds that confer the anti-cancer activity of EBV.
본 웹사이트에 게시된 이메일 주소가 전자우편 수집 프로그램이나
그 밖의 기술적 장치를 이용하여 무단으로 수집되는 것을 거부하며,
이를 위반시 정보통신망법에 의해 형사 처벌됨을 유념하시기 바랍니다.
[게시일 2004년 10월 1일]
이용약관
제 1 장 총칙
제 1 조 (목적)
이 이용약관은 KoreaScience 홈페이지(이하 “당 사이트”)에서 제공하는 인터넷 서비스(이하 '서비스')의 가입조건 및 이용에 관한 제반 사항과 기타 필요한 사항을 구체적으로 규정함을 목적으로 합니다.
제 2 조 (용어의 정의)
① "이용자"라 함은 당 사이트에 접속하여 이 약관에 따라 당 사이트가 제공하는 서비스를 받는 회원 및 비회원을
말합니다.
② "회원"이라 함은 서비스를 이용하기 위하여 당 사이트에 개인정보를 제공하여 아이디(ID)와 비밀번호를 부여
받은 자를 말합니다.
③ "회원 아이디(ID)"라 함은 회원의 식별 및 서비스 이용을 위하여 자신이 선정한 문자 및 숫자의 조합을
말합니다.
④ "비밀번호(패스워드)"라 함은 회원이 자신의 비밀보호를 위하여 선정한 문자 및 숫자의 조합을 말합니다.
제 3 조 (이용약관의 효력 및 변경)
① 이 약관은 당 사이트에 게시하거나 기타의 방법으로 회원에게 공지함으로써 효력이 발생합니다.
② 당 사이트는 이 약관을 개정할 경우에 적용일자 및 개정사유를 명시하여 현행 약관과 함께 당 사이트의
초기화면에 그 적용일자 7일 이전부터 적용일자 전일까지 공지합니다. 다만, 회원에게 불리하게 약관내용을
변경하는 경우에는 최소한 30일 이상의 사전 유예기간을 두고 공지합니다. 이 경우 당 사이트는 개정 전
내용과 개정 후 내용을 명확하게 비교하여 이용자가 알기 쉽도록 표시합니다.
제 4 조(약관 외 준칙)
① 이 약관은 당 사이트가 제공하는 서비스에 관한 이용안내와 함께 적용됩니다.
② 이 약관에 명시되지 아니한 사항은 관계법령의 규정이 적용됩니다.
제 2 장 이용계약의 체결
제 5 조 (이용계약의 성립 등)
① 이용계약은 이용고객이 당 사이트가 정한 약관에 「동의합니다」를 선택하고, 당 사이트가 정한
온라인신청양식을 작성하여 서비스 이용을 신청한 후, 당 사이트가 이를 승낙함으로써 성립합니다.
② 제1항의 승낙은 당 사이트가 제공하는 과학기술정보검색, 맞춤정보, 서지정보 등 다른 서비스의 이용승낙을
포함합니다.
제 6 조 (회원가입)
서비스를 이용하고자 하는 고객은 당 사이트에서 정한 회원가입양식에 개인정보를 기재하여 가입을 하여야 합니다.
제 7 조 (개인정보의 보호 및 사용)
당 사이트는 관계법령이 정하는 바에 따라 회원 등록정보를 포함한 회원의 개인정보를 보호하기 위해 노력합니다. 회원 개인정보의 보호 및 사용에 대해서는 관련법령 및 당 사이트의 개인정보 보호정책이 적용됩니다.
제 8 조 (이용 신청의 승낙과 제한)
① 당 사이트는 제6조의 규정에 의한 이용신청고객에 대하여 서비스 이용을 승낙합니다.
② 당 사이트는 아래사항에 해당하는 경우에 대해서 승낙하지 아니 합니다.
- 이용계약 신청서의 내용을 허위로 기재한 경우
- 기타 규정한 제반사항을 위반하며 신청하는 경우
제 9 조 (회원 ID 부여 및 변경 등)
① 당 사이트는 이용고객에 대하여 약관에 정하는 바에 따라 자신이 선정한 회원 ID를 부여합니다.
② 회원 ID는 원칙적으로 변경이 불가하며 부득이한 사유로 인하여 변경 하고자 하는 경우에는 해당 ID를
해지하고 재가입해야 합니다.
③ 기타 회원 개인정보 관리 및 변경 등에 관한 사항은 서비스별 안내에 정하는 바에 의합니다.
제 3 장 계약 당사자의 의무
제 10 조 (KISTI의 의무)
① 당 사이트는 이용고객이 희망한 서비스 제공 개시일에 특별한 사정이 없는 한 서비스를 이용할 수 있도록
하여야 합니다.
② 당 사이트는 개인정보 보호를 위해 보안시스템을 구축하며 개인정보 보호정책을 공시하고 준수합니다.
③ 당 사이트는 회원으로부터 제기되는 의견이나 불만이 정당하다고 객관적으로 인정될 경우에는 적절한 절차를
거쳐 즉시 처리하여야 합니다. 다만, 즉시 처리가 곤란한 경우는 회원에게 그 사유와 처리일정을 통보하여야
합니다.
제 11 조 (회원의 의무)
① 이용자는 회원가입 신청 또는 회원정보 변경 시 실명으로 모든 사항을 사실에 근거하여 작성하여야 하며,
허위 또는 타인의 정보를 등록할 경우 일체의 권리를 주장할 수 없습니다.
② 당 사이트가 관계법령 및 개인정보 보호정책에 의거하여 그 책임을 지는 경우를 제외하고 회원에게 부여된
ID의 비밀번호 관리소홀, 부정사용에 의하여 발생하는 모든 결과에 대한 책임은 회원에게 있습니다.
③ 회원은 당 사이트 및 제 3자의 지적 재산권을 침해해서는 안 됩니다.
제 4 장 서비스의 이용
제 12 조 (서비스 이용 시간)
① 서비스 이용은 당 사이트의 업무상 또는 기술상 특별한 지장이 없는 한 연중무휴, 1일 24시간 운영을
원칙으로 합니다. 단, 당 사이트는 시스템 정기점검, 증설 및 교체를 위해 당 사이트가 정한 날이나 시간에
서비스를 일시 중단할 수 있으며, 예정되어 있는 작업으로 인한 서비스 일시중단은 당 사이트 홈페이지를
통해 사전에 공지합니다.
② 당 사이트는 서비스를 특정범위로 분할하여 각 범위별로 이용가능시간을 별도로 지정할 수 있습니다. 다만
이 경우 그 내용을 공지합니다.
제 13 조 (홈페이지 저작권)
① NDSL에서 제공하는 모든 저작물의 저작권은 원저작자에게 있으며, KISTI는 복제/배포/전송권을 확보하고
있습니다.
② NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 상업적 및 기타 영리목적으로 복제/배포/전송할 경우 사전에 KISTI의 허락을
받아야 합니다.
③ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 보도, 비평, 교육, 연구 등을 위하여 정당한 범위 안에서 공정한 관행에
합치되게 인용할 수 있습니다.
④ NDSL에서 제공하는 콘텐츠를 무단 복제, 전송, 배포 기타 저작권법에 위반되는 방법으로 이용할 경우
저작권법 제136조에 따라 5년 이하의 징역 또는 5천만 원 이하의 벌금에 처해질 수 있습니다.
제 14 조 (유료서비스)
① 당 사이트 및 협력기관이 정한 유료서비스(원문복사 등)는 별도로 정해진 바에 따르며, 변경사항은 시행 전에
당 사이트 홈페이지를 통하여 회원에게 공지합니다.
② 유료서비스를 이용하려는 회원은 정해진 요금체계에 따라 요금을 납부해야 합니다.
제 5 장 계약 해지 및 이용 제한
제 15 조 (계약 해지)
회원이 이용계약을 해지하고자 하는 때에는 [가입해지] 메뉴를 이용해 직접 해지해야 합니다.
제 16 조 (서비스 이용제한)
① 당 사이트는 회원이 서비스 이용내용에 있어서 본 약관 제 11조 내용을 위반하거나, 다음 각 호에 해당하는
경우 서비스 이용을 제한할 수 있습니다.
- 2년 이상 서비스를 이용한 적이 없는 경우
- 기타 정상적인 서비스 운영에 방해가 될 경우
② 상기 이용제한 규정에 따라 서비스를 이용하는 회원에게 서비스 이용에 대하여 별도 공지 없이 서비스 이용의
일시정지, 이용계약 해지 할 수 있습니다.
제 17 조 (전자우편주소 수집 금지)
회원은 전자우편주소 추출기 등을 이용하여 전자우편주소를 수집 또는 제3자에게 제공할 수 없습니다.
제 6 장 손해배상 및 기타사항
제 18 조 (손해배상)
당 사이트는 무료로 제공되는 서비스와 관련하여 회원에게 어떠한 손해가 발생하더라도 당 사이트가 고의 또는 과실로 인한 손해발생을 제외하고는 이에 대하여 책임을 부담하지 아니합니다.
제 19 조 (관할 법원)
서비스 이용으로 발생한 분쟁에 대해 소송이 제기되는 경우 민사 소송법상의 관할 법원에 제기합니다.
[부 칙]
1. (시행일) 이 약관은 2016년 9월 5일부터 적용되며, 종전 약관은 본 약관으로 대체되며, 개정된 약관의 적용일 이전 가입자도 개정된 약관의 적용을 받습니다.