Min-A Je;Haneul Lee;Heechul Park;Dong Hyeok Kim;Yeongdon Ju;Jaewon Lim;Sunghyun Kim;Jungho Kim
Biomedical Science Letters
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v.29
no.1
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pp.48-52
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2023
Formaldehyde use is associated with serious health risks, which can affect medical personnel and technicians. Therefore, we investigated the efficacy of an alternative fixative, with respect to two types of formalin fixatives, by hematoxylin and eosin (H&E) staining, periodic acid Schiff (PAS) staining, immunohistochemical (IHC) staining, and RNA extraction. For H&E staining, the circular nucleus was stained dark blue by the basic dye hematoxylin and the cytoplasm was stained red by the acid dye eosin in all three fixative samples. No difference was found in the Duksan General Science (DGS), Sigma-Aldrich, and Core-Fix fixative samples (Corebiotech) used to fix kidney tissue, after PAS staining. IHC staining showed that CD4 was significantly increased in the lippolysaccharide (LPS)-treated group compared to the control group (vehicle), confirming the changes in specific molecules. The quantity and quality of RNA from tissues fixed in the three types of fixatives were evaluated. The average concentration of RNA was 106 ng/µL and average purity at A 260/280 ratio was 1.7~2.0, regardless of fixative used. For quality of protein, glyceraldehyde 3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) protein was confirmed by Western blotting. In conclusion, Core-Fix can be used as a fixative for pathological tissues, in histological and molecular diagnoses.
Aim of the study: An alternative source of adult stem cells that could be obtained in large quantities, under local anesthesia, with minimal discomfort would be advantageous. Adipose tissue could be processed to obtain a fibroblast-like population of cells or adipose tissue-derived stromal cells (ATSCs). This study was performed to confirm the availability of ATSCs in bone tissue engineering. Materials amp; Methods: In this study, adipose tissue-derived mesenchymal stem cell was extracted from the liposuctioned abdominal fat of 24-old human and cultivated, and the stem cell surface markers of CD 105 and SCF-R were confirmed by immunofluorescent staining. The proliferation of bone marrow mesenchymal stem cell and ATSCs were compared, and evaluated the osteogenic differentiation of ATSCs in a specific osteogenic induction medium. Osteogenic differentiation was assessed by von Kossa and alkaline phosphatase staining. Expression of osteocyte specific BMP-2, ALP, Cbfa-1, Osteopontin and osteocalcin were confirmed by RT-PCR. With differentiation of ATSCs, calcium concentration was assayed, and osteocalcin was evaluated by ELISA (Enzyme-linked immunosorbant assay). The bone formation by 5-week implantation of HA/TCP block loaded with bone marrow mesenchymal stem cells and ATSCs in the subcutaneous pocket of nude mouse was evaluated by histologic analysis. Results: ATSCs incubated in the osteogenic medium were stained positively for von Kossa and alkaline phosphatase staining. Expression of osteocyte specific genes was also detected. ATSCs could be easily identified through fluorescence microscopy, and bone formation in vivo was confirmed by using ATSC-loaded HA/TCP scaffold. Conclusions: The present results show that ATSCs have an ability to differentiate into osteoblasts and formed bone in vitro and in vivo. So ATSCs may be an ideal source for further experiments on stem cell biology and bone tissue engineering.
The prevalence of primary liver carcinoma (PLC) is relatively high in Clonorchis sinensis (CS) endemic areas in Korea. PLC is a malignant tumor which can be subclassified into hepatocellular carcinoma and cholangiocarcinoma(CC). CC has been associated with clonorchiasis, but it is unclear whether clonorchiasis is associated with hepatocarcinogenesis. This experiment was designed to investigate relationships between clonorchiasis and early changes of hepatocarcinogenesis. Sixteen Sprague-Dawley rats weighing 150g were divided into two groups of 8 rats in each. All rats were fed choline-devoid(CD) diet for 4 weeks. Group 1 was given 0.015-0.020% diethylnitrosamine(DEN) as drinking water for 1 week. After one week, the rats were treated orally with 1% N-acetylaminofluorene(AAF) (5 times per week for 2 weeks). Group 2 was treated equally to group 1 except for CS infection during AAF treatment. Two rats in each group were sacrificed at 4th, 5th, 6th and 7th week of the experiment. Livers were stained with OV -6, proliferating cell nuclear antigen(PCNA) and GST-p. Results were as follows: Group 2 livers showed more oval cell proliferation in parenchyma and portal areas at the 4th, 5th, 6th and 7th weeks than did livers of group 1 (p<0.01). PCNA was mostly localized in oval cell populations, rather than hepatocytes and biliary cells. The ratio of oval cells to hepatocytes was much higher in group 2 than in group l(p<0.01 The ratio of hepatocytes to biliary cells is higher in group 2 than in group 1 (p<0.05), More group 2 acidophilic foci reacted to GST-p monoclonal antibody than in the noninfected group. It appeared that CS infection promoted potentially precancerous acidophilic foci and oval cell proliferation.
Park Hee Ra;Kim Meehye;Kwun Ki-Sung;Kim Soon Ki;Heo Su-Jeong;Kim Kwang_Jin;Yum Tae-Kyung;Choi Kwang Sik;Kim Soo Yeon
Journal of Food Hygiene and Safety
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v.20
no.2
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pp.83-88
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2005
This study was conducted to estimate the contents of heavy metals including lead, cadmium, zinc, copper as well as iron status(serum iron, total iron binding capacity, feritin etc)in blood samples of middle school students(n=300). The contents of heavy metals were determined using the GF-AAS (Graphite furnace Atomic Absorption Spectrophotometer). The microwave digestion method and dilution method were compared. The dilution method showed the better recovery and detection limit than microwave digestion method. The values of toxic metals in whloe blood of boys & girls were 3.46 & 3.05 for Pb,0.063 & 0.065 for Cd respectively (ug/dL). Also the values of trace metals in serum of boys & girls were 105.9 & 92.6 for Zn, 98.3 & 99.0 for Cu respectively (ug/dL). The prevalence of iron deficiency was $7.5\%$ in 146 boys and $14.3\%$ in 156 girls. The mean values of lead in girls were higher in iron deficiency, iron deficiency anemia and anemia groups than normal group. The mean values of lead and zinc were higher in boys compared to those in girls(P<0.05), the mean values of cadmium and copper in boys were similar to those in girls. Our results of toxic metals such as Pb & Cd showed lower to CDC's(Centers for Disease Control) blood lead levels of concern for children, 10 ug/dL.
This experiment was conducted to investigate available extraction capacity and potential mobility of heavy metal according to the distribution property and contamination level of heavy metals in soils and to suggest a reform measure of soil environment assessment methodology applied with soil quality and the official soil heavy metal test methods in domestic and foreign countries. The soils were collected from the natural forest paddy with long-term application of same type fertilizer, and paddies near metal mine and industrial complex. The post-treatment methods of soil were partial extraction, acid digestion and sequential extraction methods. For the heavy metal contents with different soil properties, it was shown that their natural forest and paddy soil were slightly low and similar to the general paddy soil, while their paddies near metal mine and industrial complex were higher than the standard level of Soil Environment Protection Act. Heavy metal concentrations in the soils with different soil properties had difference between $HNO_3\;and\;HNO_3+HCl$ extractant by US-EPA 3051a method. There were highly significant positive relationships in both two methods. It was appeared that the higher extractable concentration ratio with 0.1N-HCl to total heavy metal content with $HNO_3+HCl$ extractant the greater total heavy metal content. There were highly significant positive correlationship between total heavy metal content and extractable content with 0.1N-HCl. For extractable capacity of soil extractable solution compared to the total heavy metal content it was appeared that it extractable method with 0.1N-HCl was higher than those with EDTA and DTPA. In extractable ratio with 0.1N-HCl in the contaminated paddy soils near mine and industrial complex, it was shown that the lower soil pH, the higher total heavy metal content. The order of a potential mobility coefficient by distribution of heavy metal content with ie different typies in the soil was Cd>Ni>Zn>Cu>Pb. It could be known that contamination characteristics of heavy metals with different types of soils were affected by different heavy metal components, contamination degree and soil chemical properties, and heavy metal concentration with different extractable methods had great variations with adjacent environment. To be compared with assessment methodology of soil environment impact at domestic and foreign countries with our results, it might be considered that there was necessary to make a single analysis method based on total heavy metal content with environmental overloading concept because of various analysis methods for total heavy metal content and present analysis method with great variation according to soil environment. In spite of showing higher concentration of heavy metal with acidic digestion than the extractable method, it might be considered that there is need to be adjusted the national standard of soil heavy metal contamination.
Physical and chemical properties of the aggregate by-products including sludge and crushed dust samples collected from the 21 private companies throughout the country were analyzed to evaluate possible usage of the by-products as artificial soil materials for plantation. The pH of the materials ranged from 8.0 to 11.0. The organic matter content was $2.85g\;kg^{-1}$, and the total nitrogen content and available phosphate content were low as 0.7 percents and $12.98mg\;kg^{-1}$, respectively. Exchangeable $Ca^{2+}$, $Mg^{2+}$, $K^+$, and $Na^+$ were 2.29, 0.47, 0.02 and $0.05cmol\;kg^{-1}$, respectively. Heavy metal contents were lower than the limits regulated by environmental law of Korea. Textural analysis showed that most of the materials were silt loam with low water holding capacity ranged from 0.67 to 7.41 percents, and with low hydraulic conductivity ranged from 0.4 to $2.8m\;s^{-1}$. Mineralogical analysis showed that the aggregate by product materials were mostly composed of silicate, alumina and ferric oxides except calcium oxide dominant materials derived from limestones. The primary minerals were quartz, feldspars and dolomites derived from granite and granitic gneiss materials. Some samples derived from limestone material showed calcite and graphite together with the above minerals. According to the result, it can be concluded that the materials could be used as the artificial soil material for plantation after proper improvement of the physico-chemical properties and fertility.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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