The effect of methanol extract from Agaricus blazei Murill on the hepatotoxicity was investigated $CCl_4$ is one of the oldest and most widely used toxins for the induction of hepatic damages and fibrosis in experimental animals. In this study, male Sprague-Dawley(SD) rats were randomly divided into 6 groups of the control(C), $CCl_4(T),\;CCl_4$ and high fat group(TL) with matching sub-groups of Agaricus blazei Murill extract-fed groups of CA, TA and TLA. Methanol extracts of Agaricus blazei Murill were fed 50 mg/kg B.W daily via drinking water. A 1.2 mL of $CCl_4/kg$ body weight was administered by oral intubation twice a week for total of six times. The levels of total-cholesterol, TG, LDL and LDL-phospholipids were elevated by $CCl_4$ treatment as compared to the control(C). However, Agaricus blazei Murill methanol extract feeding in the group of TA and TLA significantly(p<0.05) decreased TG by 53.1 % and 17.9% compared to the internal control of T and TL, respectively. Triglyceride of TL was increased by 3.33 times(p<0.05) compared to the control(C) with $CCl_4$ and high fat administration from 3.78 mg/g to 12.60 mg/g liver. The extract(CA) also reduced kidney weight compared to the control(C). With the administration of high fat and $CCl_4$(TLA), the extract reduced the organ weight of both liver and kidney and further, significantly reduced TG, total cholesterol and GTP activity. Hepatoprotective effects of Agaricus blazei Murill on GOT, GPT, AP and LDH activities were enhanced by the extract feeding. Electronmicrograph showed that $CCl_4$ deteriorated the structure of cytoplasmic matrix with its uneven distribution. However, the extract reconstituted the damaged cytoplasm and stimulated mitochondriogenesis. The above results suggest that Agaricus blazei Murill may have a possible protective effect against chemically induced liver damage and further help to reduce the symptoms of fatty liver.
생무우(태백무우, 알타리무우)에 존재하는 휘발성 함유황화합물을 수증기 증류 및 용매추출($CCl_4$)방법에 의해 추출하여 GC/MS 분석법에 의해 분리 확인하였다. 수증기 증류로 얻은 2종 무우의 휘발성 함유황 성분들의 GC profile은 유사하였으며, 4-methyl-pentyl, 3-methylthiopropyl, 4-methylthio-3-butenyl, 4-rnethylthiobutyl, 5-methylthiopentyl isothiocyanate 와 5-methylthio-4-pentenenitrile, 1-methylthio-3-pentanone, dimethyl sulfides 등이 분리 확인되었다. 한편 $CCl_4$추출물에는 4-methylsulfinyl-3-butenyl isothiocyanate도 존재하였다. 수증기 증류에서 는 4-methylthiobutyl isothiocyanate가, 그리고 $CCl_4$추출에서 는 4-methylthio-3-butenyl isothiocyanate가 각각 주된 휘발성 함유황 화합물이었다.
Ki, Sung Hwan;Yang, Ji Hye;Ku, Sae Kwang;Kim, Sang Chan;Kim, Young Woo;Cho, Il Je
Journal of Ginseng Research
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제37권1호
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pp.45-53
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2013
Korean red ginseng, the processed root of Panax ginseng Meyer, has been frequently used for various therapeutic purposes in oriental medicine. The present study investigated the possible effect of Korean red ginseng extract (RGE) for the treatment of liver fibrosis in mice injected with carbon tetrachloride ($CCl_4$) for 4 wk. Liver injuries were assessed by blood biochemistry and histopathology in mice treated with $CCl_4$ alone or $CCl_4$+ RGE (30, 100, and 300 mg/kg). Concomitant treatment with RGE and $CCl_4$ (three times/wk for 4 wk) effectively inhibited liver fibrosis as evidenced by decreases in plasma alanine and aspartate aminotransferases, as well as by the percentages of degenerative regions, numbers of degenerative hepatocytes, and collagen accumulation in hepatic parenchyma. Treatment with $CCl_4$ for 4 wk increased mRNA levels of transforming growth factor ${\beta}1$ and plasminogen activator inhibitor 1 in fibrogenic liver, whereas RGE (30, 100, and 300 mg/kg) significantly blocked the induction of fibrogenic genes by $CCl_4$. Similarly, RGE also prevented transforming growth factor ${\beta}1$-mediated induction of fibrogenic genes in human hepatic stellate cell lines. More importantly, RGE markedly reduced the number of ${\alpha}$-smooth muscle actin-positive cells in liver tissue. This study implies that RGE efficaciously protects against the liver fibrosis induced by chronic $CCl_4$ treatment, and may therefore have potential to treat liver disease.
간독성물질인 $CCl_4$의 대사에서 반응성이 높은 대사중간체의 증가가 P450 2E1의 활성 및 발현증가와 관련된다. YH439는 랫트에서 사염화탄소에 의하여 유발된 간 손상에 보호효과가 탁월하였고, 각종 독성물질에 의하여 발생하는 간염을 억제하며 P450 2E1의 발현을 억제하는 것으로 나타났다. P450 2E1의 발현억제가 YH439의 간장보호작용의 일부기전으로 해석되나 free radical 공격의 제어, 방어과정에 관련된 탐식세포의 역할등 간장독성에 관련된 YH439의 영향 및 관련된 기초연구는 완전히 확립되어 있지 않다. 본 연구에서는 상승적인 화학적 독성에 대한 YH439의 보호효과를 관찰하였다. Retinoyl palmiate (Vit-A)를 전처러하고 YH439를 처리한 rat의 경우 $CCl_4$ 단독투여군에 비하여 혈장 alanine aminotransferase (ALT)활성이 5배로 증가하여 $CCl_4$에 의한 간독성을 현저히 강화시켰으나, YH439와 Vit-A를 동시에 전처리한 rats에 있어서는 Vit-A에 의하여 강화된 독성이 94% 감소하였다. Vit-A에 의한 혈장 ALT 활성 증가는 Kupffer cell 활성을 선택적으로 억제하는 $GdCl_3$의 투여에 의해 완전히 차단되어 YH439가 Kupffer cell 활성억제를 매개로 상승적 간손상에 대하여 보호효과가 있음을 지지한다. Propyl sulfide의 전처치는 $CCl_4$에 의해 유도되는 간독성을 $CCl_4$ 단독투여와 비교했을때 5배 이상 증가시켰으나, Propyl sulfide와 YH439를 병용투여할 경우 propyl sulfide에 의해 강화되는 간독성이 YH439의 투여용량에 의존적으로 감소하였고, propyl sufide와 $CCl_4$에 의한 지질과산화의 증가가 YH439에 의하여 용량의존적으로 억제되는 것으로 나타났다. Propyl sulfide에 의하여 강화된 간독성의 차단은 YH439가 P450 2E1 발현조절을 통하여 간독성을 제어함을 지지한다. 그러나 YH439는 pyridine과 $CCl_4$에 의한 독성을 억제시키지 못하였다. 이는 Pyridine에 의해 유도되는 다른 형의 P450발현이 YH439에 의해 억제되지 못하는 이유로 해석된다. 중금속에 의해 유도되는 간독성에 대한 YH439의 보호효과를 ICR mice에서 관찰하였을 때 $CdCl_2$를 1회 투여할때 ALT와 aspartate aminotransferase (AST)활성이 $5{\sim}6$배 증가하였으나 YH439를 투여한 후 $CdC1_2$를 투여한 동물에 있어서는 투여후 6시간에 AST의 증가가 유의성 있게 억제되었다. 그러나 YH439는 thioacetamide에 의하여 유발된 liver fibrosis에는 개선효과가 없는 것으로 나타났다. 이러한 결과는 YH439가 Kupffer cell 불활성화를 통하여 Vit-A에 의해 유도되는 간독성을 효과적으로 방어하고, YH439에 의한 P450 2E1의 발현억제는 propyl sulfide를 경유하는 간독성 차단과 관계되며, YH439는 중금속으로 유도된 조직독성에 방어효과가 있음을 지지한다.
본 논문에서는 HDI(High Density Interconnection) 기판의 코어로 사용될 수 있는 카본 CCL(Copper Claded Layer)의 열거동 및 신뢰성 특성을 실험과 CAE를 이용한 수치해석을 통해 평가하였다. 카본 CCL의 특성평가를 위해 기존 FR-4 코어와 heavy cu 코어와 비교하였다. 연구결과에 의하면 pitch계열 카본코어가 적용된 PCB의 휨강도가 가장 높고 온도에 따른 변형량이 가장 낮았다. 또한, HDI 신뢰성평가 기준의 TC(Thermal Cycling), LLTS(Liquid-to-Liquid Thermal Shock), Humidity 실험을 통해 카본코어가 적용된 PCB는 신뢰성이 확보되었음을 확인하였다. 카본 파이버에 의한 불균일한 비아홀의 표면형상 여부와 드릴비트 마모 가능성을 분석하였는데 비아홀의 표면은 균일하고, 드릴비트의 표면도 매끄러워 카본 CCL의 우수한 드릴가공성도 확인하였다.
The present study was undertaken to investigate the inhibition effects of sancho(Zanthoxylum schinifolium) on lipid peroxidation and liver damage in carbon tetrachloride tetracloride-treated mice. Mice aged 3 weeks old were fed diets containing either dry sancho powder, methanol extract or hyperoside isolated from sancho at the various levels for 2 weeks(sancho, methanol extract from sancho) or 3 days (hyperoside) before $CCl_{4}$ treatments. Seed coats of sancho added to diet with the levels from 1.25 to 5.0% significantly reduced(p<0.001) thiobarbituric acid reactive substances(TBARS) formation in liver and serum of mice treated with carbon tetrachloride. $CCl_{4}$ treatments significantly increased (p<0.001) in liver TBARS comparing with those of the untreated control, while methanol extract from the seed coat of sancho added to diet with the levels from 0.5 to 1.0% significantly reduced (p<0.01) to 20mg per kg of body weight showed significant reduction(p<0.01, p<0.001) of liver TBARS in mice treated with $CCl_{4}$. $CCl_{4}$ treatments significantly increased(p<0.05) in serum TBARS comparing with those the levels from 0.5 to 1.0% significantly reduced(p<0.01) serum TBARS in mice treated with $CCl_{4}$, and administration of hyperoside with the levels from 10 to 20mg per kg of body weight showed significant reduction(p<0.01, p<0.001) of serum TBARS in mice treated with $CCl_{4}$. $CCl_{4}$ significantly increased(p<0.001) in serum AST activities comparing with those of the untreated control, while either addition(0.5, 1.0%) of methanol extract from sancho or administration(10, 20mg/kg) of hyperoside significantly reduced(p<0.001, p<0.05) serum AST activities in $CCl_{4}$-treated mice. $CCl_{4}$ treatments showed significant increases(p<0.001) in serum ALT activities comparing with those of the untreated control, while either addition(0.5, 1.0%) of methanol extract from sancho or administration (10, 20mg/kg) of hyperoside showed moderate decreases(p<0.01, p<0.001) serum ALT activities in $CCl_{4}$-treated mice.
꾸지뽕 당단백질이 간의 조직에 존재하는 항산화계 해독효소의 활성을 증가시켜서 $CCl_4$로 유도된 간독성화 과정에서 생성된 ROS에 의해 야기되는 산화적 스트레스를 억제하는 scavenger로서 기능을 가지고 있는 것으로 분석된다. 또한 혈청 중 LDH 활성증가는 간 및 기타조직의 질환 및 악성 종양 등에서 나타나는 소견으로 LDH를 내포한 조직이 파괴될 때 혈액으로 흘러나와 혈중 LDH가 상승하며, 혈액 중 지질과산화 반응은 생체조직막의 다가불포화지방산 유리기에 의해 산화적 분해를 일으키는 지표로 사용되는 TBARS의 수치, DNA 염기의 deamination 등을 유도함으로써, 유전자의 돌연변이(mutagenesis)로 인한 세포독성을 일으키는 NO 등의 수치가 유의적인 수준으로 억제될 뿐만 아니라, 염증 매개시 단백질인 NF-kB(p50)을 억제함으로써 $CCl_4$에 의한 간독성 과정에서 촉진된 염증 신호전달기전을 억제할 수 있었다. 따라서 꾸지뽕 당단백질은 탁월한 천연 항산화제로서 간의 독성 및 염증 반응을 억제하는 것으로 실험결과 분석된다.
다슬기와 마늘 혼합건조분말(3 g/kg b.w. in saline, 7 : 3 ratio, p.o.)의 전처리가 $CCl_4$(1 g/hg b.w in corn oil)의 경구 투여로 유도된 간손상 실험동물모델에 미치는 간보호 효능을 확인하기 위하여 혈청 중 간기능 지표효소 활성도 및 광학현미경적 관찰을 실시하여 다음과 같은 결과를 얻었다. 간기능 지표효소인 혈청 ALT, AST 및 SDH 활성도는 다슬기와 마늘의 전처리로 $CCl_4$단독 투여군에 비해 통계적으로 유의성 있게 감소하였으나 혈청 ALP 활성도는 $CCl_4$ 투여로 증가된 활성을 다슬기와 마늘의 전처리로 감소시키지 못했다. 광학현미경적 관찰에서 $CCl_4$단독 투여군의 경우 인접한 괴사부위와 bridge를 형성한 central necrosis 영역에서 염증 세포의 침윤과 울혈현상이 나타났으나, 다슬기와 마늘의 전처리군에서는 중심영역에서 소핵을 갖는 부푼 형태의 초기 가역적 손상을 입은 간세포가 관찰되었을 뿐 $CCl_4$ 단독 투여군과 같은 염증 세포의 침윤이나 괴사는 관찰되지 않았다. 이상의 실험 결과를 종합해 볼 때, 다슬기와 마늘의 혼합 건조 분말이 간세포의 기능을 유지시킴으로써 사염화탄소 투여에 의해 유발된 간손상을 억제하여 간조직을 보호할 수 있을 것으로 사료된다.
사염화탄소(carbon tetrachloride, 이하 $CCl_4$라함)에 의한 간 중독시 flavonoids가 미치는 영향을 보기 위하여 $CCl_4$를 투여한 뒤 rutin, hesperidin을 주사하여 경시적으로 간 microsome과 혈청중 total cholesterol, transaminase(GOT, GPT) 및 alkaline phosphatase(Alk. P) 활성도를 측정 비교하여 다음과 같은 결론을 얻었다. (1) 간장중 total cholesterol 함량은 rutin과 hesperidin 1회 투여후 1일에 대조군과 비교할 때 감소하다가 2일에 45%까지 증가되었으나 4일 후에는 정상으로 완전히 회복 되었다. 이와 같은 현상은 혈청중 cholesterol 함량에도 직접적으로 영향을 주어 시간이 경과함에 따라 어느정도 저하됨을 알 수 있었지만 혈청중에서 positive한 결과를 얻기는 어려웠다. (2) 간의 microsome 분획의 Alk. P 활성도는 대조군의 활성치에 비하여 2일에 급격히 증가를 보인 후 4일만에 대조군보다 낮은 활성을 보이다가 6일까지 완만하게 증가하였다. 그러나 본 연구에서 Alk. P 활성도는 $CCl_4$ 투여군과 비교할 때 flavonoids 투여후 별다른 변동은 없었다. 그러나 혈청중 Alk. P 활성도는 hesperidin 투여로 인하여 저하 효과를 나타냈다. (3) GPT 활성도를 측정한 결과 간의 microsome 분획에서는 hesperidin 2회 투여에서, 그리고 혈청중 GPT 활성은 rutin과 hesperidin 두군 모두에서 아주 낮은 활성을 보여 flavonoids가 $CCl_4$ 투여로 인한 간독성을 해독하는 작용이 있음을 보여 주었다. (4) $CCl_4$독성을 일으킨 흰쥐의 간 microsome내 GOT 활성은 rutin 투여로 인하여 불규칙한 변동을 보여 rutin이 GOT활성에 별다른 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 또한 hesperidin 투여군에서는 증감의 변동없이 대조군치와 거의 비슷한 수준을 유지하였지만 $CCl_4$ 투여군과 비교할 때 낮은 활성을 보였다. 혈청중에서 GOT 활성은 flavonoids 1회 투여군에서는 4일만에, 2회 투여군에서는 6일만에 서서히 영향을 미침을 알 수 있었다. 이상과 같이 $CCl_4$에 의하여 상승되는 total cholesterol, GPT, GOT, Alk. P의 활성도는 flavonoids중 rutin과 hesperidin 성분이 감소시키는 작용이 있는 것으로 보이며, 특히 hesperidin 성분은 $CCl_4$ 중독을 억제 또는 방어하고 치료에 효과가 있는 것으로 본다.
This study was performed to evaluate the effect of liver damage on toluene metabolism in rats pretreated with carbon tetachloride. Liver damage in rats was induced by administration of 0.1ml of carbon tetrachloride per 100g of body wight intraperitoneally every day for four weeks except the last day before sacrifice. One day before sacrifice, toluene was administered to the animals instead of carbon tetrachloride. Rats were sacrificed at the 1st, the 2nd, the 3rd and the 4th week after the first administration of carbon tetachloride. Based on the histopathological findings, liver weight and serum alanine aminotransferase, the $CCl_4$-preteated group was found to have gradual severe liver damage. Especially the degree of liver injury became increasingly severe throughout the whole course of the experiment. The contnts of hippuric acid in urine lower in the all groups pretreated with $CCl_4$than that of the control. The contents of hepatic cytochrome P450(CYP), benzylalcohol dehydrogenase and benzaldehyde dehydrogenase activities were decreased in $CCl_4$-pretreated rats than those of the control. The $CCl_4$treated animals showed the gradual decreased activities of these enzyme as injection times elapsed. Km values of the benzylalcohol dehydrogenase in pooled liver samples from $CCl_4$-pretreated or control groups were similar. On the other hand, Vmax values of the $CCl_4$-pretreated group was lower than of the control. Therefore, it can be concluded that reduction of the toluene metabolism in damaged rat liver induced with $CCl_4$was due to the inhibition of CYP content, bezylalcohol and benzaldehyde dehydrogenase activities which related with toluene metabolic enzyme system.
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[게시일 2004년 10월 1일]
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